胃癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义的研究.doc

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1、胃癌鸟氨酸脱羧酶基因表达及临床意义的研究阎云飞，刘斌，徐春晓，辛佳璇，王伟，刘贤锡(山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,济南250012)[摘要]目的：从mRNA和蛋白质水平研究鸟氨酸脱羧酶在胃癌中的表达，探讨其在胃癌形成中的作用。方法：采用半定量RT-PCR技术检测胃癌及相应癌旁组织中ODCmRNA的表达量，采用wetern-blot在蛋白质水平检测胃癌及相应癌旁组织中ODC的表达量，并做统计学分析。结果：21例胃癌组织中ODC在mRNA和蛋白质水平的表达量均高于癌旁组织，差异显著（P<0.01）。低分化胃癌组织中ODC基因表达量显著高

2、于高中分化组（P<0.01）。结论：ODC表达增强在胃癌发生发展中起重要作用，提示ODC可作为胃癌的基因诊断与治疗的靶点。[关键词]胃癌；鸟氨酸脱羧酶；基因表达[中图分类号]:Q784[文献标识码]:AExpressionandclinicalimplicationofODCingastriccarcinomaYunfeiYan,，BinLiu，ChunxiaoXu，JiaxuanXin，WeiWang，XianxiLiu(InstituteofBiochemistryandMolecularBiology,SchoolofMedicine,S

3、handongUniversity,Jinan250012,China)【ABSTRACT】Objective:ToinvestigatetheexpressionofODCinbothmRNAandprotein.Methods:WeextractedtotalRNAfrom21surgicallyresectedspecimensofgastriccancerandnormalmucosaclosedtolesionandconductedthereversetranscriptionpolymerasechainreactionwitho

4、ptimalcondition.Semi-quantitativelywecomparedthemRNAexpressionlevelofODCbetweenmalignantandnormalmucosa.Totalproteinwasextractedfromthesame21surgicallyresectedspecimens.Weadoptwestern-blotanalysistocomparetheproteinexpressionlevelofODCbetweencancerlesionandnormalmucosa.R:The

5、mRNAandproteinexpressionofODCinlesionofgastriccarcinomawassignificantlyhigherthanthatincontiguousnormalmucosa.(P<0.01)CONCLUDE:ODCexertgreatinfluenceonoccurrenceanddevelopmentofgastriccancer,andmayplayapivotalroleinthemetastasisandinfiltrationofcancer.【KEYWORD】Gastriccancer;

6、Ornithinedecarboxylase;Geneexpression胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤之一，其发病是一个多层次、渐进的过程，但具体病因尚不十分清楚。鸟氨酸脱羧酶（ODC）是细胞内多胺代谢的关键酶，多胺是细胞增殖的重要调控因素。研究证实ODC与多种肿瘤的发生与发展有关[1,2,3,4,5]，为了进一步探讨ODC基因表达与胃癌的关系，我们采用了半定量RT-PCR和Western-blot方法对21例胃癌标本中ODC的mRNA和蛋白质水平进行了检测，以为胃癌的基因诊断和治疗提供理论依据。1材料与方法1.1材料1.1.1标本的收集200

7、7年7月至2008年6月山东大学齐鲁医院普外科手术切除且经病理证实胃癌标本21例，其中高中分化10例，低分化11例。留取胃癌组织及距癌组织边缘5～8cm的胃正常粘膜组织，常规处理后液氮速冻，置于-80低温冰箱保存。1.1.2试剂Trizol试剂盒为日本Takara产品，反转录试剂盒为MBIFERMENTAS产品，ODC及β-actin引物均为自行设计，由上海博亚公司设计合成，ODC引物：上游引物5’-CCGTCTAGAATGAACAACTTTGGTAATGA-3’,下游引物基金项目]山东省自然科学重大项目(z2004c01);教育部博士点自助课

8、题基金资助课题(20040422029)[作者简介]阎云飞（1982-），男，在读硕士，主要从事肿瘤分子生物学的研究。[通讯作者]刘贤锡(1945-)