资源描述：
《脂质体介导转染n2a细胞的优化方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、脂质体介导转染N2a细胞的优化方法赵云鹤1，王若楠2，杨桂姣1，陆 利11山西医科大学人体解剖学教研室，山西省太原市 030001；2山西医科大学七年制临床医学系，山西省太原市 030001OptimizationofN2acelltransfectionmediatedbyliposomeZhaoYun-he1,WangRuo-nan2,YangGui-jiao1,LuLi11DepartmentofAnatomy,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,S
2、hanxiProvince,China;2Seven-yearProgramofClinicalMedicine,ShanxiMedicalUniversity,Taiyuan030001,ShanxiProvince,China摘要 背景：阳离子脂质体介导的细胞转染具有结果可靠、可重复性强的特点，但面临一个共同的缺点，就是转染效率常较低。目的：探讨阳离子脂质体转染N2a细胞(小鼠神经胶质瘤细胞)的优化方法。方法：采用24孔培养板，1.5μL阳离子脂质体Lipofectamine™LTX介导，通
3、过贴壁法和悬浮法，将500ng带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组质粒pcDNA3-GFP转入N2a细胞，倒置荧光显微镜观察细胞内绿色荧光蛋白表达情况，并比较二者转染效率。采用悬浮转染法，将500ng质粒DNA分别用1.0，1.5，2.0，2.5μLLipofectamine™LTX进行转染，探讨最适脂质体和DNA比例。结果与结论：1.5μL脂质体/500ngDNA，悬浮法转染效率显著高于贴壁法转染效率(P<0.01)；1.0，1.5，2.0，2.5μLLipofectamine™LTX对500
4、ng质粒DNA的转染效率分别为(76.60±3.85)%，(80.00±4.17)%，(88.00±5.89)%，(54.96±4.23)%，提示脂质体2.0μL与质粒DNA500ng的转染效率最高。中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建；骨细胞；软骨细胞；细胞培养；成纤维细胞；血管内皮细胞；骨质疏松；组织工程全文链接：窗体顶端关键词：组织构建；组织工程；脂质体；贴壁转染；悬浮转染；N2a细胞；绿色荧光蛋白； locatedintheTomb,DongShenJiabang,deferth
5、enextdayfocusedontheassassination.Linping,Zhejiang,1ofwhichliquorwinemasters(WuzhensaidinformationisCarpenter),whogotAfewbayonets,duetomissedfatal,whennightcameAbstract：BACKGROUND:Cationicliposome-mediatedcelltransfectionisreliableandrepeatable.Howev
6、erthetransfectionefficiencyisoftenlow.OBJECTIVE:TostudytheoptimizedmethodsforgenetransfectionmediatedbyliposomeintoN2acells(mouseneuroblastmacells).METHODS:Usingtraditionaladherentmethodandimprovedsuspensionmethod,500ngrecombinantplasmidpcDNA3-GFPcar
7、ryinggreenfluorescenceproteinwastransfectedintoN2acellsin24-wellcultureplate,whichwasmediatedby1.5μLLipofectamine™LTXReagent.Theexpressionofgreenfluorescentproteinwasobservedbyinvertedfluorescencemicroscope,andthetransfectionefficienciesatdifferenttr
8、ansfectionwayswerecalculated.Byusingimprovedsuspensiontransfectionmethod,500ngplasmidDNAwastransfectedwithdifferentdosesofLipofectamine™LTXReagent(1.0,1.5,2.0,2.5μL).TheoptimalratioofliposomeandDNAwasexplored.RESULTSANDCONCLUSION:Thetransfectioneffic
