噬菌体抗体库筛选技术研究进展.pdf

《噬菌体抗体库筛选技术研究进展.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、·70·微生物学免疫学进展2012年第40卷第1期ProginMicrobiolImmunolFeb．2012，Vo1．40，No．1·综述·噬菌体抗体库筛选技术研究进展毕司英综述；毛晓燕审校(兰州生物制品研究所，兰州730046)摘要：噬菌体抗体库技术是一项新兴的基因工程抗体技术，应用这项技术获得高特异性抗体的关键之一就是筛选环节。根据抗原性质以及筛选目的的不同，筛选方法的选择也不相同，各种筛选策略的优化对中和抗体的获得有至关重要的作用。关键词：噬菌体展示；噬菌体抗体库；筛选技术；优化中图分类号：Q939．48文

2、献标志码：A文章编号：1005—5673(2012)01—0070—04Theadvancesonscreeningtechnologyofphage—displayantibodylibrariesBISi—ying．MAOXiao-yan(LanzhouInstituteofBiologicalProducts，Lanzhou730046，China)Abstract：Phageantibodylibraryisanewengineeredantibodytechnology，thescreeningproce

3、dureisimportanttoobtainhighlyspecificantibodies．Accordingtothepropertyofantigensandscreeningpurposes，thescreeningmethodsarediffer—ent．Theoptimizationofscreeningstrategyiscriticaltoobtainneutralizingantibodies．Keywords：Phagedisplay；Phageantibodylibrary；Screenin

4、gtechnology；Optimization噬菌体展示技术(Phagedisplaytechnology)是体抗体库分天然库、合成库和特免库，特免抗体库来近年来新兴起的一项分子生物学技术，其基本原理源于经特异抗原免疫过的动物，可较容易从中筛选是应用基因工程手段把外源DNA片段克隆到适当获得高亲和力的特异性抗体。天然库与合成库则需的噬菌体载体上，使外源DNA片段对应的表达产物要抗体库容量足够大，只有达到l0～10m以上与噬菌体衣壳蛋白形成融合蛋白，呈现在噬菌体表时J，才能保证抗体的多样性，从理论意义上可满面，被展

5、示的多肽或蛋白可以保持相对的空间结构足各种抗原特异性抗体的淘选。和生物学活性。然后利用靶分子，采用适当的筛选从噬菌体抗体库中获得高亲和力的特异性抗方法除去非特异结合的噬菌体，最终筛选出能特异体，首先要做的就是应用合适的筛选方法对噬菌体结合靶分子的目的噬菌体。外源多肽或蛋白表达在抗体库进行筛选，筛选方法的选择和优化对该项技噬菌体的表面，而其编码基因作为噬菌体基因组的术有至关重要的作用。近年来，噬菌体抗体库的筛一部分可通过噬菌体DNA序列测定得到，这样就建选方法层出不穷，各种方法都得到了很大发展。用立了基因型和表现型之

6、间的对应关系。如果将编码来筛选的靶分子更是多种多样，有单一靶抗原分子，抗体分子的基因与噬菌体外壳蛋白基因融合，使表也有复合靶抗原分子，还有完整的细胞或组织，甚至达的抗体附着在噬菌体颗粒表面，就形成了噬菌体用整个生物体进行筛选等，复杂程度也在不断增加。抗体。如果将序列多种多样的抗体基因克隆到表达针对某一具体抗原，可以根据此抗原的性质以及需载体上，表达在噬菌体表面，就得到了噬菌体抗体要筛选的抗体的功能特性，灵活地选择合适的筛选库。噬菌体抗体库改变了单克隆抗体传统的制备方方法。法J，不再依赖免疫系统而在体外制备抗体。噬菌

7、1常用筛选方法收稿日期：2011-10—31；修回日期：2011—11-241．1固相筛选作者简介：毕司英(1986．)，女，硕士研究生，主要从事工程抗体相这种方法应用最广泛，根据文献[3]报道目前关研究。通信作者：毛晓燕，E-mail：maoxiaoyan2002@163．tom得到有中和活性的噬菌体抗体多数是由固相筛选得微生物学免疫学进展2012年第40卷第1期ProginMicrobiolImmunolFeb．2012，Vo1．40，No．1·71·到的，由此可见这是一种行之有效的筛选方法。固著的优势。首先在

8、液相中，抗原和噬菌体抗体都相筛选法就是将纯化或重组的抗原包被在固相介质可以自由地运动，抗原与噬菌体抗体碰撞、继而结合如酶标板、免疫试管或亲和层析柱上，然后加入待的概率将大大增加；其次，在液相中抗原可以保持其筛选的噬菌体抗体库孵育，经过多次“吸附一洗涤空间构象，并且噬菌体抗体可以结合抗原所有的表一解离一扩增”的过程，洗去非特异结合的或结合位，而在固相筛选中，抗