大豆活性肽的分离纯化和生理活性-论文.pdf

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1、2013年第04期吉林农业NO．04．2013(总第301期)JILINAGRICULTURE(CumulativetyNO．301)大豆活性肽的分离纯化和生理活性樊永华，许辉(永城职业学院，河南永城476600)摘要：文章对大豆肽的分离纯化方法和生理活性作了简要地总结。大豆蛋白肽的分离纯化方法有反相高效液相色谱(RP—HPLC)、离子交换色谱(IEC)、凝胶过滤色谱(GFC)等。大豆蛋白活性肽具有多种生理功能，如：降血压、降低胆固醇、维持氮平衡、提高消化率、抗癌、抗氧化等。关键词：大豆活性肽；分离纯化；生理活性中图分类号：TS214．2文献标识码：A文章编号：1674—0432(201

2、3)一04—0280—2大豆蛋白肽是利用酶法或微生物发酵法将大豆蛋白降解成多分子大豆肽类物质的分离和纯化尤为重要。肽、短肽和氨基酸的混合物。大豆蛋白肽是一种重要的肽来源。反相高效液相色谱分离和纯化大豆活性肽时多采用增加流动大豆蛋白肽与蛋白质相比较，多肽具有如下特点：在较宽的pH范相疏水性的线性梯度洗脱法和在窄梯度的条件下延长洗脱时间的围内溶解度高，容易在体内消化和吸收；渗透压低，能够避免高方法。在洗脱的初始阶段，洗脱液中有机成分浓度较低，大豆肽渗透压导致的腹泻；不容易导致过敏。Rerat等研究表明，短肽的分子与固定相间的疏水作用较强，几乎完全被固定相吸附。随着特点是吸收速度快、消耗能量低

3、、载体不易饱和，不同肽之间运洗脱的进行，当洗脱液中有机成分浓度增加到能够使得大豆多肽转没有竞争和抑制。与固定相间作用小于流动相与固定相间的作用时，大豆活性肽分随着生物技术与生命科学的不断进步与发展，大豆多肽的功子便可从固定相上洗脱下来。洗脱液成分的极微小改变对大豆肽能越来越多的被人们所发掘，而某些活性肽的结构与生理功能也的保留行为具有较大的影响，因而对于疏水特征相近的小分子大逐渐被人们所认识和了解，这对活性肽的研究起到了推动作用，豆肽也能够完全分离。更有利于人类对大豆活性肽进行研究与开发。1．2离子交换色谱(IEC)法迄今为止，从大豆蛋白中已分离出降血压肽、免疫调节肽、大豆活性肽的分离纯

4、化方法之一就是离子交换色谱法。离子抗氧化肽、降胆固醇肽、抗血栓形成、促进钙磷及微量元素的吸交换色谱法是利用大豆多肽在一定pH值和离子强度条件下带电荷收等多种纯化的大豆蛋白生物活性肽，对这些大豆活性肽的研究的微弱差异，依靠静电力与离子交换剂结合在一起时，进入介质情况进行了综述，以期为大豆活性肽的应用提供参考。表面的可交换离子与带相同电荷的蛋白质分子就会发生交换的差1大豆蛋白活性肽的分离和纯化异而分离。1．3凝胶过滤色谱(GFC)法目前，生产大豆活性肽的方法主要三种有：酶解法、微生物GFC也叫凝胶色谱分子筛法，是利用凝胶网状结构，根据分子发酵法和化学法，最为先进的是微生物发酵法，它不仅能修饰

5、肽大小和形状的不同进行分离的一种方法。当样品进入凝胶柱后，的苦味。还能将原料中的KTI和BBI等影响消化和口味的抗营养因较大分子不能通过凝胶孔道进入柱体内，会先流出层析柱，而小子降解。分子则渗入凝胶柱体内，后流出层析柱。凝胶过滤色谱法具有很大豆蛋白肽的活性易受到外界条件的影响，在过强的酸碱、多优点，如分离条件温和，产品得率高，生物活性好，分离面宽较高的温度与剧烈震荡等条件下都有可能失活。初始的肽液成分等。因此，凝胶过滤色谱被广泛用于大豆多肽物质的分离纯化相对较复杂，目标产物的浓度也比较低，一般低于5％，含有大量中。杂质，某些杂质的理化性质和目标产物有相似之处，这就提高了Ljevakovi

6、c等分离肽聚糖单体衍生物是通过凝胶过滤色谱大豆肽的分离纯化的难度。传统多肽分离工艺，如吸附沉淀、溶SephadexG25~lSP-SepadexC-25离子交换色谱来完成的。媒、萃取和离子交换法等步骤繁多，耗时，原料消耗量大，耗能1．4联用技术高，得到的产品较少。生物技术的发展与人们对大豆肽结构和功在大豆多肽物质分离中，HPLc—cE联用技术具有选择性和灵能研究的不断深入，大豆肽分离检测技术也获得了突飞猛进的发敏度高、时间花费短、操作简单，可用于梯度洗脱等具有独特的展，出现了反相高效液相色谱法、凝胶过滤色谱法、毛细管电泳优点，尤其适合大豆多肽的分离纯化。法、膜分离法、各种技术手段的联用等

7、许多高效的分离纯化技术将高效液相色谱强的分离能力和质谱的选择性高、灵敏度高和手段。和提供相对分子质量与结构信息的优点有机的结合起来的高效液1．1反相高效液相色谱(RP—HPLc)法相色谱一质谱(HPLC-MS)联用技术，为大豆活性肽组分的分离分反相高效液相色谱是一种色谱洗脱法，它以非极性的反相析提供基础。Hoffmann用高效液相色谱一质谱分离技术在3．5min介质为固定相，流动相是水溶液或甲醇、乙腈等极性有机溶剂。内完成了多肽分离