溶氧对灵芝液体深层培养产胞外多糖的影响.doc

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1、溶氧对灵芝液体深层培养产胞外多糖的影响　　摘要：以Ｃａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍｘｙ０５为生产菌，采用亚硫酸盐法测定了摇床上摇瓶不同装液量下摇床转速氧容积传递系数，比较了不同氧容积传递系数对菌丝生长和产胞外多糖的影响，确定氧容积传递系数控制在３８～６８ｈ－１时，发酵效果最佳。在发酵罐上比较了恒定发酵罐搅拌转速、恒定发酵液ＤＯ值和分段控制发酵液ＤＯ值３种不同控氧方式，结果表明，分段控制发酵液ＤＯ值效果最佳。在最佳的分段控氧模式下菌丝干重达１０．８８ｇ／Ｌ，胞外多糖达２．８８ｇ／Ｌ。　　关键词：溶氧；灵

2、芝；发酵；胞外多糖　　中图分类号：Ｓ５６７．３＋１文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11418－3804-03　　　　ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＤｉｓｓｏｌｖｅｄＯｘｙｇｅｎｏｎＥｘｏｃｅｌｌｕｌａｒＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓＰｒｏｄｕｃedｂｙＤｅｅｐＬｉｑｕｉｄＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＧａｎｏｄｅｒｍａlｕｃｉｄｕｍ　　　　ＺＨＯＵＸｉａｏ－ｐｉｎｇ，ＹＡＮＧＨａｉ－ｊｕｎ　　　　　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｃａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍｘｙ０５ｗａｓｓｅｌｅｃｔｅｄｔｏｐｒｏｄｕｃｅｐｏｌｙｓａｃｃ

3、ｈａｒｉｄｅs．ＴｈｅｖａｌｕｅｓｏｆｋＬａｏｆｆｌａｓｋｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｖｏｌｕｍｅｏｆｌｉｑｕｉｄｍｅｄｉｕｍｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｏｔａｔｅｓｐｅｅｄｏｆsｈａｋｅｒｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｍｅｔｈｏｄｏｆｓｕｌｐｈｉｔｅ．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｋＬａｖａｌｕｅｏｎthegrowthandfermentationofＣ.ｌｕｃｉｄｕｍｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ，ａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗedｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｋＬａｖａｌｕｅwaｓ３８～６８ｈ-1．Ｔｈｅｔｈｒｅｅｍｅ

4、ｔｈｏｄｓｏｆｄｉｓｓｏｌｖｅｄｏｘｙｇｅｎｃｏｎｔｒｏｌｉｎｆｅｒｍｅｎｔｏｒ，ｆｉｘｅｄｒｏｔａｔｅｓｐｅｅｄｏｆｆｅｒｍｅｎｔｏｒ，ｆｉｘｅｄＤＯｖａｌｕｅｏｆｆｅｒｍｅｎｔｏｒａｎｄｓｕｂｓｅｃｔｉｏｎｃｏｎｔｒｏｌｏｆＤＯｖａｌｕｅｏｆｆｅｒｍｅｎｔｏｒ，ｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ，ａｎｄｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗedｔｈｅｓｕｂｓｅｃｔｉｏｎｃｏｎｔｒｏｌｏｘｙｇｅｎｍｏｄｅwaｓｔｈｅｏｐｔｉｍａｌ．Iｎｔｈｅｂｅｓｔｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｔｈｅｄｒｙｗｅｉｇｈｔｏｆｈｙｐｈａwaｓ１０．８

5、８ｇ／Ｌ，ｔｈｅｅｘｏｃｅｌｌｕｌａｒｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｒｅａｃｈed２．８８ｇ／Ｌ．　　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｉｓｓｏｌｖｅｄoｘｙｇｅｎ；Ｃａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ；ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ；ｅｘｏｃｅｌｌｕｌａｒｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ　　　　灵芝，为担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌，是一种重要的药用真菌。现代医学证明其具有防止动脉硬化，提高机体免疫力，抗肿瘤，抗衰老等［１］。灵芝多糖是灵芝中最有效的成分之一，受到广泛的关注［２］。传统上，灵芝采用固体培养，收获其子实体。但灵芝子

6、实体形成周期长，所需劳动强度大。现代工业主要通过液体深层培养收获其菌丝和发酵液，从中提取灵芝多糖。灵芝属于好氧真菌，在深层培养要获得最大的菌丝生物量和灵芝多糖产量，必须供给适量的氧气。在灵芝的摇瓶液体深层培养研究中，溶氧主要通过改变摇瓶装液量和摇床转速来调节［３，４］。试验研究了摇瓶转速和装液量与氧容积传递系数的关系，确定了摇瓶液体深层培养的最佳氧容积传递系数范围；进一步在发酵罐上研究了不同控氧模式对灵芝液体深层培养产胞外多糖的影响，确定最佳的分段控氧模式，以供相关研究和生产参考。　　１材料与方法　　

7、１．１材料　　１．１．１菌种灵芝Ｃａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍｘｙ０５，信阳农业高等专科学校生物技术实验室保存。　　１．１．２菌种培养基①斜面保藏培养基：葡萄糖０．１％，蛋白胨１％，酵母膏１％，ＮａＣｌ０．２５％，琼脂２％，ｐＨ为５．５，０．１ＭＰａ２０ｍｉｎ灭菌；②活化斜面培养基：葡萄糖０．２％，蛋白胨１％，酵母膏１％，ＮａＣｌ０．２５％，琼脂２％，ｐＨ为５．５，０．１ＭＰａ２０ｍｉｎ灭菌；③种子培养基：葡萄糖２％、酵母粉０．２％、ＫＨ２ＰＯ４０．１％、ＭｇＳＯ４・７Ｈ２Ｏ０．１％，ｐＨ为５．５，

8、０．１ＭＰａ２０ｍｉｎ灭菌；④发酵培养基：葡萄糖５％，蛋白胨１％，牛肉膏１％，ｐＨ为５．５，０．１ＭＰａ２０ｍｉｎ灭菌。　　１．１．３主要仪器超净工作台，苏州净化仪器厂；生化培养箱，广东医疗器械厂；电热鼓风干燥箱，天津市试验仪器厂；电子分析天平，上海良平仪器仪表有限公司；台式高速离心机，湖南湘仪实验室仪器；立式双层恒温摇床，郑州南北仪器设备有限公司；１０Ｌ在位灭菌自动台式发酵罐，上海世远生物设备工程有限公司。　　１．２培养方法　　１．２．１菌种活化从斜面