DB43∕T 1964-2020 苎麻根腐线虫综合防控技术规程(湖南省)

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ICS65.020CCSB16DB43湖南省地方标准DB43/T9164—2020苎麻根腐线虫病综合防控技术规程RegulationforIntegratedPreventionandControlTechnologyofRamierootrotnematodedisease2020-12-29发布2021-03-29实施湖南省市场监督管理局发布

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2DB43/T1964—2020目次前言························································································································Ⅲ1范围·····················································································································12规范性引用文件······································································································13术语和定义············································································································14苎麻根腐线虫病症状································································································15防控原则···············································································································26防控方法···············································································································27病害检测与监测······································································································28废弃物处理············································································································39档案管理···············································································································3附录A（资料性）苎麻根腐线虫病病原线虫形态学鉴定、分子生物学检测方法·······················4附录B（资料性）苎麻根腐线虫病防治档案记录······························································6I

3DB43/T1964—2020II

4DB43/T1964—2020前言本文件按照GB/T1.1—2020给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由湖南省农业农村厅提出。本文件由湖南省农业标准化技术委员会归口。本文件起草单位：湖南省植物保护研究所。本文件主要起草人：朱春晖、张德咏、刘勇、成飞雪、程菊娥、解啸、孙书娥、王东伟。III

5DB43/T1964—2020IV

6DB43/T1964—2020苎麻根腐线虫病综合防控技术规程1范围本文件规定了苎麻根腐线虫病的术语和定义、症状、防控原则、防控方法、病害检测与监测、废弃物处理、档案管理等技术要求。本文件适用于苎麻根腐线虫病的综合防控。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321农药合理使用准则GB/T17980.38农药田间药效试验准则（一）杀线虫剂防治根部线虫病NY/T1276农药安全使用规范总则NY/T1321—2007农作物种质资源鉴定技术规程-苎麻3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1苎麻根腐线虫病RamieRootRotNematodeDisease为害苎麻地下根茎的一种线虫病，由咖啡短体线虫引起，属于动物界（Animalia）、线虫门（Nematoda）、侧尾腺纲（Secernentea）、垫刃目（Tylenchida）、垫刃科（Tylenchidea）、短体属（Pratylenchidae）。3.2综合防控IntegratedPreventionandControl坚持“预防为主、综合防治”的植保方针，以“科学植保、绿色植保、公共植保”为方针，以确保农业生产、农产品质量和农业生态环境安全为目标，以减少农药使用为目的，优先采取生态调控、生物防治、物理防治和科学用药等资源节约型、环境友好型技术来控制农作物病虫害的植物保护措施。4苎麻根腐线虫病症状苎麻根腐线虫病主要是由短体属线虫为害引起的，主要为害苎麻根部，特别是苎麻的萝卜根。受害麻株初期根常出现黑褐色不规则病斑，稍凹陷，后渐扩大为黑褐色大病斑，并深入木质部使之变黑褐色海绵状朽腐，质地疏松似糠状，病灶交接处常见黑绿色病变。被害麻兜地上部分常常表现出麻株减少且矮小，叶片发黄，干旱时凋萎，发病严重时整根腐烂，麻株枯死。（图1）。1

7DB43/T1964—2020图1苎麻根腐线虫病为害症状5防控原则按照“预防为主，综合防控”的植保方针。坚持以“农业防治、物理防治、生物防治为主，化学防治为辅，分区治理”的防控原则。6防控方法6.1农业防控6.1.1应选择抗性强的品种，如独山圆麻、牛耳青、华苎4号、中苎1号、湘苎2号和川苎系列8号、11号、16号等。6.1.2采用无病土育苗或基质育苗，并进行苗床消毒；选用健康壮苗。226.1.3新建麻园栽培前施有机肥500kg-1000kg/667m，并每年冬季进行培土、施有机肥500kg/667m。6.1.4实行高垄栽培，适时开沟排水，降低地下水位。6.1.5注意田园卫生，在定植前，结合整地，应及时中耕除草，拔除病株，清除病残体，并带出田外，集中无害化处理。6.1.6重病田应与水稻等禾本科非寄主作物进行轮作。6.2生物防控可利用生物农药或微生物菌肥抑制苎麻根腐线虫病的发生。如用阿维菌素（乳油或颗粒剂）、光合细菌嗜硫小红卵菌（Rhodovulumsulidophilum）等。6.3化学防控对重病麻园有必要进行施用化学药剂防治。化学药剂使用应符合GB/T8321NY/T1276和GB/T17980.38的相关规定。7病害检测与监测调查苎麻根腐线虫发生情况，加强苎麻根腐线虫病的检测与监测，对病害进行早期诊断与预测预报。并根据发病情况及土壤中线虫种群密度，选择合理的防治方法。定期对田间发病情况进行调查，并取田间土壤进行苎麻根腐线虫病原检测，具体检测方法参见附录A。根据NY/T1321—2007农作物种质资源鉴定技术规程-苎麻A.2、A.4、A.5的内容进行病原分离、2

