生长抑素类似物奥曲肽对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响

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1、生长抑素类似物奥曲肽对卵巢癌细胞增殖及凋亡的影响黄子健陈颖梅雪婷何丽娟喻玫【摘要】目的研究生长抑素类似物奥曲肽对卵巢癌细胞SK-OV-3增殖和凋亡的作用。方法将奥曲肽（浓度分别为1.563、3.125、6.25、12.5、25、50mg·L-1）作用于卵巢癌细胞，用MTT法检测细胞活性，同时通过碘化丙啶（PI）染色，采用流式细胞仪检测细胞凋亡比率。结果奥曲肽对SK-OV-3细胞的增殖抑制效应具有剂量依赖性特点，并能诱导SK-OV-3细胞凋亡。结论奥曲肽对SK-OV-3细胞增殖具有重要调控作用，生

2、长抑素类似物可促进卵巢癌细胞凋亡。【关键词】生长抑素类似物卵巢癌细胞奥曲肽细胞凋亡【Abstract】Abjective：Toexploretheeffectofsomatostatinoctreotideonproliferationandapoptosisofovariancancercell.Methods：SK-OV-3cellsg·L-1respectively）.TheeffectsofoctreotideonprolifierationofSK-OV-3cellsetry.Resu

3、lts：OctreotideinhibitedtheproliferationofSK-OV-3cellsindose-dependentmanners，andinducedcellapoptosis.Conclusions：SomatostatinreceptorplaysanimportantroleinregulatingproliferationofSK-OV-3cells，andsomatostatincaninducecellapoptosis.【Keyatostatinanalog

4、ueOvariancancercellOctreotideApoptosis化疗已成为治疗卵巢癌的主要方法，目前国内、外所使用的药物包括铂类、紫杉醇和其他二线化疗药物，尽管这些药物对治疗有一定的疗效，但紫杉醇价格极其昂贵，其他药物很容易耐药，因此寻找效果好、副作用小的化疗药物变得非常重要。奥曲肽是一种生长抑素类似物，近年来有研究人员将其用于消化道类癌症的治疗，对初发、复发病例均有一定疗效。本研究以卵巢癌细胞株SK-OV-3为研究对象，观察奥曲肽对卵巢癌细胞生长的抑制作用并对其相关机制进行探讨，为

5、临床应用提供实验参考。1　材料与方法1.1　试剂　善宁（醋酸奥曲肽注射液），0.1mg/1ml/支，进口药品注册证号：H20030555，诺华制药生产，批号：50076；四甲基偶氮唑盐（MTT），购自sigma公司；碘化丙啶（PI），购自上海华舜生物工程有限公司。1.2　细胞株及培养　人卵巢癌细胞株SK-OV-3购自中国科学院肿瘤研究所。于37℃、5%CO2饱和湿度培养，培养基为含10%胎牛血清（HycloneLaboratoreisInc.提供，优等，批号：AMC15818）的DMEM（Inv

6、itrogenCo.提供，批号：1290007），0.25%胰蛋白酶（上海华美生物公司）消化传代。1.3　MTT法检测细胞活性　将浓度为5×104个/ml卵巢癌细胞SK-OV-3，接种于96孔平底培养板中，每孔100μl，培养24h后，再分别设空白对照组和不同浓度药物组（1.563、3.125、6.25、12.5、25、50mg·L-1），每组设3个复孔。置37℃，体积分数为5％CO2培养24h，于结束前4小时加入MTT20μl/孔，4h后弃上清液，加入二甲基亚砜（DMSO）100μl/孔，振荡

7、10min左右，置酶标仪测定OD值，波长为450nm。按下列公式计算细胞抑制率，评价药物对卵巢癌细胞增殖的抑制作用。细胞抑制率（%）=（正常对照组平均OD值-实验组平均OD值）/正常对照组平均OD值×100%1.4　PI染色法检测细胞凋亡　收集经1.563、3.125、6.25、12.5、25、50mg·L-1奥曲肽处理24h的SK-OV-3细胞，经0.25%胰蛋白酶消化5min，1500rpm离心3min，收集细胞于1.5mlEP管中，用PBS洗3次后3500rpm离心5min；再用200μl

8、PBS重悬细胞，边涡漩振荡边滴加70%预冷4℃乙醇，共加1ml，振荡均匀后于4℃过夜。3500rpm离心5min，弃固定液。每个样品用500μlPBS重悬细胞，3500rpm离心5min，洗涤2次。弃上清液，用200μlPBS重悬细胞，吹打均匀，每个样品加800μlPI染液，4℃染色30min。最后，用400目尼龙网将细胞悬液过滤至流式细胞管中，上机检测，用CELLQUEST软件分析实验结果。1.5　统计学分析　实验数据以x±s表示，结果经MircrosoftExcel2000进行统计学处理，并