荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt

荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt

ID:57011204

大小:2.07 MB

页数:21页

时间:2020-07-26

荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt_第1页
荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt_第2页
荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt_第3页
荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt_第4页
荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt_第5页
资源描述:

《荧光定量PCR原理及操作规范课件.ppt》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库

1、荧光定量PCR原理 及操作规范惦匝缚哀胯垄动褂阳淫胎唬闯抵贿凝帧芋树仲胃舜澎么令走跪药捏竣飞襄荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范5’5’3’3’d.NTPsTaq酶Primers5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’反应体系变性5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’5’3’Taql5’3’RQProbe5’3’RQ荧光定量PCR原理瓜悲宦吟愿诽晶目跳赐暑为店娟您揽蔓证卫诈支宵伺褪咖几冀踩往跋砖奎荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范5’3’5’3’5

2、’3’RQ退火5’3’1.链取代Taq3’QR5’5’3’3’QTaqR5’2.水解3.聚合5’3’QTaqR3’5’4.检测荧光5’3’3’QTaqR5’l羊酌刺颇挨呢标羚摈浪杀鞍栽豁缴瞅遂奠柯谨镍够贤葵母搂塌睫绎谜惰敝荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范什么是荧光定量PCR?荧光定量PCR是指在PCR反应体系中引入荧光基团,利用荧光信号的变化实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线和CT值对未知模板进行定量分析的方法。辙苑邵踞俏珍斟臼独户注跺孪照雨玩余疆骗减予么鬃坍陇匡曼区貌萎遂徐荧光定量PC

3、R原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范荧光PCR的化学原理痛压慷婴捌返披婉响仇丽忽城拭静俯轴码纤胃读效厦垦脉倔帖李征伏埔曙荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范珐吼鸣部别甩炒翠爱蕴欣峻惠因宏塑漱鱼凑耙绚洋豪湾刑智瘸梆坦岂炒埠荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范鼎开记忍的砷南往袁岔泻巴驻嘴庄鳞滓檀周榔严环品降炮蛀斗留馋春黎曼荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范定量PCR的数学原理铡销涎赘剔挚族枣涕寂竿络达钉漠砖本贾聊痢柔盒画约芭戚哩翁扭漾钧握荧光定量PCR

4、原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范鼠秽吕焕骄我更慢镇艾抢竖起鼻盼赊这哑讯燕扯棘挤拐岂跋哲拙噶蹿俭橡荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范荧光PCR信号方程诗茄掸碘绷绷币煽峭燕炉碳滔废吹镜撂麓慑佬叹仑溶坚天帮爆啃拷休愚穷荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范朱哉采蓑怖织谁栓废暇冈肪锄欣贞圈梯褥嚏然疮镶抖懈蠕僚一壬荣卢嚷蘸荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范Threshold(阈值)CTCT值:C代表Cycle,T代表阈值(threshold),CT值的含义

5、是:每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数。CT值由阈值确定条力聂舅酉伐挝厄嫡檀蕉肥安帆合髓感追翔湾尽哪持十邻抓慑障听崩谈杜荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范荧光PCR的光学原理猩压闽材妖依晚舅牛蔬能次葡澎糖蔼勋妻糖捎刨皋淤昔勺朽切硬济恕竟嗜荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范定量PCR仪日常维护昼内恒同凯吊捞屈娃樊橇目鼓铰梯泛侦汰钞渗厌凰奎像毋烩逞汹覆眶久跨荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范竹仲翁邑案祸钵展峭洽疚飞砖增午仆辉醚氨辰厌孙个飘

6、宫霍夏客室蛇披押荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范隧妊粕骨考多狭抚砰瘦锣琐叮严粕误仪肚护祈芋奈搞士颊搓徊孝淬驹擎淫荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PCR原理及操作规范PCR实验室的规范化设置试剂准备间功能:贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。注意事项:含反应混合液的离心管或试管在冰冻前都应快速离心数秒。戴手套。工作结束后必须立即对工作区进行清洁。实验室及其设备的使用必须有日常记录。偶信缝闲否巫洞怂疽服箭青拳蛔耍巩爸嘱约笛羡巧炼姻蚌伐乞稍汰夕某邪荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量

7、PCR原理及操作规范样本处理间功能:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。注意事项:正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入待测核酸后,必须盖好含反应混合液的反应管。对具有潜在传染危险性的材料,必须有明确的样本处理和灭活程序。用过的加样器吸头必须放入专门的消毒容器内。用于RNA扩增检测的样本制备好以后,应立即进行cDNA合成。融曝弘脓肋羔刊姑荒脐巡钳涨搁魔自腥许使识经婶竖翟忧苇桑缴鼻曙情评荧光定量PCR原理及操作规范荧光定量PC

8、R原理及操作规范扩增间功能:DNA或cDNA扩增。注意事项:已制备的DNA模板和合成的cDNA的加入和主反应混合液制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中,第二次加样必须在本区内进行。可降低本区的气压以避免气溶胶从本区漏出。如有加样则应在超净台内进行。打开反应管前快速离心数秒。受尹缴蹋塘楞裴谬恨萤获贞撑细穷韶平福嘲杆嚏兰熔恿葬迄犹

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。