分析化学论文-高效液相色谱法测定测定蔬果中的vc含量

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1、分析化学课程论文系别：能源工程系班级：13应化姓名：苟昱高效液相色谱法测定测定蔬果中的Vc含量摘要：高效液相色谱法是一种高效、快速的现代分析技术，本文简要介绍了高效液相色谱法的特点和在测定蔬果中的Vc含量的应用。通过简单介绍有关高等分析化学在近几年食品测定的应用，阐明高等分析化学在人类生活中的重要作用。关键词：高效液相色谱法蔬果Vc高效液相色谱法测定测定蔬果中的Vc含量引言：高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进

2、行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。1.原理维生素C（VitaminC,Vc）又叫抗坏血酸，是一种水溶性维生素。Vc在体内参与多种反应，如氧化还原过程，在生物氧化和还原作用以及细胞呼吸中起重要作用。人体内缺乏Vc时容易导致坏血病。同时，由于Vc是一种水溶性的强有力抗氧化剂并参与胶原蛋白的合成，它同时还具有防癌、预防动脉硬化、治疗贫血、抗氧化和提高人体免疫力等功效。Vc在蔬果中普遍存在，尤其是柑桔类水果中含量较高。樱桃、番石榴、辣椒、猕猴桃等水果中Vc含量在50-300mg/100g。微波辅

3、助萃取具有快速高效、操作简便、节省溶剂等优点，在天然产物、环境、食品等领域中得到广泛应用。本实验采用微波辅助萃取法快速萃取蔬果中的Vc，采用高效液相色谱进行分析，以Vc标准系列溶液的色谱峰面积对其浓度做校准曲线，根据样品中Vc的峰面积，由校准曲线计算其浓度2.试剂与材料乙腈（色谱纯），冰乙酸，维生素C，磷酸二氢钾等均为分析纯；青椒、番石榴或西红柿等蔬果样品。实验用水为超纯水。Vc标准溶液：快速准确称取0.025gVc，用1mol/L乙酸溶液溶解，定量转移至250mL容量瓶中，用1mol/L乙酸溶液定容，得到100mg/L标准溶液备用，现用现配。3.仪器和设备高

4、效液相色谱（HPLC）仪、分析天平、离心机、超声波水浴器、固相萃取装置、氮气吹干仪、涡旋混合器、50mL具塞塑料离心管、研钵。4.样品处理(1).提取①液态奶、奶粉、酸奶、冰淇淋和奶糖等。称取2g（精确至0.01g）试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加入5mL水混匀后做待净化液。②奶酪、奶油和巧克力等。称取2g（精确至0.01g）试样于研钵中，加入适量海砂（

5、试样质量的4倍～6倍）研磨成干粉状，转移至50mL具塞塑料离心管中，用15mL三氯乙酸溶液分数次清洗研钵，清洗液转入离心管中，再往离心管中加入5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取10min后，以不低于4000r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25mL，移取5mL滤液，加入5mL水混匀后做待净化液。若样品中脂肪含量较高，可以用三氯乙酸溶液饱和的正己烷液-液分配除脂后再用SPE柱净化。(2).净化将待净化液转移至固相萃取柱中。依次用3mL水和3mL甲醇洗涤，抽至近干后，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。整个固相萃取过

6、程流速不超过1mL/min。洗脱液于50℃下用氮气吹干，残留物（相当于0.4g样品）用1mL流动相定容，涡旋混合1min，过微孔滤膜后，供HPLC测定。5.高效液相色谱测定(1).标准曲线的绘制用流动相将三聚氰胺标准储备液逐级稀释得到的浓度为0.8、2、20、40、80μg/mL的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积-浓度作图，得到标准曲线回归方程。(2).定量测定待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应稀释后再进样分析。6.空白实验除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。本方法的定量限为2mg/kg。在添加浓度2mg/kg

7、～10mg/kg浓度范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。结语：以上的例子只是高等分析化学应用的一个小小缩影。我认为高等分析化学对人类生活的作用会日益凸显，关于分析化学与人类生活关系的研究也会一直伴随着这个学科的发展和人类的进步参考文献[1].陶增宁等编，定量分析，上海：复旦大学出版社，1985[2].梁逸曾等编，分析化学手册，第十册，北京：化学工业出版社，2000[3].武汉大学主编，分析化学，第三版，北京：高等教育出版社，1995[4].邹明珠，许宏鼎，于桂荣

8、编著，化学分析，长春:吉林大学出版社，