脂质体介导的cho细胞转染——脂质体介导的基因真核细胞转染 毕业论文

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1、脂质体介导的CHO细胞转染——脂质体介导的基因真核细胞转染专业：生物工程专业班级：2008级二班姓名：摘要31CHO细胞是中国仓鼠卵巢细胞，是目前生物工程上广泛使用的细胞系。真核细胞中CHO细胞是目前重组糖基蛋白生产的首选体系。外源基因进入细胞主要有四种方法：电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。脂质体是磷脂分散在水中时形成的脂质双分子层，又称为人工生物膜。根据膜的融合及内吞作用，可用作外源物质进入细胞的载体。在对生物大分子的传递过程中，脂质体是十分有效的载体，无论对微生物还是对植物细胞或对哺乳动物细胞导入外源DNA，脂质体

2、的包裹都能对抗核酸酶的消化。脂质体的制备主要有超声波法、磷脂酰丝氨酸Ca2+离子融合法和逆相蒸发等，用超声波法可制备的单层或多层脂质小体能向细胞内引入的物质量少，故常用后两种方法制备大的脂质体。脂质体介导转染法的改进方法包括促进转染的脂类、增加转染效率的添加剂、DNA与脂质体最佳比率的确定。本实验将携带绵羊P基因的绿色荧光蛋白真核表达载体转入中国仓鼠卵巢细胞，得到稳定表达绵羊PrP基因的CHO细胞系。得出外源导入CHO的绵羊PrP可以在CHO中稳定表达的结论。关键词：CHO细胞、脂质体、转染Abstract31CHOcellsof

3、Chinesehamsterovarycells,biologicalengineeringiscurrentlywidelyusedcelllines.EukaryoticcellsinCHOcellsiscurrentlyrestructuringglycosylproteinofchoicefortheproductionsystem.Exogenousgenesintocellsmainlyhasfourkindsofmethods:electricshockmethod,calciumphosphateandmediat

4、edbyliposomeandvirusmediatedmethod.Liposomeisaphospholipiddispersedinwaterisformedwhenthelipidbilayer,alsoknownastheartificialbiologicalmembrane.Accordingtothemembranefusionandendocytosis,canbeusedasexogenoussubstancesintothecellcarrier.Onbiologicalmacromoleculesinthe

5、transferprocess,liposomesareveryeffectivecarrier,regardlessofthemicroorganismorplantcellormammaliancellsforintroducingexogenousDNA,liposomeencapsulatedcanagainstnucleasedigestion.Preparationofliposomesareultrasonicmethod,phosphatidylserineCa2+ionfusionmethodandreverse

6、phaseevaporation,usingultrasonicmethodtopreparemonolayerormultilayerlipidglobulestointracellularintroducedmassisless,socommonlyusedtwomethodsforpreparationoflargeliposomes.Liposomemediatedtransfectionmethodimprovementmethodsincludepromotingtransfectionlipids,increasei

7、ntransfectionefficiencyadditives,DNAandliposomebestratedetermine.ThisexperimentwillcarrysheepPgenegreenfluorescentproteineukaryoticexpressionvectorwastransfectedintoChinesehamsterovarycells,stableexpressionofPrPgeneinsheepintheCHOcellline.DrawforeignimportCHOsheepPrPc

8、anCHOstableexpressionoftheconclusion.Keywords:CHOcells,liposomes,transfection分享到翻译结果重试抱歉，系统响应超时，请稍后再试·支持中英、中日在线互译·支持网页翻译，在输入