8DB43/T1964—2020病情分级和病情指数的计算。8废弃物处理生产过程中的农药和肥料包装物、塑料软盘、农膜、杂草等生产废弃物，应及时收集到回收箱内，带离生产区集中进行无害化处理。9档案管理9.1建立苎麻根腐线虫病防治档案记录档案，为生产活动追溯提供有效的证据。记录主要包括前茬作物、病虫害发生情况、曾使用过防治方法防治病害、当茬作物、当前使用防治方法、根腐线虫数量、根腐线虫病情指数、调查人员等。9.2加强档案管理，注意防虫、放鼠、防霉变等。9.3档案记录应真实准确，保存期限不少于3年。3

9DB43/T1964—2020附录A（资料性）苎麻根腐线虫病病原线虫形态学鉴定、分子生物学检测方法一、苎麻根腐线虫病病原线虫形态学鉴定土壤中或者根中分离的线虫显微镜下形态图为图A1。线虫形态的大小符合表A1数据，则为咖啡短体线虫引起的苎麻根腐线虫病害。图A1苎麻根腐线虫病病原咖啡短体线虫形态图表A1咖啡短体线虫形态特征测量值测量值范围测量项目雌虫(mm)雄虫(mm)L体长0.37-0.690.43-0.70a体长/最大体宽17.7-30.525.6-40.0b体长/体前端至食道与肠连接处的距离4.0-7.84.9-7.0b´体长/体前端至食道腺末端的距离3.3-5.13.8-4.8c体长/尾长13.7-26.912.3-24.0c´尾长/肛门处体宽1.8-2.42.3-3.5V体前端至阴门的距离×100/体长75.8-84.2St(μm)口针长度12.5-17.813.8-17.5二、苎麻根腐线虫病病原分子生物学鉴定取病麻兜及周围土样，采用浅盆法或蔗糖漂浮离心法分离苎麻根样中或土样中线虫。取分离的单条线虫用无菌水清洗3次，放于0.2mLPCR薄壁管中，-20℃冷冻10min，加小量蛋白酶PKase，65℃消化1h，95℃灭活10min，离心上清液作为PCR反应模板。引物：5’-CGTAACAAGGTAGCTGTAG-3’和5’4

10DB43/T1964—2020-TCCTCCGCTAAATGATATG-3’。94℃预变性4min，之后94℃变性30sec，退火温度62℃30sec，72℃延伸45sec，28个循环，72℃延伸10min。取扩增产物8μL，加入到1.5％琼脂糖凝胶（100mL1.5％琼脂糖凝胶含有5µLSYGBGreen）的点样孔内。电泳缓冲液1×TAE，120V，电泳30min。电泳结束后，取出琼脂糖凝胶，通过凝胶成像仪观察结果并拍照记录，扩增片段与预期目标条带大小一致，则结果判定为阳性，未扩增出预期大小条带，则结果判定为阴性；若阳性对照未扩增出预期大小片段或空白对照扩增出任何条带，则检测结果失败，需要重新检测。进一步可以通过克隆扩增片段、测序及比较分析，加以确认检测结果。800bp图A2苎麻根腐线虫（800bp）PCR检测（M：Marker,1，阳性对照，2-4,阳性，CK：阴性）5

11DB43/T1964—2020附录B（资料性附录）苎麻根腐线虫病防治档案记录苎麻根腐线虫病防治档案记录见表B.1。表B.1苎麻根腐线虫病防治档案记录类型曾使用过防当前使前茬病虫害发生根腐线根腐线虫调查治方法防治当茬作物用防治作物情况虫数量病情指数人员病害方法日期6