胶体金的制备.doc

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1、胶体金的制备胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，可聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态，形成带负电的疏水胶溶液，由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。1.煮金用容量瓶量取200ml超纯水加入到500ml锥形瓶中，将锥形瓶置于磁力加热搅拌器加热板上，放入磁力搅拌子，打开搅拌旋钮至适当速度。用移液器吸取2ml1%氯金酸溶液于上述200ml超纯水中，搅拌1min，关闭搅拌旋钮，打开加热旋钮，加热至沸腾。打开搅拌旋钮至适当速度，快速

2、加入经微孔滤膜过滤。1%柠檬酸三钠溶液3.6ml，溶液在2分钟内由灰色变黑色最后变为红色，再继续加热搅拌10分钟。关掉加热旋钮，适当速度搅拌至室温，定容至200ml，4~C保存。由于金颗粒的直径和制备时加入柠檬酸三钠的量是密切相关的，保持其他条件不变，仅仅改变柠檬酸三钠的量，可以制备出不同颜色的金溶胶，也就是不同颗粒的金溶胶，100mL氯金酸中柠檬酸三钠的量对金颗粒影响如下表0.01%氯金酸（mL）1%柠檬酸三钠（mL）金颗粒直径（nm）1005.010.01004.015.01001.525.010

3、01.050.01000.7560.01000.6070.01000.4298.01000.32147.01000.25160注：玻璃器皿必须彻底清洗，最好是经过硅化处理的玻璃器皿，或第一次配置胶体金稳定的玻璃器皿，再用双蒸水冲洗再用，否则影响金颗粒的稳定性，不能获得预期大小的金颗粒（硅化过程：将玻璃容器浸泡于5%二氯二甲硅烷的氯仿溶液中1min，室温干燥后，蒸馏水冲洗再干燥备用。）1.试剂必须保证严格的纯净，所有试剂必须用双蒸水或三蒸水并去离子后使用，并且使用前微孔过滤膜过滤，以除去可能混有的杂质。

4、2.配置胶体金溶液的PH以中性（ph7.2）较好，实验室尘粒要尽量减少，否则缺乏重复性。3.氯金酸极易吸潮，对金属有强烈的腐蚀性，不能使用金属钥匙，避免接触天平秤盘，由于氯金酸极易吸潮，配置时最好将一小包一次性溶解。4.金颗粒容易吸附在电极使之堵塞，故不能使用PH电极测定金溶液的PH值。影响金颗粒大小的因素1，如果有较多大小不等的金颗粒及有椭圆形、多角形存在时应重新制备。一般造成这种情况的主要原因：加还原剂时不是一次迅速加入，而是分多次加入，搅拌不均匀，或者速度太慢没有搅拌起来。制备量的多少、容器的大

5、小、加热时间也会影响胶体金颗粒的大小胶体金原理：胶体金免疫层析法将特异性的抗原或抗体以条带状固定在膜上，胶体金标记试剂（抗体或单克隆抗体）吸附在结合垫上，当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后，通过毛细作用向前移动，溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应，当移动至固定的抗原或抗体的区域时，待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留，聚集在检测带上，可通过肉眼观察到显色结果。该法现已发展成为诊断试纸条，使用十分方便。