DB65∕T 4508-2022 驴鲜精人工授精技术规程(新疆维吾尔自治区)

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ICS65.020.30CCSB43□B65新疆维吾尔自治区地方标准DB65/T4508—2022驴鲜精人工授精技术规程Codeofpracticeforartificialinseminationwithfreshsemenindonkey2022-05-09发布2022-07-01实施新疆维吾尔自治区市场监督管理局发布

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2DB65/T4508—2022刖言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件由塔里木大学提出。本文件由新疆维吾尔自治区畜牧兽医局归口并组织实施。本文件起草单位：塔里木大学、新疆库车裕万家畜禽养殖农民合作社、新疆维吾尔自治区畜牧科学院、新疆维吾尔自治区畜牧兽医局、青岛农业大学、新疆维吾尔自治区纤维质量检测中心。本文件主要起草人：何良军、王时伟、周小玲、郝建东、巴哈迪力煉巴图尔、艾孜子江煉阿不里克木、孙玉江、于治成、张明。本文件实施应用中的疑问，请咨询塔里木大学。对本文件的修改意见建议，请反馈至塔里木大学（新疆阿拉尔市虹桥南路705号）、新疆库车裕万家畜禽养殖农民合作社（新疆阿克苏地区库车县玉奇吾斯塘乡）、新疆维吾尔自治区畜牧兽医局（乌鲁木齐市新华南路408号）、新疆维吾尔自治区畜牧科学院（乌鲁木齐市经济技术开发区阿里山街468号）、新疆维吾尔自治区市场监督管理局（乌鲁木齐市新华南路167号）。塔里木大学联系电话：0997-4680332；传真:0997-4680332；邮编:843300新疆维吾尔自治区畜牧兽医局联系电话：0991-8568089；传真:0991-8527722；邮编:830004新疆维吾尔自治区畜牧科学院联系电话：0991-3075180邮编：830011新疆维吾尔自治区畜牧兽医局联系电话：0991-8568353邮编：830004新疆维吾尔自治区市场监督管理局联系电话：0991-2818750；传真:0991-2311250；邮编：830004

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4DB65/T4508—2022引言本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，涉及到精液稀释液配制相关的专利的使用。本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场。该专利持有人己向本文件的发布机构承诺，他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下,就专利授权许可进行谈判。该专利持有人的声明己在本文件的发布机构备案。相关信息可以通过以下联系方式获得：专利持有人姓名：塔里木大学专利持有人地址：新疆阿拉尔市虹桥南路705号塔里木大学科技处请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。II

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6DB65/T4508—2022驴鲜精人工授精技术规程1范围本文件规定了驴鲜精人工授精的术语和定义、公驴基本要求、器械和试剂、采精、精液处理、稀释精液保存、稀释精液运输、输精、早期妊娠检查、记录等要求。本文件适用于大、中、小型母驴的配种。2规范性引用文件。其中，注日期的引用文件，下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T3796马和驴冷冻精液T/CAAA020驴冷冻精液输精技术规程3术语和定义F列术语和定义适用于本文件。3.1人工授精artificialinsemination。用人工方法将处理后的公畜精液输入发情母畜的子宫内，使母畜受孕的技术3.2驴鲜精freshsemenofdonkey,人工采集、经过滤的新鲜驴精液。色泽乳白色或淡黄色。精子活力>65%，精子密度S6X107个/mL精子畸形率<15%。3.33.4假阴道artificialvrgina。模拟母畜阴道环境条件的采精工具，由外壳、内胎、集精杯等组成3.53.6采精semencollection人工模拟有自然交配感的工具，以获得公畜精液的方法。3.7排卵期ovulationperiod母畜发情期即将结束，卵泡处于即将排卵或正在排卵的阶段。3.83.9优势卵泡dominantfollicle，生长卵泡持续发育在母畜发情过程中，发情初期有许多小卵泡同步生长，形成一个生长卵泡群体，大的卵泡会排卵。2d3d,通过机体生理选择，只有优势卵泡可以继续发育为大的卵泡3.103.11台驴专用保定架specializedstockforthemountjennyass公驴采精时，专门用于保定母台驴的保定架。4公驴基本要求公驴应具有种用价值，外貌评价为特级或一级，体质健康，无遗传病。

