山葵黑根病菌拮抗菌的筛选、鉴定及防治研究硕士论文

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1、Y1212119护J-涨学硕士学位论文作者睦整鸿．，完成日期．2壁壁2生．垒旦。培养单位一生全盘堂堂瞳一一、指导老师二蔓丝蓥塾撬．’专业二丝生塑堂一．．研究方向．丝垒堑鲍佥差鉴蕉鱼麈圃：授予学位日期一．．生。i旦。旦山葵病原菌拮抗菌的筛选、鉴定及田间防治研究专业：微生物分类鉴定与应用硕士生陈静鸿指导教师葛绍荣教授摘要山葵，属十字花科多年生草本植物，产于目本富士山和台湾阿里山，是生产芥术的主要原料，沿海人们喜食生鱼片，以芥末为佐餐，被日本人民称为生活必需品。美国，加拿大，澳洲也有出口，因此市场销售量大。近年国外研究发现：山葵还具有杀菌防病、防腐利尿、发汗、清血、增进食欲、减脂和软化血管的功

2、能，从而更增加了山葵的需求。因此，种植山葵有很好的经济社会效益。近年山葵己在大陆大量种植，我省青城、邛崃、雅安、乐山、绵阳、凉山等地区都建有种植基地，全国种植面积不下数十万亩。但其植株被一种黑根病感染，黑根病病原菌为一种丝状真菌——墨入菌(PhomawasabiaeYokogi)引起。凡感染黑根病的山葵其产值下降50％以上。本研究用稀释分离法对成都、简阳、雅安等地区的农田、自然保护区的13个土壤样品进行放线菌和细菌的分离，共分离到放线菌119株，细菌67株。以山葵墨入菌为供试菌，采用点对峙培养筛选法对分离到的101株放线菌，57株细菌进行初筛，结果显示，对山葵墨入菌具有拮抗活性的放线菌3

3、8株，细菌10株。再通过打孔法复筛，得到产生抑菌圈最大的菌株SA2。根据传统的表型分类、生理分类，化学分类和现代16SrDNA序列分析的分子分类方法，即多相分类，对拮抗菌株SA2进行形态特征，生理生化特征分析以及16SrDNA序列分析。SA2为产芽胞细菌，周身鞭毛，芽胞中生，椭圆形，菌呈短杆状，菌体长L9-2．8tun，宽0．6-1．1um，具有运动性。LB培养基斜面30℃培养72h后，菌落呈乳白色，产生折皱。以16SrDNA序列为基础构建了包括14株相关种属细菌在内的系统发育树，其中，与芽孢杆菌属细菌有很高的同源性(92％-98．3％)，与苏云金芽胞杆菌(Bacillus拍州，增0en

4、sis)十分接近，序列相似性值98．3％。通过对平板对峙筛选的最强拮抗菌s11，S13，SA2，SAl6进行室内盆栽试验，选取盆栽试验效果最好的菌株SA2进行田间试验。试验地选在成都市都江堰龙池镇的山葵种植场黑根病发病率在50％以上的场地。盆栽试验结果表明：SA2拮抗细菌菌株对山葵黑根病有良好的防治效果，对山葵黑根病的防效为85．57％。山葵种植1，3，5个月后，SA2对黑根病防效分别为74．12％，76．57％和78．98％，有较好的防治效果，且随时间的延长而增加。关键词：山葵黑根病：拮抗菌；筛选；鉴定：苏云金芽胞杆菌SA2；生物防治VScreening，identificationa

5、ndantagonismofantagonisticorganismsagainstPhomawasabiaeYokogiandTheirBiocontrolEfficiencyMajor：MicrobiologyMasterCandidate：Chen·-JinghongTutor：Prof．Ge··ShaorongAbstraetWasabiisthemainmaterialofmustard’Sproduction，growinginFujiinJapanandAliMountaininTaiwan，whichisnecessityofJapanese．Anditisexporte

6、dtoAmerican，CanadaandAustralia．Sothereisalargedemandforit．Accordingtorecentabroadstudies，scientistsfoundwasabihasthefunctionsofsterilization，protectionfromillness，antisepsis，diuresis，diaphoresis，clearingblood，whettingappetite，decreasingfatandinteneratingbloodvessel．Therefor，theneedofwasabiisincre

7、asinganditisafarmproducewhichwillbringgreatprofits．RecentyearswasabihascroppedlargelyinmainlandofChina,therearefieldsofwasabiinQingcheng，Leshan，MianyangSichuanprovince．ButitsindividualplantisinfectedbyphomawasabiaeYoko