肾实质性高血压insr基因第8外显子多态性分析论文

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1、肾实质性高血压INSR基因第8外显子多态性分析论文【关键词】高血压［摘要］目的探讨肾实质性高血压胰岛素受体（INSR）基因第8外显子多态性，试图从遗传角度寻求病因。方法采用多聚酶链反应（PCR）和限制性内切酶片段长度多态性分析（RFLP）的方法对38例肾实质性高血压肾功能正常者(RHNRF)、45例肾实质性高血压肾衰竭者(RHCRF)及38例正常血压者(NC)全血INSR基因第8外显子NsiⅠ多态性进行分析检测。结果未发现中国人肾实质性高血压INSR基因第8外显子NsiⅠ多态性改变，两病人组N2等位基因频率与正常对照组比较无显

2、著性差异（χ2=0.06、0.08，P0.05）。结论INSR基因第8外显子NsiⅠ多态性与中国人肾实质性高血压无关，N2等位基因并非其易感基因。［关键词］高血压，肾性；肾衰竭，慢性；受体，胰岛素；聚合酶链反应；限制性片段长度多态性［ABSTRACT］ObjectiveToinvestigatetherelationshipbetorphismofinsulinreceptor(INSR)geneExon8andtheetiologyofrenalhypertension.MethodsPolymerasechainreact

3、ion(PCR)binedentlengthpolymorphism(RFLP)orphismofINSRgeneExon8in38renalhypertensivepatientsalrenalfunction(RHNRF),45patientsplicatedbychronicrenalfailure(RHCRF)and38normalcontrols(NC).ResultsNopolymorphismofNsiⅠinINSRgeneExon8orphismofINSRgeneExon8hasnorelationerase

4、chainreaction;restrictionfragmentlengthpolymorphism高血压病人中由肾脏病引起者约占10%.freelmol/L，Cr＞445μmol/L。1.1.3正常对照（NC）组38例，男20例，女18例，年龄27~60岁，平均（42.9±8.7）岁。收缩压＜18.67kPa，舒张压＜12.00kPa，排除肾脏疾病及糖尿病，亦无高血压、肥胖及糖尿病家族史。1.2方法1.2.1临床及生化检查病人均询问病史，测量血压、身高及体质量，计算体质量指数（BMI）；取空腹静脉血，用自动生化仪测定肾功能

5、及血脂情况。1.2.2INSR基因第8外显子多态性测定①DNA提取：取静脉全血5mL，用100g/LEDTA抗凝，采用美国Promega公司提供的DNA提取试剂期徐岩，周海燕，马瑞霞肾实质性高血压INSR基因第8外显子多态性分析59盒提取DNA。②PCR反应：引物设计参照文献［2］方法，由上海生物工程研究所合成。上游引物序列：5′CGGTCTTGTAAGGGTAACTG3′，下游引物序列：5′GAATTCACATTCCCAAGACA3′。PCR反应体系25μL（DNA模板150ng、dNTP200mol/L、上下游引物分别为2

6、0pmol、10×Buffer2.5μL、MgCl22.5μL、TaqDNA聚合酶1U），PCR反应条件为：94℃预变性3min；然后94℃30s，55℃30s，72℃1min，共35个循环；最后72℃延伸5min。③酶切：取PCR产物20μL用限制性内切酶NsiⅠ进行酶切，酶切产物经20g/L琼脂糖凝胶电泳，紫外线显影、摄片。1.2.3统计学处理采用SPSS10.0for,BELLGI.Humaninsulinreceptorgene:partialsequenceandamplificationofexonsbypolym

7、erasechainreaction［J］.JDiabetes,1990,39:123.［3］MORRISAD,.freelorphismusingthepolymerasechainreaction［J］.JNucleicAcidResearch，1991,18:5923.［5］SCHRADERAD,ZEERYL,MORRISBJ,etal.AssociationanalysisofNsiⅠRFLPofhumaninsulinreceptorgeneinhypertensives［J］.JClinicalGeics，1996

8、,49:74.［6］林从容，吴可贵，谢良地，等.胰岛素受体基因第8外显子多态性与原发性高血压病的关系［J］.高血压杂志，1999，7（4）：314.［7］林从容，吴可贵，谢良地，等.胰岛素受体基因第8外显子NsiⅠ多态性与中国人高血压［J］.中华医学遗传学杂志，2000，17