核糖体沉降系数.doc

《核糖体沉降系数.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、沉降系数（sedimentationcoefficient）用离心法时，大分子沉降速度的量度，等于每单位离心场的速度。或s=v/ω2r。s是沉降系数，ω是离心转子的角速度（弧度/秒），r是到旋转中心的距离，v是沉降速度。沉降系数以每单位重力的沉降时间表示，并且通常为1～200×10-13秒范围，10-13这个因子叫做沉降单位s，即1s=10-13秒，如血红蛋白的沉降系数约为4×10-13秒或4s。大多数蛋白质和核酸的沉降系数在4s和40s之间，核糖体及其亚基在30s和80s之间，多核糖体在100s以上。核糖体（Ribosome），是核糖核酸蛋白体的简称。是细胞器的一种，为椭球形的粒状小体，原

2、核与真核细胞蛋白质合成的部位。70S核糖体是核糖体的一种。沉降系数根据在超速离心机的离心时的沉降系数，原核生物的核糖体为70S。数字代表沉降系数值，数值越大核糖体也就越大。亚基分述70S核糖体由30S和50S两个亚基组成。30S亚基含有一个16SrRNA分子和21种不同蛋白质。50S亚基含有一个5SrRNA，以及32种不同蛋白质。70S核糖体并不只存在于原核生物细胞内。真核生物的线粒体、叶绿体和细胞核也有各自的核糖体，它们的沉降系数均为70S。因此，可以依据70S核糖体的存在来判别原核生物。　质粒　　质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位，包括真核生物的细胞器和细菌细胞中染色体以外的脱氧核

3、糖核酸(DNA)分子。现在习惯上用来专指细菌、酵母菌和放线菌等生物中染色体以外的DNA分子。在基因工程中质粒常被用做基因的载体。　　目前，已发现有质粒的细菌有几百种，已知的绝大多数的细菌质粒都是闭合环状DNA分子(简称cccDNA)。细菌质粒的相对分子质量一般较小，约为细菌染色体的0.5%～3%。根据相对分子质量的大小，大致上可以把质粒分成大小两类：较大一类的相对分子质量是40×106以上，较小一类的相对分子质量是10×106以下(少数质粒的相对分子质量介于两者之间)。每个细胞中的质粒数主要决定于质粒本身的复制特性。按照复制性质，可以把质粒分为两类：一类是严紧型质粒，当细胞染色体复制一次时，

4、质粒也复制一次，每个细胞内只有1～2个质粒；另一类是松弛型质粒，当染色体复制停止后仍然能继续复制，每一个细胞内一般有20个左右质粒。一般分子量较大的质粒属严紧型。分子量较小的质粒属松弛型。质粒的复制有时和它们的宿主细胞有关，某些质粒在大肠杆菌内的复制属严紧型，而在变形杆菌内则属松弛型。　　在基因工程中，常用人工构建的质粒作为载体。人工构建的质粒可以集多种有用的特征于一体，如含多种单一酶切位点、抗生素耐药性等。常用的人工质粒运载体有pBR322、pSC101。pBR322含有抗四环素基因(Tcr)和抗氨苄青霉素基因(Apr)，并含有5种内切酶的单一切点。如果将DNA片段插入EcoRI切点，不会

5、影响两个抗生素基因的表达。但是如果将DNA片段插入到HindIII、BamHI或SalI切点，就会使抗四环素基因失活。这时，含有DNA插入片段的pBR322将使宿主细菌抗氨苄青霉素，但对四环素敏感。没有DNA插入片段的pBR322会使宿主细菌既抗氨苄青霉素又抗四环素，而没有pBR322质粒的细菌将对氨苄青霉素和四环素都敏感。pSC101与pBR322相似，只是没有抗氨苄青霉素基因和PstI切点。质粒运载体的最大插入片段约为10kb(kb表示为千碱基对)。以高中生物角度来看，质粒是游离在细胞质基质中的环状DNA，主要存在于细菌等原核生物中，负责某些蛋白质与激素、抗生素等的分泌。而叶绿体从结构上

6、看比质粒要复杂得多，虽然叶绿体的DNA也是环状结构，但毕竟叶绿体不只有DNA，还有双层膜，其中还有70S核糖体，多种与光合作用DNA复制等基础生命活动有关的酶，远远比质粒复杂。因此叶绿体不能算做质粒。线粒体与叶绿体是一样的道理，自然也不能算做的质粒。首先，质粒是游离在细胞质基质中的环状DNA，主要存在于细菌等原核生物中，是携带某些抗生素、抗药性以及一些蛋白的基因。线粒体和叶绿体是半自主性细胞器半自主性细胞器的概念：自身含有遗传表达系统(自主性)；但编码的遗传信息十分有限，其RNA转录、蛋白质翻译、自身构建和功能发挥等必须依赖核基因组编码的遗传信息(自主性有限)。很多学者把线粒体和叶绿体的遗传

7、信息系统称为真核细胞的第二遗传信息系统，或核外基因及其表达体系。这是因为研究发现，线粒体和叶绿体中除有DNA外，还有RNA(mRNA、tRNA、rRNA)、核糖体、氨基酸活化酶等。说明这两种细胞器都具有独立进行转录和转译的功能。也就是说，线粒体和叶绿体都具有自身转录RNA和翻译蛋白质的体系。但迄今为止，人们发现叶绿体仅能合成13种蛋白质，线粒体能够合成的蛋白质也只有60多种，而参与组成线粒体和叶绿体的蛋白质却