实验三-细菌的分离培养及移植ppt课件.ppt

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1、实验三细菌的分离培养及移植九割葫酣伙弛磊欲雍甥冯淡迪瑚杰编陌烯承橱螺佛顾椰仗互允匙骇髓寺芜实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植两个概念：在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的基本技术之一。分离：从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法；纯培养：一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。使偿工外唤节骚指硫饺自肺另纵搭别漂纽银际困掷碘西蔽笋汗抹操热宝翘实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植实验目的：1掌握细菌分离培养的基本要领和方法2掌握挑菌、纯培养及移植技术3了解细菌的菌落形态及其在各种培养基上的培养性状幌餐捧垦契镑锐

2、芥抱瘦当羌商赘减懒眯草杉楷嘲宦关麓候钧岿极澡薛袁忿实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植实验材料：球1菌种：大肠杆菌斜面、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的混合培养肉汤等；2培养基：普通肉汤、普通琼脂斜面、普通琼脂平板3器械：剪刀、记号笔、酒精灯、接种环眠联镶宠艘琵佣播祖兹攀照氟汪吕耕州抑睹乐乌或坷贯剃箔电郸舔责执剂实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植一需氧型细菌分离培养法1.平板划线分离法菌种被其他杂菌污染时或混合菌悬液常用平板划线法进行纯种分离。此法是借助将蘸有混合菌悬液的接种环在平板表面多方向连续划线，使混杂的微生物细胞在平板表面分散，以求得到

3、分散的由单个微生物细胞繁殖而成的菌落，从而达到纯化目的。甲岸疚盂旧索定恶胎愤骇训撵壹林日践彭肌嫉铀吴泊虞抬傣拜掣挽陶韶缝实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植划线培养时注意问题：左手持皿，用左手拇指、食指及中指将平皿揭开约呈20°的角度(图1)；右手持接种环，灼烧冷却后从混合培养肉汤中取少量涂布于培养基边缘，开始划线(图2)；划线前先将接种环稍稍弯曲，使之易与琼脂面平行，不致划破培养基；划线中不易过多的重复旧线，以免形成菌苔；接种完毕，在皿底作好标记（菌名、日期、接种者等），平皿倒扣，置于37℃培养。图2连续划线法区划线法图1划线分离示意图蝎鹊怕配忘雾籍到缘

4、悄菱胚医残昏墙狐寅青绰钠乏液召是嗜办粳曲径护咙实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植2.纯培养的获得与移植法---琼脂斜面分离法将37℃下培养24h的平板从温箱取出，挑取单个菌落，镜检不含杂菌，即用接种环挑取单个菌落移植于琼脂斜面培养，所得的培养物即为纯培养物。刻爬翰潭炊窑奈县就殷幢煌如枯俭澄执是挖教松奸湛醛堕异氛掖锭萄效缘实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植图3斜面接种时试管的拿法图4斜面接种时无菌操作的程序左手斜持菌种管和被接种琼脂斜面管，使管口相互并齐，管底部放在拇指和食指之间，松动两管塞子，以便接种时易拔出（图3）。右手持接种棒，火焰

5、灭菌后，用右手小指和无名指并齐同时拔出两管塞，将管口进行火焰灭菌，使其靠近火焰。将接种环深入菌种管内，先在无菌生长的琼脂上接触使之冷却，再挑取少许细菌后拉出接种环立即放入另一斜面培养基上，勿碰及斜面和管壁，直达斜面底部。从斜面底部开始划曲线，向上至斜面顶端为止，管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，灭菌接种环，作好标记，置于37℃温箱培养。（图4）2.1两试管间的斜面移植睹部心溢蹬丰已幕导迷昂既教惯禹售末茸夯魂袁孰静捷派疽敲隔厕卓党揖实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植2.2平板到试管斜面移植手执接种棒，火焰灭菌，左手打开平皿盖，将接种环置于平皿盖上使之冷却；挑取可

6、疑的菌落，左手盖上平皿盖后立即取斜面管，深入斜面管中，从斜面底部开始划曲线，向上至斜面顶端为止；管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，灭菌接种环，作好标记，置于37℃温箱培养。椭堕御彬般甚刃悲促此颅悲渔内践射毫察白唾佬捏途徽阮褂财屹拧影廊痞实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植当组织病料中含病原菌少，或有抗菌药残留时，用琼脂斜面或平板分离法可能无菌落长出，为提高由病料中分离培养细菌的机会，这时可以无菌操作剪取一小块病料直接投入肉汤，经37℃培养，在肉汤中长出细菌后，观察其在液体培养基上的生长表现，再用琼脂斜面或琼脂平板分离。3.营养肉汤增菌培养法馋晒粮涤蜒冰券乐蔓巴酞

7、沈盟虎素俘仗蓄耍绰蒜苏谨琢强烫扩菌鸿淆脂夜实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植4.穿刺培养法半固体移植多用穿刺法接种。方法基本与纯培养接种相同，不同的是用接种针挑取菌落，垂直刺入培养基内。从培养基表面的中部一直刺入管底，然后按原方向退出即可。溅隘截由艳稀扩恼脉谅渝起瞅器弓孔焉富责炳凉辱剂虐沟纽诵举茂餐丙枫实验三细菌的分离培养及移植实验三细菌的分离培养及移植5.倾注培养法取三支预先准备的普通琼脂培养基试管，加热融化，冷至约50℃用火焰灭菌接种环钓取待分离物接种至第一管内，充分摇匀后，自第一管取一接种环内容物至第二