7DB65/T4508—20225器械和试剂5.1器械采精筒、假阴道内胎、消毒医用纱布、显微镜、直型滴管、载玻片、盖玻片、烧杯、温度计、马驴专用输精管、20mL—次性注射器、一次性长臂手套、兽用B超（直肠线阵探头）、绳子、毛巾等。5.2试剂75%酒精、凡士林、温水、蒸馏水、生理盐水等。5.3器械清洗和消毒采精器械使用后，先用加有洗涤剂的温热溶液刷洗，后用水冲洗干净，再用蒸馏水逐个冲洗，用75%酒精棉球擦拭消毒，待酒精挥发尽后方能使用。6采精6.1采精环境要求应满足下列条件：a)采精场所应安静，空地面积>60m2;b)地面应铺设吸水砖，搭建高度>2.5m防雨棚顶；c)附近应具有供自来水和电的配种室；d)采精前后用2%氢氧化钠或生石灰消毒1次。6.2台畜专用保定架采精场所应安装台畜专用保定架，见附录A。6.3采精准备采精公驴应保持体表干净，用35°C38°0温水清洗阴茎、龟头，并用消毒的毛巾擦干。6.4采精操作采精时把待采公驴牵到活台畜2m3m处，待其阴茎充分勃起后，允许公驴爬跨，釆精员轻扳阴茎,顺手导入假阴道内，完成射精后，小心地取下集精杯，迅速转移至精液处理室。6.5采精频次成年公驴可每隔2d采精1次。7精液处理7*1精液稀释液的配制应按照附录B的要求执行。7.2精液预处理釆集的原精液用4层消毒医用纱布过滤，然后用肉眼观察精液的颜色和浑浊程度，正常精液色泽呈乳（灰）白色或淡黄色，并记录公驴号和原精液量mL)。7.3精液的检查精子密度、精子活力、精子畸形率、菌落数的检测方法应按照NY/T3796的要求执行。检测后应记录精子密度、精子活力、精子畸形率、稀释液量。

8DB65/T4508—20227.4精液稀释精液稀释的要求：a)将鲜精稀释液水浴保持在37°C;b)根据原精液精子密度，对新鲜精液进行体积比为1:11:4的稀释。8稀释精液保存将稀释新鲜精液用0.5cm厚的棉絮或毛巾包裹后应置于4°C条件下保存，24h内可正常使用。9稀释精液运输稀释后的新鲜精液应在4°C条件下运输。运输过程中应有专人负责，贮存容器不应横倒碰撞和强烈振动。10输精10.1适配母驴10.1.1母驴基本要求。适配母驴年龄应在3岁以上，无遗传病，无二类疫病和三类疫病中的任何一种马属动物疫病10.1.2直肠检查应按照T/CAAA020的要求执行。10.1.3B超检查应按照T/CMA020的要求执行。根据卵泡大小判断母驴已进入排卵期。小型驴排卵前卵泡直径&C30mm中型和大型驴排卵前卵泡直径彡40mmB超影像资料参见附录10.1.4适配母驴外阴清洗输精前，配种人员应清洗母驴外阴，清洗步骤如下：；a)保定好适配母驴，用手或绳子将母驴尾部固定在母驴体，露出肛门部和外阴部b)用洁净温水自上而下清洗肛周及外阴部，用卫生纸擦干；c)用手将母驴外阴翻幵，用生理盐水冲洗干净；d)用干净毛巾将上述部位擦千，等待输精。10.2输精操作子宫体输精时，注射器一次性吸入前进运动的精子总数应S3X108个。按下面操作步骤执行：a)用20mL—次性注射器抽取稀释过的鲜精7mL;b)在20mL—次性注射器中继续吸入7mL8mL空气，调整精液与空气位置，使精液段在注射器前端，空气段靠近注射器活塞；c)将注射器内的精液注入马驴专用输精管内，外套管前端留出5cm7cm空气段，注射器内存留的精液与输精外套管内的精液是连续无空气的，上述注射器抽取精液的操作步骤图示说明见附录D;;d)习惯左手持输精管的操作者应站在母驴右后方，习惯右手持输精管的操作者应站在母驴左后方手心向下，将手e)将牛用输精外套管尖端位于食指第一指节后，用拇指夹持在食指和中指之间，3cm5cm和输精管插入阴道，缓慢向前触摸子宫颈口，输精管通过子宫颈口后再深入子宫体处，准备输精；f)抬髙注射器后端，使输精管弯曲，不应弯折；

