行业标准：GBT 26322-2010 工业循环冷却水中亚硝化菌的测定MPN法.pdf

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1、ICS71．040．40；13．060．70G76圆雪中华人民共和国国家标准GB／T26322—201O工业循环冷却水中亚硝化菌的测定MPN法Examinationofnitritebacteriainindustrialcirculatingcoolingwater——MPNtest2011一O卜04发布2011—12—01实施车瞀粥鬻瓣警矬瞥霎发布中国国家标准化管理委员会议19前言GB／T26322—2010本标准按照GB／T1．1—2009给出的规则起草。本标准由中国石油和化学工业联合会提出。本标准由全国化学标准化技术委员会水处理剂分会(sAc／Tc63／sc5)

2、归口。本标准负责起草单位：中海油天津化工研究设计院、广州市特种承压设备检测研究院。本标准主要起草人：张全、李琳、黎华、滕厚开、杜玉辉。GB／T26322—2010工业循环冷却水中亚硝化菌的测定MPN法1范围本标准规定了工业循环冷却水中亚硝化菌的测定方法。本标准适用于工业循环冷却水中亚硝化菌的测定，也适用于原水、生活用水及黏泥中亚硝化菌的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB／T603化学试剂试验方法中所用制剂及制品的制备(GB

3、／T6032002，IsO6353—1：1982，NEQ)GB／T6682分析实验室用水规格和试验方法(GB／T6682—2008，IsO3696：1987，MOD)3方法提要www.bzfxw.com在28℃～30℃下，恒温培养试样14d后，先采用格里斯氏(Griess)试剂定性判断亚硝化菌的存在。如果溶液呈红色，表明为阳性反应；如果溶液未呈红色，表明为阴性反应。再采用MPN技术对被测试样中的亚硝化菌进行计数。4试剂和材料4．1本标准所用试剂，除非另有规定，应使用分析纯试剂和符合GB／T6682中三级水的规定。试验中所需制剂及制品，在没有注明其他要求时，均按GB／T6

4、03之规定制备。4．2硫酸铵。4．3碳酸钙。4．4磷酸二氢钠。4．5磷酸氢二钾。4．6硫酸锰(MnS0t·4H。0)。4．7硫酸镁(MgS0t·7Hz0)。4．8对氨基苯磺酸。4．9a萘胺。4．10盐酸溶液：l+11。4．11乙酸溶液(10％)。4．12氢氧化钠溶液：40g／L。4．13乙醇溶液：体积分数为75％。4．14牛皮纸。www.bzfxw.comGB／T26322—20104．15医用脱脂纱布。4．16医用脱脂棉。5仪器、设备5．1无菌箱(室)或超净工作台。5．2蒸汽压力灭菌器。5．3生化培养箱。5．4电热干燥箱：温度可控制在60℃～280℃。5．5刻度吸管：

5、1mL。5．6刻度吸管：10mL。5．7试管：d20mm×200mm。5．8试管架。5．9磨口试剂瓶：l000mL。5．10容量瓶：1000mL。5．11搪瓷量杯：1000mL。5．12白色比色瓷板。6试验前准备6．1无菌稀释水的制备6．1．1生理盐水的配制：称取8．5g氯化钠，溶解在1000mL水中，混匀。6．1．2将生理盐水分装在d20mm×200mm的试管中，每管9mL，塞上棉塞，用牛皮纸把试管口包好，用蒸汽压力灭菌器于(121±1)℃灭菌15min～30min。6．2富集培养基的制备称取下列试剂：硫酸铵(NH。)：s042．og；磷酸二氢钠NaH2P04o．25

6、g；磷酸氢二钾K。HPOto．75g；碳酸钙Cac0。5．og；硫酸锰MnSO。·4H20o．01g；硫酸镁MgS04·7H20o．03g。将上述试剂加水约950mL，在电炉上加热溶解后，趁热用四层医用脱脂纱布过滤于搪瓷量杯中。用热水补充至1000mL，用氢氧化钠溶液调节pH值至7．o～7．2，并分装在d20mm×200mm的试管中，每管10mL，塞上棉塞，用牛皮纸把管口包好。十个一捆，用蒸汽压力灭菌器于(121土1)℃灭菌15min～30min。6．3指示剂的制备格里斯氏(Griess)试剂A液：对氨基苯磺酸o．5g，乙酸溶液(10％)150mL，保存在棕色瓶中。B液

7、：a一萘胺o．1g，水20mL，乙酸溶液(10％)150mL，保存在棕色瓶中。2GB／T26322—20106．4刻度吸管的灭菌6．4．1将洗净并烘干后的吸管粗端塞上医用脱脂棉，棉花量要适宜，长度大约10mm～15mm，棉花不宜露在口外，多余的棉花可以用火焰烧掉。6．4．2每支刻度吸管用一条约40mm～50mm宽的牛皮纸条，以45。左右螺旋形卷起来，吸管的尖部在头部，粗端将多余的纸条折叠打结，不使散开，标上量度，若干支扎成一束，置电热干燥箱中，于(160士2)℃灭菌2h。6．5采样瓶的灭菌将洗净并烘干后的l000mL磨口试剂瓶瓶口和瓶颈用