羟基磷灰石涂层材料制备论文

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1、羟基磷灰石涂层材料制备论文〔摘要〕目的:观察含镧羟基磷灰石作为涂层材料的细胞相容性。方法:将原代培养的成骨细胞接种到涂层表面,采用细胞计数观察第1、7、14、21天细胞在材料表面的附着、增殖情况,采用SEM观察细胞在材料表面的形态变化,并且对21d内细胞的碱性磷酸酶活性进行检测。结果:成骨细胞在材料表面的细胞增殖数与对照组间无显著性差异,细胞在材料表面伸展良好,粘附牢固,并具有良好的细胞形态及增殖率,碱性磷酸酶活性逐渐增加。结论:含镧羟基磷灰石涂层材料具有良好的细胞相容性。关键词镧;羟基磷灰石类;涂层;

2、成骨细胞;碱性磷酸酶钛合金表面的生物陶瓷涂层以其优良的生物学性能已作为种植体材料广泛应用于临床,目前常用的涂层材料为羟基磷灰石(HA),但已有文献报道由于涂层工艺及HA稳定性的问题,使HA涂层在体内迅速溶解而导致种植体的失败〔1,2〕。本研究在HA中添加了稀土元素镧,使其晶体更加稳定〔3〕,同时采用新的涂层工艺,使其在钛合金表面形成稳定和牢固的涂层。在对该涂层材料的细胞毒性进行研究的基础上〔4〕,为进一步观察用含镧羟基磷灰石涂层后材料的细胞相容性,本实验在体外研究了该涂层材料与成骨细胞间的相互作用,为进

3、一步的体内研究提供了理论和实验依据。1材料与方法第6页共6页1.1含镧羟基磷灰石涂层材料的制备在直径为10mm,厚1.5mm的钛表面制备含镧羟基磷灰石涂层材料La-HA(西安交通大学金属材料强度实验室提供),将涂层圆片用体积分数(φ)为75%乙醇超声振荡清洗后,再用三蒸水超声振荡清洗3遍,烘干,60Co辐射灭菌后备用。1.2成骨细胞的培养本实验应用的成骨细胞来自大鼠颅盖骨,其培养方法见文献〔4〕。1.3细胞在材料表面附着、增殖将La-HA涂层圆片放入24孔板内,加入1ml的DMEM培养液浸泡24h后,将

4、细胞接种于材料表面,浓度为5×107/L。无涂层圆片的培养板作为对照组(Con);37℃,φ(CO2)=5%的条件下用矿化液(含10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50mg/L维生素C的DMEM培养液)培养21d,细胞分别在接种后第1、7、14和21天用0.25g/L胰酶0.3ml消化15min,再加0.7ml的DMEM终止消化,充分吹打后,收集消化液。定量后在倒置显微镜下进行细胞计数,每组重复3次,取平均值。1.4细胞在材料表面的碱性磷酸酶活性将上述实验中各时间段的细胞悬液离心、弃上清,加入体积分数为0.

5、3%Triton-X100100μl,4℃过夜,将其移入96孔板内,再加入100μl碱性磷酸酶底物液,37℃孵育40min,加入50μl的1mol/LNaOH终止反应,在酶联免疫仪上用410nm波长测吸光度(A),统计分析。1.5细胞在材料表面的形态学观察第6页共6页将培养至第1、7、14、21天的涂层

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