t-spot.tb检测技术在临床结核病中的应用进展

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1、T-SPOT.TB检测技术在临床结核病中的应用进/PC何玲慧陈晓琴（通讯作者）傅文（贵州医科大学贵州贵阳550004）综合国内外研究显示，T-SPOT检测方法对结核感染的诊断具有较高的特异性和灵敏性，在免疫功能缺陷的患者中仍然異有较高的价值，但其在潜伏结核感染和活动性结核病的分辨率不强。【关键词】结核分枝杆菌；结核感染T细胞检测；潜伏感染；涂阴结核病R57A2095-1752（2016）06-0023-02TheapplicationprogressofT-SPOT.TBtestingtechnologyintheclinicaltuberculosisHe

2、Linghui,ChenXiaoqin,FuWen.GuizhouMedicalUniversity,GuizhouProvince,Guiyang550004,China【Abstract】ComprehensisdomesticandforeignresearchshowsthatT-SPOTdetectionmethodhashighspecificityandsensitivityforthediagnosisoftuberculosis.itstillhashighvalueforpatientswithimmunedefect.butitisno

3、tstrongintheresolutionformlatentTBinfectionandactiveTB.【Keywords】Mycobacteriumtuberculosis;T-SPOT.TBtest;Latentinfection;Smearnegativepulmonarytuberculosis据世界卫生组织统计结果，全球约20亿人感染了结核分枝杆菌（MTB）,每年新感染患者约800-1000万［1］,死亡180万［2-3］。随着耐多药结核病数量的不断上升以及人类免疫缺陷病毒并发感染，结核病的防治工作变得更为严峻。当前结核病的诊断存在耗时长、灵

4、敏度低等问题，探索快速、简便的诊断方法一直是国内外学者研究的焦点。而近年来T-SPOT.TB（结核感染T细胞检测）成为诊断结核病的一种新方法。临床上广泛开展的针对结核感染的检测方法包括抗酸染色、结核菌培养为代表的微生物学检测和以检测结核细胞免疫功能的皮肤结核菌素实验(tuberculinskintest,TST)、体液免疫功能的结核抗体(TB-Ab)等免疫学检测。结核病诊断的金标准是结核菌培养阳性［4】，但结核菌生长十分缓慢，培养阳性率也不足以满足临床的需要。而且结核病痰标本不易获得，且肺外结核多见；即使能够获得痰标本，由于每毫升痰液中结核菌的数量需达到50

5、00到10000条才能检测到［5-6】，故也仅冇不到20%抗酸杆菌阳性［7］。近年来兴起的以结核分枝杆菌抗酸TB-DNAPCR检测为代表的分子生物学诊断具有良好的敏感度和特异度［8-9】，但苏存在成本高iL操作比较复杂，对实验条件及技术人员要求高，不适合普通实验室开展,加之其无法区分死、活菌，且肺外结核病人同样存在取样困难的问题限制了其在临床广泛开展。众所周知，抗结核免疫包括天然免疫和获得性免疫应答。天然免疫的细胞包括中性粒细胞、自然杀伤细胞(naturalIdlercell，NK)等。中性粒细胞通过释放防御素协助巨噬细胞的杀伤作用，NK细胞则是直接溶解MT

6、B或者MTB感染的单核细胞。获得性免疫包括体液免疫和细胞免疫，0前研究认为体液免疫基本无任何保护性作用，机体抗MTB主要依赖于T细胞介导的细胞免疫。肺泡巨噬细胞作为结核菌体内寄生的主要宿主细胞，K功能是快速杀火入侵的病原体。巨噬细胞通过吞噬溶酶体的溶解作用裂解、加工处理MTB抗原肽如结核特异性抗原6KD早期分泌靶向抗原(earlysecretingantigentarget-6,ESAT-6)、10KD培养波过蛋白肽段(culturefiltrateprotein-10,CFP-10),并联合MHC分子递呈MTB抗原肽给T细胞，致敏T淋巴细胞。以T细胞为主的

7、获得性免疫由此开始。T淋巴细胞在首次感染致敏后可成为记忆T淋巴细胞，并长期存在于机体内。当机体再次感染结核菌吋，记忆T淋巴细胞在结核菌特异性抗原的刺激之下增殖成为效应T淋巴细胞，同时这些效应T淋巴细胞在结核特异性抗原的刺激下释放多种细胞因子，如肿瘤坏死因子、γ-干扰素(IFN-γ)、白介素2(IL-2)、巨噬细胞激活因子等。其中，由激活的辅助T淋巴细胞(CD4+)在结核特异性抗原如ESAT-6、CFP-10刺激之下产生的IFN-γ是抗结核感染免疫中的关键性细胞因子。因此，通过检测血中存在由ESAT-6、CFP-10结核特异

8、性抗原刺激后分泌IFN-γ的水平可作为是