最新小鼠的采血课件PPT.ppt

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1、小鼠的采血小鼠最大安全采血量(0.2mL)最小致死采血量(0.3mL)取少量血:尾静脉采血,断尾采血,眼底静脉丛采血(做血样的检测)取中量血:心脏取血,断头取血取大量血:摘眼球取血1.剪尾采血当所需血量很少时采用本法。温水浸泡,消毒,用锐器(刀或剪刀)割去尾尖0.3-0.5cm,也可在尾部作一横切口,割破尾动脉或静脉,收集血液。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1mL。一、常用的小鼠采血方法6.颈动(静)脉采血先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴露,可用注射器吸出血液。在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将

2、血滴入试管内。7.腹主动脉采血最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。用注射器吸出血液,防止溶血。或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。8.股动(静)脉采血先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。体重15-20g小鼠采血约0.2-0.8mL。血液包含有四种成分:血浆,红细胞,白细胞,血小板。血浆约占血液的55%,是水,糖,脂肪,蛋白质,钾盐和钙盐的混合物。血细胞和血小板组成血液的另外45%。血浆的主要作用是运载血细胞

3、,运输维持人体生命活动所需的物质和体内产生的废物等。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成分,呈淡黄色液体(因含有胆红素)。离开血管的全血经抗凝处理后,通过离心沉淀,所获得的不含细胞成分的液体,即血浆。血浆的化学成分中,水分占90~92%,溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的总称,用盐析法可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原三类。血清是指不加抗凝剂的全血经过静置一段时间,血细胞沉降后的上层液体,不含凝血酶原和纤维蛋白原,但含有少量血液凝固时由血管内皮细胞和血小板释放出来的化学物质,血清不可以再凝。血清含有糖类,无机盐及抗体等.二、尸体、废弃物

4、的处理1、受试动物尚未死亡,应采用安乐死处理。2、动物尸体与废弃物处理:实验废弃物:分类收集,无害处理。无毒性受试验物或无重大疫病的动物尸体,集中收集放入尸体袋冷冻,待焚烧处理。有毒性受试验物的动物尸体,应做毒性消除或中和处理。重大疫病的动物尸体,应该在达到相应生物安全的灭菌消毒器中进行消毒处理后,再冷冻保存焚烧处理。三、实验内容取免疫后的小鼠,用酒精棉球擦拭小鼠面部(确保小鼠的毛是湿的,以避免其掉入容器引起溶血);乙醚麻醉(注意:不要过度麻醉致小鼠死亡)用手术剪刀或者镊子迅速摘下小鼠的眼睛,同时用离心管接取血液,约1mL左右;将血室温放置30min,凝固

5、;2,000rpm离心10min;吸取血清,置1.5mL离心管,做好标记,-5℃冰箱保存。解读 《中国甲状腺疾病诊治指南》前言甲状腺疾病是内分泌系统的常见疾病甲状腺疾病的规范化诊治是国际国内趋势制定《指南》有利于规范和提高我国甲状腺疾病的临床诊治水平,促进国人健康2005年10月开始编撰《指南》17位内分泌专家、2位核医学专家前言《指南》分六部分:甲状腺疾病实验室及辅助检查甲状腺功能亢进症甲状腺功能减退症碘缺乏病甲状腺炎甲状腺结节和甲状腺良恶性肿瘤第1部分前言原则:实用性公认性先进性时效性甲状腺疾病实验室及辅助检查甲状腺功能亢进症甲状腺功能减退症甲状腺疾病

6、实验室及辅助检查共11项内容一、血清甲状腺激素测定(TT4TT3FT3FT4)二、血清促甲状腺激素(TSH)测定三、甲状腺自身抗体测定(TPOAbTgAbTRAb)四、甲状腺球蛋白测定五、降钙素(calcitonin,CT)测定甲状腺疾病实验室及辅助检查六、尿碘测定七、TRH刺激试验八、甲状腺细针穿刺和细胞学检查(FNAC)九、甲状腺超声十、甲状腺核素检查甲状腺摄131I功能检查甲状腺核素静态显像甲状腺肿瘤核素显像甲状腺正电子发射断层显像(PET)十一、CT和MRI血清甲状腺激素测定(TT4TT3FT3FT4)甲状腺素(T4)全部由甲状腺合成三碘甲状腺原氨

7、酸(T3)20%直接来自甲状腺,80%在外周组织中由T4而来。T3是甲状腺激素在组织实现生物作用的活性形式。循环中的T4仅有0.02%为游离状态(FT4)循环中的T3约0.3%为游离状态(FT3)结合型甲状腺激素是激素的储存和运输形式,游离型甲状腺激素是甲状腺激素的活性部分,直接反应甲状腺的功能状态。血清甲状腺激素测定(TT4TT3FT3FT4)正常成人血清TT464-154nmol/L正常成人血清TT31.2-2.9nmol/L正常成人血清FT49-25pmol/L正常成人血清FT32.1-5.4pmol/L不同方法及实验室测定结果差异较大,各地、各实验

8、室应建立自己的参考值范围。目前大多数临床实验室测定的FT4和FT3

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