马鹿茸水溶性总蛋白提取工艺研究

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1、马鹿茸水溶性总蛋白提取工艺研究(泸州医学院附属医院中药房四川泸州646000)【】目的：优选鹿茸水溶性蛋白的最佳提取工艺。方法：以马鹿茸为原料，釆用组织匀浆结合浸提的方法提取可溶性蛋白，以鹿茸可溶性蛋白得率和含量为评价指标，通过单因素实验研宄匀浆方法、匀浆次数、提取溶液浓度和pH对鹿茸可溶性蛋白得率的影响，优化提取工艺。结果：鹿茸可溶性蛋白的最佳提取工艺为，以pH为7，50mmol•L-l的Tris-HCI缓冲溶液为提取溶剂，采用电动匀浆机，匀浆次数为3次。结论：优化得到的提取工艺稳定

2、、可行，可为进一步研究鹿茸蛋白的药理药效提供参考。【关键词】鹿茸；水溶性蛋白；提取工艺【】R285.5【】A【】2095-1752(2016)02-0367-02OptimizationofExtractionTechnologyofSolubleProteinsfromVelvetAntlerofCervuselaphusLinnaeusZhouJie.PharmacyofChinesemedicineAffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollege,Luzho

3、u646000,SichuanChina【Abstract】ObjectiveTooptimizetheappropriateextractingtechnologyforsolubleproteinsfromvelvetantler.MethodsExtractedthesolubleproteinswithhomogenatemethod,studiedtheeffectofhomogenatemethod,homogenatetimes,concentrationandpHofextrac

4、tionsolvent,usingsolubleproteinsextractionratesandcontentastheindices.Results:Theoptimalextractiontechnologyforthesolubleproteinswasasfollows:electrichomogenate,theextractionsolventof50mmol•L-l,pHof7.Theextractionrateofhesolubleproteinsfromvelve

5、tantlerwasandthecontentofthesolubleproteinswas.ConclusionTheoptimalextractiontechnologyisstableandfeasible,andcanprovidereferenceforfurtherstudyonvelvetantler.【Keywords］Velvetantler;Solubleproteins;Extractiontechnology鹿茸为鹿科动物梅花鹿（CervusnipponTennminck

6、）或马鹿（CervuselaphusLinnaeus）的雄鹿未骨化密生茸毛的幼角，具有壮肾阳，益精血，强筋骨等作用［1】。鹿茸中含多种活性物质，其中鹿茸蛋白占鹿茸总质量的52%以上［2］，现代研究表明，鹿茸蛋白能在多方面调节人体生理功能，对内分泌、免疫、血液系统等均有影响［3-4］。B前对于该成分的提取工艺研究方面，大多采取简单的静置和搅拌方式［5-7］,张梦莹等［8］采用碳酸盐缓冲溶液结合超声波技术提取，Tris-HCI缓冲溶液结合组织破碎的提取方法还未见报道。本研究将Tris-HCI缓冲溶液

7、浸提和组织破碎的提取方法相结合，并优选出较优提取工艺参数，为进一步开发和利用鹿茸这-宝贵资源提供科学依据。1.仪器与试药1.1仪器TU-19系列紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器公司）；Neofuge23R高速冷冻离心机（HealForce公司）；ULT1386-3-V30超低温冰箱（日本三洋电器公司）；PHS-3C型酸度计（上海伟业公司）；电动匀浆器（美的公司）；FSH-2A可调高速匀浆机（江苏金坛市医疗仪器厂）。1.2实验材料内蒙古赤峰巴林左旗雄性马鹿鹿茸；采茸方式为全身麻醉消毒锯茸留血密

8、封后冷藏运输，2小吋内放置-8CTC冷冻保存。1.3试药与试液标准牛血清白蛋白（BSA）（北京拜耳迪公司）；考马斯亮蓝试剂（G-250）（北京拜耳迪公司），并参照文献方法配制成溶液［8］;三羟甲基氨基甲烷（Tris,Sigma公司）；其他试剂均为分析纯。1.方法与结果2.1蛋白质含量测定方法学的建立2.1.1对照品溶液制备精密称取牛血清白蛋白l.Omg,用蒸馏水溶解并定容至10mL,配成浓度为O.lmg/mL的牛血清蛋白标准溶液，保存在4°C冰箱中，待用。2.1.2样品的制备称取鹿茸样品10g，