环糊精包合物荧光分析方法研究.pdf

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1、·376·中国药物与临床2015年3月第15卷第3期ChineseRemediesinicsrcQ，．!·药物研究·分解后白术挥发油／环糊精包合物荧光分析方法研究朱秀卿赵红红阎克里史艳春刘芳芳白术挥发油是白术药材抗肿瘤有效成分，挥发油抗肿瘤1资料与方法作用确切_l_。挥发油中苍术酮不稳定，易氧化分解[2]。1．1仪器和材料研究表明，分解前、后挥发油对肿瘤细胞株均具有杀伤VarianCaryEclipse荧光分光光度计(美国)，HJS一8数显抑制作用，作用浓度和作用时间与细胞生长抑制率呈正相恒温搅拌水浴锅(杭州)，SK250H超声仪(上海)；KDC一1044关。分解前、后挥发

2、油均具有诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用。低速离心机(安徽)；FA．1004分析天平(上海)(Maxl00g，D=分解前的挥发油主要在凋亡早期发挥作用，分解后的挥发油0．0001g)；KDC1044离心机(安徽)；DHG鼓风干燥箱(上在凋亡早期、晚期均发挥作用，分解前、后挥发油均具有抗肿海)；p—CD购于郁南县永光环糊精有限公司，纯度99．5％。乙瘤药用研发价值[3，。对分解前、后挥发油中化学成分种类及醇(分析纯)，水(去离子水)。其相对含量进行的比较研究结果表明，分解后挥发油中极性1．2白术挥发油提取成分占总化学成分90％以上，鉴定出的挥发油中的化学成分取白术药材干燥根茎。粉碎

3、，过20目筛，置于超临界二有27个，占总成分的91％。挥发油中苍术酮分解完成后，挥氧化碳萃取(SPE)釜中。萃取压力(23～25)MPa，萃取温度50发油中的其他不稳定成分也随之完全分解，挥发油中各化学℃；分离压力(7-8)MPa，分离温度50℃，每次提取4h。收集成分及其相对含量可处于一种稳定状态[5]。据此，我们确定了挥发油，于一20℃避光条件下保存，备用。分解后白术挥发油为抗肿瘤药用研发对象。1．3分解后挥发油制备白术挥发油直接与药用辅料混合进行制剂研发，会出现将提取得到的挥发油置于密闭石英玻璃容器中，放置于药物损失量大，生产制剂不易保存等问题。挥发油经环糊精紫外灯光

4、光照条件下进行照射。直到挥发油中苍术酮100％包合后，掩盖了挥发油不良气味，提高了挥发油的稳定性，挥分解为止，得到分解后挥发油。于一4oC条件下保存，备用。发油水溶性大大增加，挥发油，B．环糊精(3-CD)包合物便于1．4分解后挥发油／13．CD包合物制备保存，方便制剂制备。制备获得的分解后挥发油，环糊精包合本研究采用饱和水溶液法，进行挥发油／13．CD包合物的物，可以根据临床需要，制成不同的药用剂型如乳剂、胶囊、制备。准确称取一定质量的BCD，加12倍量的蒸馏水，加热片剂等抗肿瘤新药剂型。使其完全溶解，制成饱和溶液。溶液温度降至40℃，置于恒文献检索发现，对于挥发油／13

5、．CD包合物中挥发油含量温磁力水浴锅内恒温搅拌。以13-CD：挥发油：6：1(质量分数)的测定，几乎全是按照药典收载的水蒸气蒸馏法进行分析测比例称取挥发油，挥发油用适量乙醇溶解，缓缓加入p—CD饱定。实验中我们发现，在测定过程中，水蒸气蒸馏法加热时间和水溶液中，搅拌1．5h，取出，放置至室温，4℃放置24h，抽长，对白术挥发油中不稳定性成分影响大，需要的样品量多，滤。包合物用少量蒸馏水和乙醇洗涤，4O。c恒温干燥，研碎，实验时间长，操作相对复杂，实验结果误差较大，对白术挥发得白色粉末状挥发油／13一CD包合物。油，B．cD包合物包合率测定和包合物中含油率测定结果带来1．5溶

6、液制备较大的影响。1．5．1挥发油储备液制备：分别精密称取25mg分解后挥发本研究依据CD微溶于乙醇，白术挥发油易溶于乙醇油，用适量乙醇溶解．定容于25ml容量瓶中，制成浓度为1的性质．并在实验中发现分解前、后挥发油乙醇溶液具有较rag／m1的分解后挥发油储备液。强的荧光发射特点，形成了我们的研究思路。研究采用荧光1．5．2挥发油乙醇稀溶液制备：分别取1ml“1．5．1”项下分解分光光度法，研究建立分解后挥发油il3一CD包合物中挥发油后挥发油储备液。用乙醇稀释，制成浓度为0．1b~g／ml的挥发含量和包合率测定分析方法。应用该方法可对分解后白术挥油乙醇稀溶液，备用。发油／

7、13一CD包合物的包合率和含油率进行分析，可对分解后1．5．3p．CD乙醇溶液制备：精密称取．CD30mg，加l0ml挥发油／B—cD包合物制备生产过程中的质量进行控制，从而乙醇，超声10min，4℃放置24h，以离心半径为30cm，转速推动白术挥发油抗肿瘤新药制剂研发工作。2500r／min离心10min．取出上层清液，备用。1．5．4挥发油／13一CD包合物中挥发油脱包溶液制备：精密称DOI：10．11655~gywylc2015．03．029取分解后挥发油／13一CD包合物30mg，加10m1乙醇，超声10作