乌梁素海底泥厌氧不产氧光合细菌的富集培养后细菌多样性&一株盐碱湖细菌的分离、培养及分类鉴定.pdf

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1、分类号Q93学校代码10129UDC579学号08210028乌梁素海底泥厌氧不产氧光合细菌的富集培养后细菌多样性&一株盐碱湖细菌的分离、培养及分类鉴定BacterialDiversityofEnrichmentCultureforAnaerobicAnoxygenicPhototrophicBacteriainULansuhaiLakeSluge&IsolationandClassificationofaBacteriumIsolatedfromHaloalkalineLake申请人：杨彩霞学科门类：理学学科专业：生物化学

2、与分子生物学研究方向：应用与环境微生物指导教师：刘惠荣副教授冯福应副教授论文提交日期：二○一一年五月摘要厌氧不产氧光合细菌(Anaerobicanoxygenicphototrophicbacteria，AnAnPB)在水生生态系统物质和能量循环中具有重要作用和意义。本文通过对乌梁素海富底泥AnAnPB进行了富集培养，并构建和分析了基于16srDNA、pufLM、bchY的基因文库，以期揭示富集培养后乌梁素海菌群结构变化和AnAnPB富集情况。研究结果表明，在16SrDNA基因文库中，利用HaeIII对16srDNA基因97

3、个克隆子进行单酶切产生了20种条带，文库覆盖率达77%；在pufLM文库中，pufLM覆盖率为79%，有19种类型；在bchY文库中，bchY覆盖率为85%，有12种类型。富集后细菌丰富度高，三个文库主要类群有蛋白菌门(Proteobacteria)(16SrDNA、pufLM和bchY文库中分别占81.4%、69.5%和90%)，蓝藻门(Cyanophyta)(16SrDNA和pufLM文库中分别占1.0%和26.1%)，硬壁菌门(Firmacutes)(16SrDNA和pufLM文库中分别占2%和2.1%)，拟杆菌门(B

4、acteroidetes)(16SrDNA文库中占2%)，酸杆菌门(Acidobacteria)(16SrDNA文库中占2%)，绿菌门(Chlorobium)(bchY文库中占2.5%)，pufLM文库中存在古菌甲烷八叠球菌科(Methanomicrobia)(2.2%)。T从内蒙古浑善达克盐湖分离到一株MIM18，基于16SrDNA鉴定，与Belliella和Cyclobacterium属中的Nitritalea的相似性分别为92.3%和88%，鉴定为新属，新种命名为Mongoliitalealuteagen.nov.,s

5、p.nov.。此菌株为好氧、耐盐、杆状、桔红色、无T运动性、革兰氏阴性菌。MIM18G+C含量为39.8%，最适NaCl浓度为1%，最适生长温度为28-37℃。主要的脂肪酸为iso-C15:0(28.1%)，iso-C17:03-OH(14.6%)，C15:1ω6c(5.3%，C14:02-OH和iso-C15:02-OH(5.4%)，iso-C17:1ω9c或者C16:010-methyl(5%)，呼吸醌主要有MK-7，极性脂主要有PC、PG和PE。本研究为认识内蒙古地区水生生态系统微生物多样性，以及特殊类群微生物生态功能

6、积累了数据，并为相关微生物应用于生态系统的保护奠定了一定的基础。关键词：16SrDNA；pufLM；bchY；盐碱湖；Cyclobacterium属BacterialDiversityofEnrichmentCultureforAnaerobicAnoxygenicPhototrophicBacteriainULansuhaiLakeSluge&IsolationandClassificationofaBacteriumIsolatedfromHaloalkalineLakeAbstractAnaerobicanoxygen

7、icphototrophicbacteria(AnAnPB)playsanimportantroleinnutirentandenergycycleofaquaticecosystems.ThisstudyenrichedtheslugefromLakeUlansuhaiforAnAnPB,andthenconstructedandcharachterizedgenelibrariesbasedon16SrDNA,pufLMandbchYtorevealebacteriaandAnAnPBcommunitystructura

8、l.Theresultsshowedthatinthe16SrDNAgenelibrary,totally97clonesweredigestedwithHaeIIIandweregroupedinto20types,librarycoveragewasof77%;inthepufLMli