分离以尿素为氮源的微生物ppt课件.ppt

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1、1．B2．B3．C4．C５．D6．B7．B10.D11.B12.C13.C13.“培养基的稀释率（培养基的更新速率）”的含义就是“添加新的培养基以及放出老的培养基的速度”。横坐标为“培养基的稀释率（培养基的更新速率）”，也就是“添加新的培养基以及放出老的培养基的速度”。14．（1）目的菌选择（2）化合物A异养需氧型（3）减少增加（4）划线（5）定期取样细菌数目的对数（6）灭菌实验2分离以尿素为氮源的微生物细菌尿素NH3中性碱性酚红颜色：黄色红色(变色范围pH6.4-8.2)任务1：怎么从土壤中分离出它们呢？利用以尿素为唯一氮源的培养基

2、进行筛选。配制培养基尿素培养基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g琼脂糖0.5g酚红0.25g尿素10ml选择培养基琼脂是未被纯化的混合物,内含一定量的含氮化合物（1）将土壤中的固氮菌分离出来（2）将土壤中自养微生物分离出来举一反三（3）筛选出抗青霉素的微生物（4）筛选出耐高浓度食盐的微生物……2、要验证以尿素为唯一氮源的培养基对土壤中的细菌确实具有选择作用，你该如何设计实验。思考：配制培养基尿素培养基葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g琼脂糖0.5g酚红0.25g尿素10mlLB培养基蛋白

3、胨：0.25g酵母粉：0.12gNaCl：0.25g琼脂糖：0.5g对照组选择培养基实验组3、请你提供一种方法，判断分解尿素的细菌确实能将尿素分解成氨。思考：方法：在以尿素作为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂,接种培养该细菌，若指示剂变红，说明该种菌分解了尿素。二、实验目的:使用专一培养基(含有尿素)分离专一的细菌通过指示剂（酚红）颜色的变化检知脲酶催化的化学反应三、实验中涉及到的一些问题：（一）哪些土壤中含有这种以尿素为氮源的微生物多？（选材的问题）（二）此实验用到的选择培养基必需含有哪些物质？（三）可用什么指标认定不同土壤中选择出

4、的微生物对尿素分解能力的高低？没硬化，腐殖质丰富的土壤碳源、尿素、无机盐、水、酚红培养基红色的深浅三、实验中涉及到的一些问题：重复性原则对照原则（排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验的可信度）（四）实验设计要遵循的原则：过滤灭菌后的尿素（二）制备细菌悬液制备成10-2、10-3、10-4、10-5土壤稀释液配制菌悬液1个99ml无菌水2个4.5ml无菌水得10-2,10-3,10-4的菌悬液1g土壤倒平板需要倒3个LB平板，9个尿素平板每个稀释度1个LB对照平板3个尿素平板(平行重复组)接种取0.1ml菌悬液涂布分离高浓度

5、→低浓度，换枪头低浓度→高浓度，可不用换枪头涂布分离37℃倒置培养按浓度捆成一摞恒温37℃培养10-4、10-3,、10-2本实验尿素固体培养基上生长的菌落都是以尿素为氮源的微生物吗？思考与练习2、有脲酶的细菌在生态稳态上起什么作用？如果土壤中有许多尿素，在自然界较高温度下就会被水解，水解后的NH3会使土壤变成碱性，NH3与其他阴离子物质如SO42－、CO32－、NO3－等形成化合物，则会使土壤板结。有脲酶的细菌使植物废弃物和动物尸体降解，并利用了所形成的氨，有利于自然界中氮的循环。4．与全营养培养基早的菌落比较，为什么尿素培养基上只

6、有少数菌落？因为全营养培养基中的氮源是蛋白胨，很多细菌都能利用它，而尿素培养基中的氮源只有尿素，只有含脲酶的细菌才能利用尿素，能存活。这一现象表明能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占有极少数量。1土壤中有些微生物能利用尿素是因为(　　)A．其体内含有脲酶B．其体内含有氨(NH3)酶C．它能将CO2合成为有机物D．它们不需要氮源A【例题2】分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分(　　)A．前者含琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖B．两者都含有琼脂C．前者含有琼脂糖，后者含琼脂D．两者都不含琼脂和琼脂糖C3用10－4稀释度的细

7、菌悬液分别涂布于LB、尿素培养基上，培养后的结果，以下叙述正确的是(　　)A．LB培养基上未出现任何菌落B．尿素培养基上出现的菌落数量和种类都多于LB培养基上的C．尿素培养基上出现的菌落数量和种类都少于LB培养基上的D．尿素培养基上是不可能出现菌落的C5.在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应10-6培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的结果产生原因可能有()①由于土样不同②由于培养基污染③由于操作失误④没有设置对照A．①②③B．②③④C．①③④D．①②④A2．为什么本实验中要用琼脂糖来代替琼脂

8、配制固体培养基呢？琼脂糖与琼脂有何区别？琼脂在制作固体培养基时起凝固剂的作用。但它却是一种未被纯化的混合物，里面有一定量的含氮化合物。在本实验中所使用的尿素培养基却要求提供氮元素的物质只有尿素，用这种培养基才能分离得到含