猪卵丘包裹层数与猪卵母细胞质量的相关性研究

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1、广东畜牧兽医科技2014年(第39卷)第5期试验研究·27·猪卵丘包裹层数与猪卵母细胞质量的相关性研究周荣1，石俊松1，周秀1，罗绿花1，麦然标1，王青来1,2，蔡更元1,2，吴珍芳1,2*（1.广东温氏食品集团股份有限公司，广东新兴527439；2.国家生猪种业工程技术研究中心，广东新兴527439）摘要：为探讨如何从大量的未成熟卵母细胞中挑选出合适的卵母细胞用于体外成熟培养，本研究根据猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)的颗粒细胞层数和胞质情况,把挑选的COCs分成A、B、C3个等级；体外成熟培养42～44h后，所获得的成熟卵母细胞做孤雌激活，比较孤雌胚的发育能

2、力。结果表明：A、B、C3级卵母细胞的成熟率之间没有差异（P＞0.05），但是A级卵母细胞与B级卵母细胞的孤雌胚胎的囊胚率显著高于C级卵母细胞（P＜0.05）。说明卵丘细胞包裹层数不会影响卵母细胞的成熟率，但会影响其潜在的发育能力。关键词：猪；卵丘-卵母细胞复合体(COCs)；卵母细胞；质量中图分类号：S814.8文献标识码：A文章编号：1005-8567(2014)05-0027-03RelevanceAnalysisbetweentheLayersofCumulusCellsandtheQualityofPorcineOocyteZhouRong1,ShiJu

3、nsong1,ZhouXiu1,LuoLvhua1,MaiRanbiao1,WangQinglai1,CaiGengyuan1,2,WuZhenfang1,2*(1.GuangdongWen'sFoodGroupCo.,Ltd,Xinxing527439,China;2.NotionalEngineeringResearchCenterforBreedingSwineIndustry,Xinxing527439,China)Abstract：Inordertochooseappropriateoocytesfromvastimmatureoocytesforinv

4、itromaturationculture,basedongranularcelllayersofpigcumulusoocytecomplexes(COCs)andthecytoplasm,theselectedCOCsisdividedintoA,B,Cgrades.Afterinvitromaturationculturefor42-44h,parthenogeneticactivationweremadetogetmaturedoocytes,thencomparetheembryosviability.Resultsshowedthattherewasn

5、odifferencebetweenoocytematurationrate(P>0.05),butAoocytesandBoocytesparthenogeneticembryoblastocystrateissignificantlyhigherthangradeCoocytes(P<0.05).Thisindicatedthatthelayersofcumuluscellsdidnotaffectthematurationrate,butwillaffectthedevelopmentoftheembryospotentialability.Keywords

6、：Pig;cumulusoocytecomplexes(COCs);oocyte;quality自1935年Pincus等在体外培养成熟小鼠从屠宰场废弃卵巢中获取卵母细胞，已成为胚胎卵母细胞后，哺乳动物卵母细胞的体外培养、受工程技术研究的主要来源。但如何从众多数量卵精逐渐成为研究卵成熟、受精及胚胎发生机制的母细胞中挑选合适的卵母细胞成为重点工作之重要模型[1]，并在牛、羊、猪及啮齿类等[2]许多物一。本研究根据猪卵丘-卵母细胞复合体(COCs)种中取得了巨大的进展。研究表明，猪的卵母细的颗粒细胞层数，通过体外成熟培养42～44h胞核在38h就完成了核的成熟，42h

7、左右会完后所获得的成熟卵做孤雌激活，比较孤雌胚的发成质的成熟[3],通常以胚胎发育能力来衡量质的育能力，为猪的卵母细胞体外培养和筛选提供一成熟。目前由于从体内获得卵母细胞数量有限，定的参考和指导。收稿日期：2014-06-20*：通讯作者基金项目：创建肉鸡、肉猪种业国家工程技术研究中心能力建设（2012B070801006）·28·试验研究猪卵丘包裹层数与猪卵母细胞质量的相关性研究—周荣，等1材料和方法1.1材料实验研究所用试剂未经特殊说明均购自SIGMA公司。胎牛血清(GIBCO)，生理盐水（紫光古汉集团衡阳制药有限公司）；细胞培养相关耗材为Corning公司产

8、品；卵母细