番茄下胚轴和子叶组织培养和植株再生的研究

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1、番茄下胚轴和子叶组织培养和植株再生的研究郏艳红,王姝(天津市农业生物技术研究中心,天津300192)摘要: 以番茄幼苗的下胚轴和子叶为外植体,研究不同激素培养基对其愈伤组织、不定芽诱导及生根的影响。结果表明:以MS为基本培养基,NAA0.7mg/L浓度时LA2711在6-BA0.7mg/L,Liger在6-BA1.0mg/L浓度时对子叶和下培轴诱导愈伤效果最好;在6-BA2.0mg/L浓度时,LA2711在IAA0.3mg/L,Liger在IAA0.1mg/L条件下分化率最高。关键词:番茄,下胚轴,子叶,愈

2、伤组织。TheStudyofTheTissueCultureandPlantletRegenerationfromHypocotylsandCotyledonofTomatoJIAYan-hong,WANGShu(TianjinResearchCenterofAgricultureBiotechnology,Tianjin300192,China)Abstract: Withhypocotylsandcotyledonoftomatoseedlingsastheexplants,theeffectsofme

3、diumswithdifferenthormoneoncallus,adventitiousbudinduction,androotingoftheexplantswerestudied.Theresultsshowedthatit’seffectwasthebestthatusing0.7mg/L6-BAconcentrationand1.0mg/L6-BAconcentrationinductedcallusofhypocotylsandcotyledonofLA2711tomatoandLigerto

4、matoinMSmediumwithNAA0.7mg/L.In2.0mg/L6-BAlevel,it’seffectwasthebestthatusing0.3mg/LIAAlevelinducteddifferentiationofLA2711tomato,andit’seffectwasthebestthatusing0.1mg/LIAAlevelinducteddifferentiationofLigertomato.Keywords:Tomato;Hypocotyls;Cotyledon,tissu

5、eculture.番茄(LycopersiconesculentumMill)是一种营养价值高、栽培面积广的果菜两用蔬菜,其中含有的番茄红素具有抗氧化及抗衰老等功能。番茄是最早进行基因转化研究的高等植物之一。番茄根、茎、叶、花药和胚等器官进行离体培养均获得再生植株[1-4],在分子生物学及基因工程研究中广泛应用。番茄在组织培养中的植株再生能力与番茄的基因型、外植体类型以及培养基中添加的激素等因素密切相关。我们以番茄LA2711和Liger为材料,以子叶和下胚轴为外植体,筛选其再生体系。1试验材料和方法1.1

6、诱导无菌苗作者简介:郏艳红(1976-),女,山东济宁人,助理研究员,硕士,主要从事番茄分子育种及耐盐方面的研究。资助项目:天津市农业科技成果转化项目,08ZHNZNC03900以番茄LA2711和Liger为材料,挑选饱满的番茄种子,用75%酒精灭菌30s,分别用0.1%的升汞和4%的次氯酸钠灭菌,无菌水冲洗3次。番茄种子放入1/2MS+3%蔗糖固体培养基中恒温培养,光照16h,2000-3000lx,温度(25±1)℃。1.2愈伤组织诱导番茄苗生长一周后,取两片子叶完全展开的无菌苗,以子叶和下胚轴为外植

7、体,将子叶横切为三部分,下胚轴为0.5cm。愈伤组织诱导培养基MS+6-BA(0.7、1.0、1.5mg/L)+NAA(0.7、1.0、1.3mg/L)+3%蔗糖,pH6.0。光照16h,2000-3000lx,温度(25±1)℃。20天后统计出愈率。出愈率=产生愈伤组织的外植体块数/接种总外植体块数×100%。1.3分化培养取子叶和下胚轴(0.5cm)接种至分化培养基上,分化培养基MS+6-BA2.0mg+IAA(0.1、0.2、0.3mg/L)+3%蔗糖,PH6.0,光照16h,2000-3000lx,

8、温度(25±1)℃。20天后统计不定芽的诱导率。不定芽的诱导率=分化出不定芽的愈伤组织数/接种总外植体数×100%。1.4生根培养取长至4-5叶的番茄苗,移植到生根培养基上,生根培养基:MS+IBA(0.1、0.2、0.3mg/L)+3%蔗糖,pH6.0。光照16h,2000-3000lx,温度(25±1)℃。2结果分析2.1消毒液对种子发芽的影响表1消毒液对种子发芽率的影响消毒方法处理时间出苗时间发芽率污染率7

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