苯代谢物氢醌对人体肝细胞内DNA甲基转移酶基因和蛋白表达的影响.pdf

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1、第38卷第5期昆明理工大学学报(自然科学版)Vo1.38No.52013年l0月JournalofKunmingUniversityofScienceandTechnology(NaturalScienceEdition)Oct.2013doi:10.3969/j.issn.1007—855x.2013.05.016苯代谢物氢醌对人体肝细胞内DNA甲基转移酶基因和蛋白表达的影响王晶晶,马慧敏,李宝才,郑刘进,潘尚霞,黎玉华,盛国英,傅家谟(1.昆明理工大学生命科学与技术学院,云南昆明650500;2.中国科学院广

2、州地球化学研究所有机地球化学国家重点实验室,广东广州510640)摘要:苯是一种具有致癌效应的环境污染物,氢醌(Hydroquinone,HQ)作为重要的苯代谢物,其介导的毒性可能是苯致癌的原因之一.越来越多的证据表明,DNA甲基化异常是致癌物质发挥毒作用的一种主要途径,HQ可以诱导人体肝细胞DNA甲基化水平改变,但其作用机制尚不清楚.为探索HQ诱导DNA甲基化改变的主要因素,本文应用RT—PCR和Westernblotting技术,研究不同浓度HQ(0、5、10、25和50IxM)染毒暴露对L02肝细胞内DNA

3、甲基化转移酶(DNMT1,DNMT3a和DNMT3b)基因和蛋白表达的影响.实验结果表明,HQ可诱导三种酶的基因表达不同程度升高,高剂量组(≥10txM)与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);0~50M范围内HQ可诱导DNMT1和DNMT3b的蛋白表达呈浓度依赖性增高,25和50M实验组与对照组相比差异显著(P<0.05).这些结果表明HQ的暴露可引起L02细胞内DNA甲基化转移酶的基因和蛋白表达升高,这可能导致一些目的基因DNA甲基化发生异常,本实验从表观遗传学角度暗示了HQ影响人体早期健康的机制.关

4、键词:氢醌;DNA甲基化转移酶;RT—PCR;Westernblotting;表观遗传学;1_02细胞中图分类号:X171.5文献标识码:A文章编号:1007—855X(2013)05—0090—06EffectsofHydr0quin0neontheExpressionofDNAMethyltransferasemRNAandProteininL02cellsWANGJing—jing,MAHui—min,LIBao—cai,ZHENGLiu一,PANShang—xia,LIYu—hua,SHENGGuo—yi

5、ng,FUJia—mo(1.FacultyofLifeScienceandTechnology,KunmingUniversityofScienceandTechnology,Kunming650500,China;2.StateKeyLaboratoryofOrganicGeochemistry/GuangzhouInstituteofGeochemistry,ChineseAcademyofSciences,Guangzhou510640,China)Abstract:Asamajormetaboliteof

6、environmentalcarcinogenbenzene,hydroquinone(rtQ)mayplayanimpor—tantroleintoxicityofbenzene,butitsmechanismsarenotfullyunderstood.Moreandmoredataindicatethatabe~antDNAmethylationistheimportantmechanismofcarcinogenesis,andHQhasbeenreposedtoinduceab—normalDNAmet

7、hylationinhumancells.TounderstandthepotentialmechanismofDNAmethylationalteration,theeffectsofHQ(0,5,10,25,and50IxM)onthegenesandproteinexpressionofDNAmethylationenzymes(DNMTs),whichmostlyincludesDNMT1,DNMT3a,andDNMT3b,areinvestigatedinL02cellsbyRT一收稿日期:2013—0

8、5—02.基金项目:国家自然科学基金(NSFC一21007072);中国科学院知识创新工程重要方向项目(KZCX2一YW—GJ02).作者简介:王晶晶(1987一),女,在读硕士.主要研究方向:环境与表观遗传学研究.E—mail:wjjapple@hotmail.con通信作者:李宝才(1957一),男,教授.主要研究方向:天然药物化学和腐植酸.E—mail:baocai

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