化学诱导玉米单倍体技术规程.docx

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1、DB23/T××××—××××XXXX-XX-XX实施黑龙江省市场监督管理局　发布XXXX-XX-XX发布化学诱导玉米单倍体技术规程DB23/TXXXX—XXXXDB23黑龙江省地方标准ICS65.020.20B052DB23/TXXXX-XXXX前言本标准依据GB/T1.1-2009编写规则起草。本标准由黑龙江省农业农村厅提出。本标准由黑龙江省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：黑龙江省农业科学院耕作栽培研究所、黑龙江荣玉农业科技有限公司。本标准主要起草人：宫秀杰、来永才、钱春荣、于洋、马宝新、马延华、李梁、郝玉波、李昕、王俊强、王秋菊、姜辉、何长安

2、、姜宇博、吕国依、葛选良、杨忠良、马军韬、赵杨、王阳、童淑媛、杜振宇、孙丹、侯国强、孟凡迪。4DB23/TXXXX-XXXX化学诱导玉米单倍体技术规程1　范围本标准规定了化学诱导玉米单倍体技术的术语和定义、材料和备品、诱导处理、诱导后代种植和田间调查、诱导率统计及注意事项。本标准适用于化学诱导玉米单倍体技术。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。DB23/T017玉米生产技术规程DB62/T1060农作物种子生产技术规程玉米

3、自交系3　术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1Pa1代化学诱导孤雌生殖获得的籽粒及其生长植株（不包括后代籽粒）。3.2Pa2代Pa1经自交结实后的籽粒及生长植株（不包含后代籽粒）。4　材料和备品4.1　实验材料和备品准备500ml烧杯、玻璃棒、100ml容量瓶、25ml量筒、封口瓶、废液缸、试剂匙、移液管、0.001g天平、猴头喷雾器、蒸馏水、无水乙醇（EA）。剪刀、胶皮手套、一次性口罩、眼罩、白大褂、硫酸纸、小硫酸纸袋、大硫酸纸袋大头针、标签、记号笔、棉花、镊子、网袋。4.2　诱导材料准备4.2.1　诱导材料选择符合育种目标的玉米优良杂合种质或遗传

4、背景广泛的群体材料。4.2.2　化学试剂诱导试剂包括：二甲基亚砜(DMSO)、马来酰肼(MH)、秋水仙碱(Col)、甲醇（MT）。4DB23/TXXXX-XXXX配制方法：取70mgMH加入烧杯，再加入70mlMT，充分搅拌。待MH完全溶解后，加入0.1mlDMSO、1.0gCol和500ml蒸馏水，搅拌，转移入1000ml容量瓶中，定容至1000ml。放置安全处待用。4.2.3　诱导材料种植及田间管理选择地势平坦、肥水一致、排灌方便地块，每份被诱导材料种植不少于100株。田间管理参照DB23/T017执行。5　诱导处理5.1　诱导时期和诱导方法5.1.1　

5、诱导时期诱导材料雌穗吐丝3cm～5cm时。5.1.2　诱导方法诱导材料雌穗吐丝前，用硫酸纸袋将雌穗罩上，去除雌穗。诱导处理时间选择在清晨4:00-7:30，操作人员须用75%乙醇将手和剪刀消毒，用剪刀将被诱导材料雌穗顶端剪平，然后用手再修出一个凹槽，用猴头喷雾器喷施化学药剂，每穗喷施化学药剂2ml，喷施后迅速罩上硫酸纸袋，然后再罩上一个大硫酸纸袋，用大头针固定，挂标签，标记喷施药剂日期。间隔3天后再喷施一次，喷施方法同上。记录化学药剂处理的果穗数量。5.2　诱导材料的收获籽粒成熟及时收获，单穗分装编号，待干燥后，脱粒。记录每个果穗雌穗小花数和结实数。6　诱导

6、后代种植和田间调查6.1　Pa1种植和田间调查6.1.1　Pa1种植选择地势平坦、肥水均一、病虫害发生低、排灌方便地块种植。收获的Pa1种子全部播种，人工单粒播种，播深3cm～5cm，播后镇压，单株插牌标记。6.1.2　Pa1田间管理采用人工除草，禁止使用化学药剂除草。其它田间管理方法参照DB23/T017执行。6.1.3　Pa1田间调查6.1.3.1　Pa1苗期调查调查未出苗、白化苗和早夭幼苗数量。6.1.3.2　Pa1花期调查调查雄穗育性、雌穗育性和雌雄开花间隔时间。6.1.4　Pa1自交授粉4DB23/TXXXX-XXXX雌穗吐丝前用硫酸纸袋将雌穗罩上

7、，对雌雄穗外观正常、花期相遇的植株进行自交授粉。授粉方法参照DB62/T1060执行。6.1.5　Pa1收获单穗收获并编号。6.2　Pa2种植及田间调查6.2.1　Pa2种植按穗行种植。穗行插牌标记，种植方式同6.1.1。6.2.2　Pa2田间管理田间管理方法参照DB23/T017执行。6.2.3　Pa2田间调查6.2.3.1　Pa2苗期调查调查幼苗色、茎色泽及叶色，进行一致性调查。6.2.3.2　Pa2花期调查调查株型、雄穗分枝、雌穗花丝颜色、株高、穗位、抽穗期、吐丝期。6.2.4　Pa2自交授粉田间所有植株均进行自交授粉，授粉方法参照DB62/T1060

8、执行。6.2.5　Pa2收获记录成熟期，同一穗行植株