9DB65/T4508—2022g)应确保注射器内存的精液与输精管内存精液无空气存在，推动注射器活塞至注射器前端，将鲜精输到母驴子宫体内；h)完成输精后，先将输精管从阴道退出，再退出操作者的手臂。10.3输精次数符合输精条件的适配母驴应每24h输精1次，直到母驴排卵为止。11早期妊娠检查适配母驴最后1次输精记为配种第0d15d后即可利用B超做早期妊娠检查，B超检查影像资料参见附录C12记录12.1公驴釆精记录包括公驴编号、采精时间、采精量、精子密度、精子活力、精子畸形率、稀释液量、配种母驴编号等信息，公驴配种记录表见附录E中表E.1。12.2母驴配种记录包括母驴编号、首次输精时间、末次输精时间、与配公驴编号、妊娠检查时间、妊娠检查结果、产驹时间、产驹情况等信息，母驴配种记录见附录E中表E.2。

10DB65/T4508—2022附录A附录B(规范性）附录C台畜专用保定架50pm70pm70cm85:m130cm4图A.1台畜专用保定架设计图5

11DB65/T4508—2022附录D附录E(规范性）附录F驴鲜精稀释液配制方法F.1试剂蒸馏水、葡萄糖、甘氨酸、青霉素、链霉素、新鲜鸡蛋蛋黄液。F.2配制比例表B.1驴鲜精液稀释液配方表蒸馏水葡萄糖甘氨酸青霉素链霉素蛋黄液总体积mT,ggIUIUmT,mL10070.410105105200140.8202010210300211.2303015315400281.6404020420F.3稀释液的配制方法驴鲜精稀释液按以下步骤配制：a)将所需要量的甘氨酸和葡萄糖置于已灭菌的容器中；b)向容器中加入所需要量的蒸馏水混匀使上述2种物质在常温下充分溶解;c)向容器中加所需要量的青霉素和链霉素并混合均匀；d)向容器中加入所需要量的卵黄液并混合均匀即得到新鲜精液保存稀释液。6

12DB65/T4508—2022附录G附录H(资料性）附录I兽用B超影像资料(7.5MHz直肠线阵探头扫描)1.1B超扫描影像见图C.1。^1/H?/U17H7G.GL04EJXI3MM壓0'㈣:嗓、+;-'w.:JT3I:X.hi.!嶠+.ran-X:Mlia)直径为32.3mm卵泡b)直径为45.8MM卵泡c)配种后第15天的孕囊注：图中白色箭头所指黑色空泡是卵泡，为无回声区。图C.1B超扫描影像7

13DB65/T4508—2022附录J附录K(资料性）附录L注射器抽取精液的操作步骤图示说明L.1注射器抽取精见图D.1。图D.1注射器器抽取5mL稀释后精液L.2注射器抽取空气见图D.2。fJMj.T2Ja)注射器抽取7mL8mL空气b)调整注射器中精液段与空气段的位置图D.2注射器抽取空气示意图L.3注射器连接牛用输精管外套见图D.3!n^mrri图D.3注射器连接牛用输精外套管后精液位置8

14DB65/T4508—2022附录M附录N(规范性）附录0配种记录表0.1公驴配种记录表表E.1公驴配种记录表釆精量密度精子活力精子畸形率稀释液量配种母驴编号公驴编号采精时间mL个/mL%%mL0.2母驴配种记录表表E.2母驴配种记录表母驴编号首次输精时间末次输精时间与配公驴编号妊娠检查时间妊娠检查结果产驹时间产驹情况9