产气荚膜梭菌肠毒素分离和鉴定方法

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1、本文格式为Word版，下载可任意编辑产气荚膜梭菌肠毒素分离和鉴定方法产气荚膜梭菌肠毒素的分别和鉴定方法1毒素检查羊只死亡后，尽快取小肠内容物（最好是回肠内容物），加1%的氯仿防腐，在冷藏条件下送检。试验室在收到送检材料后，用生理盐水稀释2~4倍（若内容物淡薄，不必稀释），充分混合后经离心沉淀（3000r/min）15min，取上清液，用赛氏滤器过滤后，1份直接注射动物（两只），另1份加1%的胰蛋白酶粉，在室温处理1h以致活和1毒素，破坏毒素，然后注射另一组动物（两只）。若无离心机和赛氏滤器，可用滤纸反复过滤，直到滤

2、液清朗即可。动物可用小鼠（静脉注射0.2mL~0.4mL）或家兔（静脉注射2mL~4mL）。注射后至少观看24h，依据两组动物的反应状况作出推断。如肠毒素含量低，动物也可能于注射后肯定时间内呈现轻度昏迷，呼吸加快，经1h左右可能恢复。.正常绵羊肠内容物注射后不引起反应。也可用豚鼠进行毒素检查。方法为皮内注射上述检滤液0.2mL~0.4mL，观看48h，假如有毒素存在，注射部可见坏死变化。2中和试验2.1取灭菌试管5支，编为1、2、3、4、5号，然后按表1所列，分别加入含毒素滤液、抗毒素和生理盐水，每管总量为1.2m

3、L。混合后将5个管同时放置37C温箱中，中和40min。表1中和试验方法加样表管号肠内容物滤液（mL）抗毒素（mL）生理盐水（mL）中和静脉注射小鼠B型C型D型E型数量（只）剂量（mL/只）10.90.3----37℃，40min20.420.9-0.3---2第2页共2页本文格式为Word版，下载可任意编辑0.430.9--0.3--20.440.9---0.3-20.450.9----0.320.42.1.1小鼠10只，分为5组，每组2只，各组依次静脉注射上述5个管中一个管中的混合液，注射剂量为每鼠0.4mL，

4、观看72h，按表2推断结果。表2试验结果判定第一种结果其次种结果第三种结果第四种结果第五种结果第六种结果B型血清+肠内容物滤液活肠毒素是A型活肠毒素是B型活肠毒素是C型活肠毒素是D型死肠毒素是E型死1.不是魏氏梭菌毒素，考虑其它毒素或毒物C型血清+肠内容物滤液活死活死死死D型血清+肠内容物滤液活死死活死死2.检查各型血清，尤其是B型血清是否失效E型血清+肠内容物滤液活死死死活死第2页共2页