丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤保护作用的研究

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1、丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤保护作用的研究：程键，程青，杨剑虹，陆卫华【摘要】目的：探讨丹参对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用并探讨其机制。方法：60只DA)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量，测定肺组织湿/干重(DA、SOD含量：经缺血再灌注后，B和C组血浆MDA较A组均明显增加(P<0.05)，B组增加的程度明显高于C组(P<0.05);B和C组血浆SOD较A组同时点均显著下降(P<0.05)，C组减少的程度明显小于B组(P<0.05);(3)肺组织ilitaryAreainethods:SixtyDA)andsuperoxided

2、ismutase(SOD)inplasmained.ThehistologyoflungediateddUTPnickendlabeling(TUNEL).Results:(1).Histologicalchanges：Markedpulmonarycapillarycongestion，edemaandinfiltrationaofbothgroupBandCepointafterischemiareperfusionthanthatofgroupA(P<0.05).BetergroupaofgroupBandCepointthanthatof

3、groupA(P<0.05)，andthedecreasedlevelofgroupCeafterreperfusion(60min,120minreperfusionvs45minischemia，P<0.05);buttheincreasedegreeofgroupCin,120minafterreperfusion，groupCvsgroupB，P<0.05).(4).TheAIoflungtissueepointsafterreperfusioniltiorrhizacaneffectivelyprotectDA)检测试剂盒均购

4、置于南京建成生物工程公司;细胞凋亡检测试剂盒(POD)购置于武汉博士德生物工程公司。　　1.2动物模型制备　　健康DA测定采用黄嘌呤氧化酶法测血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性;硫代巴比妥酸法测丙二醛(MDA)活性。　　1.4.3肺组织W/D比值用滤纸吸去右肺上叶血，称湿重后，置烤箱中(80℃，20h)烤至恒重，称干重，计算肺W/D比值。　　1.4.4肺组织细胞凋亡指数(AI)取小块肺组织用10%甲醛固定，常规石蜡包埋，采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)对右肺中叶凋亡细胞进行定量检测，按细胞凋亡检测试剂盒说明书操作。阳性细胞

5、表现为细胞核呈棕黄色着染，每张切片光镜(40×10倍)观察随机选择的10个视野，计算细胞中的平均阳性细胞百分数为凋亡指数(apopotosisindex，AI)。　　1.5统计学处理　　实验数据以均数±标准差(±s)表示，应用SPSS12.0统计软件进行方差分析和t检验处理，P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1病理组织学改变　　光镜下B组肺组织损伤随再灌注时间进行性加重，毛细血管充血、肺泡间隔炎性细胞浸润明显，肺泡腔内大量炎性渗出、出血;而C组除肺泡间隔炎性细胞浸润有所增多，肺泡腔内少量红细胞及炎性细胞，未见出血。　　2.3血浆SO

6、D、MDA活性　　B组经缺血再灌注后，血浆SOD含量较A组同时点均显著下降(P<0.05);C组血浆SOD含量低于A组(P<0.05)，但减少的程度明显小于B组(P<0.05)。B组在缺血再灌注后血浆MDA含量较A组同时点均明显增加(P<0.05);C组血浆MDA含量高于A组(P<0.05)，但增加的程度明显小于B组(P<0.05)(表1)。　　2.4肺组织细胞凋亡指数(AI)　　A组未见明显凋亡细胞;B组及C组缺血后再灌注30，60，120min均可见肺组织细胞凋亡现象，但与B组相比，C组相同时点的AI显著减少(P&

7、lt;0.05);肺组织细胞凋亡的分析均还发现，两组中120min组凋亡细胞数均明显高于30min、60min组(P<0.05)(见表1)。表1各组缺血前、后不同时点DA、AI比较注：*与45min缺血比较P<0.05;#与再灌注120min比较P<0.05;a与同时间点A组比较P<0.05，b与同时间点B组比较P<0.05。　　3讨论　　肺缺血再灌注损伤(LIRI)，一个包括多种细胞释放出的活性氧自由基(reactiveoxygenspecies,ROS)增加的、复杂的级联反应事件[1]。ROS在肺缺血再灌注损伤中起主要作

8、用，以引起组织的脂质过氧化损伤，并释放弹性蛋白酶、溶酶体酶等损伤和破坏肺组织结构