最新实验七植物染色体标本制作和组型分析课件PPT.ppt

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1、实验七植物染色体标本制作和组型分析二、实验原理常规压片染色体常不能完全散开,容易重叠、变形、断裂，影响显带结果，核型分析较困难。20世纪70年代以来，参照动物染色体标本制备技术，对植物细胞去壁、低渗、火焰干燥方法，取得了很好的结果。但操作繁琐，费用较贵。分散良好的标本片用于染色体计数、组型分析、显带、显微操作、原位杂交等分子细胞遗传学研究领域。染色体组在细胞分裂中期的表型称为染色体组型或称核型，包括染色体数目、形态、大小、着丝点位置及副缢痕及随体的有无等特征。染色体组型分析就是通过对染色体标本或其照片进行测量、对比分析、配对、分组、排列，对组内各染色体的形态进行测量、描述，

2、从而阐明生物染色体组成的过程。三）去壁低渗火焰干燥法制片酶解：倒去固定液，用蒸馏水充分洗干净，切取分生区放到青霉素小瓶中，加入混合酶液（2.5%纤维素酶+2.5%果胶酶），25℃酶解1-2h（28℃，20min）。低渗：倒去酶液，用蒸馏水慢慢冲洗2次，然后在蒸馏水中浸泡30min。制备细胞悬液：倒去蒸馏水，用镊子将材料夹碎。向细胞液中加入2～3ml新鲜固定液，吹打制成细胞悬液。去组织块：静置片刻，使大块组织沉淀，吸取上层细胞悬液静置30min左右，使细胞沉淀，轻轻吸去上清液，留约1ml左右细胞悬液制备标本。冷冻滴片—染色—镜检。四）染色体组型分析1、在显微镜下找出染色体分散

3、良好、姐妹染色单体清楚的中期分裂相进行显微拍摄。2、选取显微照片上的一个细胞的全部染色体，目测配对—测量—计算—分析—校验配对—剪贴。3、根据染色体的长短和形态特征进行同源染色体的目测配对。4、测量出每条染色体短臂和长臂长度，计算出各条染色体的相对长度、着丝粒指数、臂指数，并记录原始数据。5、根据测量数据校正目测配对排列的结果，进行调整排列。6、把染色体按总长度由大到小，臂比由小到大成对地排列，排列时注意短臂向上，长臂向下，最后把染色体贴成一完整的染色体组型图。染色体形态参数绝对长度：真实长度相对长度=(某染色体的长度/染色体组内全部染色体总长度)×100臂比=长臂长度(q

4、)/短臂长度(p)着丝粒指数=(短臂长度/该染色体的长度)×100五、结果与讨论结果提交染色体标本片/图片一份组型分析图、表。讨论前处理的秋水仙素的浓度和时间以及酸解的时间和温度对染色体标本制片质量的影响。比较动植物染色体标本制片的异同。染色体组型分析表玉米根尖2n=2x=20蚕豆根尖2n=2x=12第四节　消渴10/5/202115中医内科学【概说】一、概念消渴是以多尿、多饮、多食、乏力、消瘦，或尿有甜味为主要临床表现的一种疾病。古代亦称“消瘅”、“肺消”、“膈消”、“消中”等10/5/202116中医内科学二、古代文献《灵枢·五变》：“五脏皆柔弱者，善病消瘅”。《外台秘

5、要·消中消渴肾消》：“渴而饮水多，小便数，有脂，似麸片甜者，皆是消渴病也。”，“每发即小便至甜”；“焦枯消瘦”。《诸病源候论·消渴候》：“其病变多发痈疽”。【概说】10/5/202117中医内科学【概说】二、古代文献《宣明论方·消渴总论》：“故可变为雀目或内障”。《儒门事亲·三消论》：“夫消渴者，多变聋盲，疮癣，痤疿之类”；“或蒸热虚汗，肺痿劳嗽”。《证治准绳·消瘅》：“渴而多饮为上消；消谷善饥为中消；渴而便数有膏为下消”。10/5/202118中医内科学【概说】三、证候特征1.“三多一少”2.年龄体质10/5/202119中医内科学【概说】四、与西医学的联系消渴病与西医学

6、的糖尿病基本一致。西医学的尿崩症，因具有多尿、烦渴的临床特点，与消渴病有某些相似之处。10/5/202120中医内科学【概说】糖尿病诊断有关知识尿崩症诊断10/5/202121中医内科学【病因病机】一、病因1．禀赋不足2．饮食失节3．情志失调4．劳欲过度10/5/202122中医内科学【病因病机】禀赋不足（阴虚体质）—内因过食肥甘醇酒厚味辛辣香燥脾失健运积热内蕴化燥伤津消谷耗液忧郁恼怒思虑过度肝气郁结郁久化火消灼肺胃阴津房室不节劳欲过度肾精亏损虚火内生→上燔肺胃固摄无权消渴10/5/202123中医内科学【病因病机】二、病机1．病变机理为阴津亏损，燥热偏胜。2．以阴虚为本

7、，燥热为标，两者互为因果。阴虚燥热3．病变关系到肺、胃、肾，尤以肾为关键。4．消渴病日久，百证变出。10/5/202124中医内科学【病因病机】二、病机燥热在肺----肺燥津伤----多饮热壅于胃----消灼胃液----多食肾为关键虚火在肾----封藏失职----多尿10/5/202125中医内科学【病因病机】消渴病日久病机转化：阴损及阳，阴阳俱虚病久入络，血脉瘀滞消渴病日久常见变证：痈疽---燥热内结，血络不畅，蕴毒成痈雀盲---精血不能上承肺痨---肺燥阴伤，痨虫侵入中风---阴虚阳亢，痰瘀阻络水肿---脾肾阳