dna分子标记技术在农作物品种鉴定上应用

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1、·种子科技··2010（10）··专题综述·文章编号：1005-2690（2010）10-0019-03中图分类号：Q789文献标志码：ADNA分子标记技术在农作物品种鉴定上的应用李志勇，谢华峰，张力，赵磊（河北省种子管理总站，河北石家庄050031）摘要：文章概述了利用DNA分子标记技术（RFLP、RAPD、SSR、AFLP、ISSR和STS等）进行品种鉴定的原理、特点和研究概况，从DNA分子水平上进行品种鉴定具有准确可靠、成本低、自动化、不受环境影响等优点，DNA分子标记技术在品种鉴定方面具有广阔的应用前景。关键词：DNA；分子；标记；品种；纯度；真实性；鉴定优良品种在作物各种增产

2、因素中占30%~40%。小。不同来源的DNA有不同的限制性酶切位点，经酶种子质量直接影响优良品种的增产效果，品种混杂和切后形成的DNA片段大小的差异就是限制性片段长[1][8]纯度降低会明显降低产量。快速准确地鉴定品种和度多态性（RFLP）。Smith利用RFLP技术，用38个探进行纯度分析对于种子质量标准化、品种审定、假种鉴针成功地将78个玉米杂交种区分开，共得到288个[2][9]别、产权纠纷均有重要作用。目前，我国种子生产和RFLP标记。Vacino等利用RFLP技术，用2个特异经营管理还不太规范，不合格种子屡屡混入市场，造成性的麦谷蛋白和麦醇溶蛋白探针，将54个意大利普通[10

3、]减产和经济损失。因此，快速准确进行品种鉴定就显小麦品种区分开。此外，RFLP标记技术先后在水稻、大[11~13]得尤为重要。多年来，品种纯度和真伪是以形态学标麦、谷子、黄瓜、辣椒等园艺作物上得到广泛应用。[3]记为依据的。这种方法虽简单经济，但周期长，花费RFLP标记技术的优点是标记量大，等位基因间大，不仅受季节限制，而且很多性状的表现受栽培措施共显性可区分纯合子和杂合子；缺点是工作量大，成本及环境因子的影响，鉴定者的观察经验也制约着鉴定高，要求的DNA量大且纯度要高。[4]的准确性。蛋白质电泳和同工酶电泳等生化标记鉴2基于PCR的分子标记[5，6]定法也曾被用来进行品种鉴定。同工酶

4、和种子贮藏PCR技术由美国K.Mullis于1983年发明，基于蛋白均是基因的直接表达产物，它们的多样性能在一PCR技术的分子标记相继产生。定程度上反映不同品种DNA组成上的差异。从遗传2.1RAPD学角度上来看，品种纯度和真伪鉴定实质上是对品种由Willims、Welsh、McClelland等分别独立建立。基因型的鉴定。形态标记和生化标记均是基因表达产用一种由10个核苷酸组成的随机引物，采用PCR技物的反映，鉴定品种真实性和纯度时是不够完美的。术对基因组的几个区域进行扩增，产生大小不同的[14]因此，只有通过直接鉴定品种的DNA分子本身才准确DNA，即为随机扩增多态性。[7]可靠。

5、DNA分子标记是DNA水平上遗传多态性的直余四斌等利用RAPD技术，对珍汕97B和明恢接反映，可准确可靠地用来进行品种纯度和真实性鉴63及其组合汕优63进行了分析，结果表明，有一个引定。但是，利用DNA分子标记进行品种纯度和真实性物AD04可将珍汕97B、明恢63及其组合汕优63区的鉴定，首先要构建品种的标准DNA指纹图谱。目前，分开来，并能进行纯度鉴定，且比较了田间试验与[15]已构建的DNA指纹图谱主要有限制性片断长度多态RAPD结果，二者一致。杨剑波等、邵启明等、陈洪等性(Restrictionfragmentpolymorphism，简称RFLP)、随用RAPD标记技术在汕优6

6、3品种的纯度鉴定上也进[16~18]机扩增多态性DNA(Randomamplifiedpolymorphic行了研究。陈一华等对12个优良玉米自交系的DNA,简称RAPD)、简单序列重复(Simplesequencere-DNA进行了RAPD分析，建立了12个自交系的[19]peat，简称SSR)、扩增片断长度多态性(Amplifiedfrag-RAPD图谱，可用做品种纯度和真实性鉴定。邱丽娟mentlengthpolymorphism，简称AFLP)、内部简单序列等利用RAPD标记技术分析了中国大豆和美国大豆[20]重复(Inter-Simplesequencerepeat，简称IS

7、SR)和序列种质，认为RAPD标记技术可有效区分大豆种质。郭标志位点(Sequencetaggedsite，简称STS)等。旺珍等在棉花上、许明辉等在烟草上用RAPD标记技1RFLP术进行了分析，认为RAPD技术进行品种纯度鉴定是[21，22]RFLP技术最早是由Grodzicker建立的。其原理是可行的。检测DNA由限制性内切酶切后形成的DNA片段的大RAPD标记技术的优点是仅需少量DNA，简单快作者简介：李志勇（1972-），男，河北省石家