鸡骨草总皂苷抗人肝癌HepG2细胞活性.docx

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1、鸡骨草总皂苷抗人肝癌HepG2细胞活性背景肝癌是临床常见的消化道肿瘤。鸡骨草是药食两用的中药,具有清热解毒、护肝利尿、益胃健脾等功效,其在肝胆疾病的治疗上效果良好。研究发现鸡骨草具有保护肝脏、抗菌和抗病毒、抗炎、免疫调节、降脂以及清除羟自由基等作用。但目前对于鸡骨草总皂苷的抗癌研究报道仍少见,虽然有报道称鸡骨草中的多种成分对肝癌的生长均有一定程度的抑制作用,但其作用机制尚未明确,因此,鸡骨草抗肝癌作用的机制值得深入研究。目的本研究以人肝癌HepG2细胞为研究对象,运用CCK-8法、流式细胞术等技术探索鸡骨草总皂苷对人肝癌细胞HepG2细胞周期和凋亡的影响,从

2、而明确该药在体外抗肿瘤的作用机制,以期为进一步临床实验和治疗以及鸡骨草资源利用新途径提供一定的理论依据。方法(1)8个浓度的鸡骨草总皂苷作用于人肝癌HepG2细胞24小时和48小时后,用CCK-8法检测细胞抑制率,并计算鸡骨草总皂苷的IC50。(2)流式细胞仪检测鸡骨草总皂苷对人肝癌HepG2细胞周期的影响。(3)流式细胞仪检测鸡骨草总皂苷对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响。结果(1)随鸡骨草总皂苷浓度的增加和作用时间的延长,细胞活力明显下降,表明其对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用具有时间和浓度依赖效应。当作用时间为48小时,仅0.5mg/mL就能使细胞抑

3、制率在51.25%,抑制率高于50%;当浓度上升到2mg/mL时,抑制率高达86.99%。经回归分析,24小时和48小时的半数抑制率(IC50)分别为1.1427mg/mL和0.504mg/mL。(2)随药物浓度的升高,可见剂量组与对照组相比,剂量组S期比例逐渐升高,G2期比例逐渐下降,而G1期细胞比例变化不明显,表明鸡骨草总皂苷具有将人肝癌HepG2细胞周期阻滞在S期的作用。(3)当药物浓度<0.5mgg/rmL时.药物诱导细胞凋亡作用不明显;当药物浓度≥0.5mg/mL时,其诱导细胞凋亡的作用显著增强,并且随浓度的增大而升高;d当药物浓度达到2mg

4、/mL时,凋亡率可达25%。因此,鸡骨草总皂苷作用于人肝癌HepG2细胞24小时后的细胞凋亡率,在低剂量组没有明显的差异,而在高剂量组显著增大。结论(1)鸡骨草总皂苷能显著抑制人肝癌HepG2细胞增殖,并具有时间和浓度依赖效应。(2)鸡骨草总皂苷能将人肝癌HepG2细胞的周期阻滞在S期。(3)鸡骨草总皂苷诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡,但其诱导凋亡作用仅在其浓度高于0.5mg/mL时效果显著,且具有浓度依赖性。(4)高(3)