过表达肝细胞核因子4α脐带间充质干细胞促进小鼠大部肝切后肝再生.pdf

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1、·64·中华老年多器官疾病杂志2015年1月28B第l4卷第1期ChinJMultOrganDisElderly，Vo1．14，No．1，Jan28，2015基础研究·过表达肝细胞核因子4脐带间充质干细胞促进小鼠大部肝切后肝再生吴宁，马永，翟秀宇2，张玉玲。，张勇，张祺祺4，杭化莲4，夏强4，卞建民(南京医科大学附属南京医院普外科，南京210006；吉林大学第一医院泌尿外二科，吉林130021；。遵义医学院附属医院贵州省细胞工程重点实验室，遵义563003；上海交通大学医学院附属仁济医院肝脏外科

2、，上海200127)【摘要】目的探讨人源性脐带间充质干细胞(UC．MSC)以及过表达肝细胞核因子4a(HNF40【)的UC．MSC能否促进小鼠大部肝切后肝再生。方法体外分离、培养、鉴定人UC．MSC，慢病毒转染过表达HNF4a。体外收集细胞培养上清液，将L02与上清液共培养，通过细胞增殖实验试剂盒(CCK8)检测细胞增殖活性。体内实验建立肝大部切除模型(约70％)，分别经尾静脉向肝切除小鼠移植0．9％生理盐水(NS)、MSC、MSC—HNF4a。48h后比较3组肝切后肝再生的变化，通过免疫组化来

3、观察肝标本Ki67的表达。结果成功分离鉴定UC．MSC，并且成功建立稳定过表达HNF4a的MSC。体外实验MSC组和MSC．HNF4a组中L02的增殖能力都明显高于NS组(P<0．01)，MSC组高于MSC．HNF4姐(P<0．05o同样体内实验相对于NS组，经MSC或MSC．HNF4a细胞处理的肝脏，其Ki67的表达明显高于NS组(P<0．01)，同样MSC组高于MSC—HNF4潮(P<0．05o结论UC．MSC和过表达HNF4a的MSC都分泌一系列因子促进肝再生。【关键词】小鼠；肝再生；间充

4、质干细胞；肝细胞核因子40【【中图分类号】R333．4【文献标识码】A【DOI】10。119158．issn．1671．5403。2015．01．016oVerexpressiOnofhepatocytenuclearfactor4ainumbilicalcordmesenchymalstemcellspromotesliverregenerationaftersubtotalhepatectomyinmiceWUNing，MAYong，ZHAIXiu—Yu，ZHANGYu—Ling，ZHANG

5、Yong，ZHANGQi—Qi，HANGHua．Lian~．XIAQiang4．BIANJian—Min(DepartmentofGeneralSurgery,NanjingHospitalAfiliatedtoNanjingMedicalUniversity,Nanjing210006，China；theSecondDepartmentofUrology,theFirstHospitalofJilinUniversity,Jilin130021，China；GuizhouProvincialK

6、eyLaboratoryofCellEngineering，AfiliatedHospitalofZunyiMedicalCollege，Zunyi563033，China；DepartmentofLiverSurgery,RenjiHospital，SchoolofMedicine，ShanghaiJiaotongUniversity,Shanghai200127，China)【Abstract】ObjectiveToinvestigatewhetherhumanumbilicalcordme

7、senchymalstemcells(uc-MSC)andthecellswith0Verexpressionofhepatocytenuclearfactor4a(HNF4a)canpromoteliverregenerationaftersubtotalhepatectomyinmice．MethodsAfterhumanUC—MSCwereisolated，culturedandidentified，thecellsweretransfectedwithlentiviralvectorLV

8、-HNF4a．ThenthecellsupernatantwascollectedandculturedwithL02cells，andtheL02cellviabilitywasdetectedbycellcountingkit一8(CCK8)assay．Intheinvivostudy,atotalof18micewererandomlydividedinto3groups=6foreachgroup)：normalsaline(NS)group，MSCgroupandMSC—HNF4agr