oh的体外活性分析及其对四氧嘧啶糖尿病大鼠影响的

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1、OH的体外活性分析及其对四氧嘧啶糖尿病大鼠影响的[摘要]目的：进一步验证ProProhGHRH(144)OH的生物活性，并观察其对糖尿病（DM）大鼠GHRHGHIGF1轴的影响。方法：（1）取正常大鼠垂体6个，每个垂体分为3份后在体外孵育，将垂体随机分成4组，分别加入0.01、0.1、1.0mg・L-1的ProProhGHRH(144)OH和2.0mg・L-1hGHRH，测定加药前、后GH含量改变。（2）将DM大鼠随机分为GHRH类似物组、GHRH组和DM对照组，分别给予ProProhGHRH(144)OH1mg・L-1、h

2、GHRH(144)OH2mg・L-1和0.9％生理盐水，另取正常大鼠作为正常对照，测定DM3组和正常对照组血GH、IGF1和胰岛素含量。结果：（1）ProProhGHRH(144)OH体外活性结果示，0.1、1.0mg・L-1的ProProhGHRH(144)OH与hGHRH组3组之间比较，均P＜0.05。（2）DM3组和正常对照组血胰岛素含量结果示，正常对照组与DM3组之间比较，均P＜0.01。血IGF1含量4组之间比较均P＞0.05。血GH含量DM对照组与正常对照组之间比较，P＜0.05。GHRH组与DM对照、正常对照组3组之间比较,

3、均P＜0.05。结论：ProProhGHRH(144)OH是一种具有强大促GH分泌活性的GHRH类似物，这种活性存在剂量依赖性，当四氧嘧啶DM大鼠给予ProProhGHRH(144)OH后，能显著增加DM大鼠垂体的敏感性。[关键词]ProProhGHRH(144)OH；生长激素释放激素类似物；生长激素释放激素；生长激素；类胰岛素样生长因子1；四氧嘧啶；糖尿病；大鼠[中图分类号]R587.1；R33[文献标识码]A[]16716264（2006）05036904近年来，人们利用分子生物学原理和方法人工合成了多种生长激素释放激素（GHRH）类似物，并在糖尿病（DM）患者

4、和大鼠模型上研究GHRHGHIGF1轴对GHRH类似物的反应。本试验就是进一步验证GHRH类似物ProProhGHRH(144)OH的生物活性，并观察其对DM大鼠GHRHGHIGF1轴的影响。　1材料与方法1.1实验动物与主要试剂体重为200~250g的雌性SD大鼠，由东南大学医学院实验动物中心提供。Krebs缓冲液（NaCl118mmol・L-1、KCl4.7mmol・L-1、CaCl22.5mmol・L-1、MgSO4・7H2O1.2mmol・L-1、NaHCO325mmol・L

5、-1、KH2PO41.2mmol・L-1、葡萄糖11mmol・L-1、pH7.4）；四氧嘧啶购自Sigma公司，用生理盐水配成浓度为40g・L-1；人GH放免试剂盒、人IGF1放免试剂盒、人胰岛素放免试剂盒均购自天津九鼎生物有限公司。　1.2ProProhGHRH(144)OH的体外活性分析SD大鼠6只，在30min内取出大鼠垂体6个，将每个垂体分为3份，所有垂体均孵育在装有1mlKrebs缓冲液的玻璃试管中，共孵育5h。18份垂体随机分成4组：A组，4份垂体，在孵育2h末取出缓冲液，测定GH含量作为空白对照，然后加入0.0

6、1mg・L-1ProProhGHRH(144)OH0.1ml和新缓冲液，孵育1h后取出缓冲液测量GH浓度，再重复加药测量2次；B组,4份垂体，在孵育2h末取出缓冲液测GH含量作为空白对照，然后加入0.1mg・L-1ProProhGHRH(144)OH0.1ml和新缓冲液，孵育1h后取出缓冲液测量GH浓度，再重复加药测2次；C组,5份垂体,在孵育2h末取出缓冲液测GH含量作为空白对照，然后加入1.0mg・L-1ProProhGHRH(144)OH0.1ml和新缓冲液，孵育1h后取出缓冲液测GH浓度，再重复加药测2次；D组，5份

7、垂体，在孵育2h末取出缓冲液测GH含量作为空白对照，然后加入2mg・L-1hGHRH0.1ml和新缓冲液，孵育1h后取出缓冲液测GH浓度，再重复加药测量2次。比较各组间加入药物前后的GH浓度变化。　1.3DM大鼠建模及分组将DM大鼠随机分为GHRH类似物组、GHRH组和DM对照组，每组10只。建模方法为：SD大鼠腹腔注射四氧嘧啶（200mg・kg-1），第3天测空腹血糖＞16.8mmol・ml-1为模型建立成功。GHRH类似物组每日腹腔注射ProProhGHRH(144)OH1mg・L-1；GHRH组每日腹