各类葛根中葛根素的成份分析

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1、从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果各类葛根中葛根素的成份分析摘要:目的建立不同品种葛根中葛根素及总黄酮的含量测定方法。方法采用RP-HPLC法,以甲醇-水为流动相,检测波长为250nm测葛根素含量;紫外分光光度法测柴葛、粉葛中总黄酮含量。结果葛根素峰分离度提高,峰形改善;葛根素~μg范围内与峰面积线性关系良好,回收率为%(n=5),精密度RSD=%。总黄酮浓度在~μg/ml范围内与吸收度线性关系良好;流速1ml/min;检测波长250nm;柱温22℃;进样体积

2、10μl。理论板数按葛根素峰计算不低于5000。在该色谱条件下,样品中的葛根素与其它峰均能达到基线分离,保留时间在min左右。.对照品溶液的制备精密称取葛根素对照品,甲醇定容于25ml量瓶。分别移取,,,于5ml量瓶,水定容,与原液共同作为HPLC用对照品溶液。.供试品溶液的制备热回流提取法:精密称取柴葛、粉葛粉末各,置具塞锥形瓶中,精密加入30%乙醇50ml,称重。回流提取30min,放冷,称重并以30%乙醇补足减失重量,摇匀过滤,取续滤液为供试品,待测。索氏提取法:称取柴葛、粉葛粉末各,精密称定,以甲醇为提取剂提取4h,过滤,浓缩提取液并用甲醇定容于10

3、ml量瓶。超声处理30min,取上清液以水定容于10ml量瓶,待测。课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果.线性关系考察取对照品溶液,按照色谱条件进样10μl,葛根素进样量X(μg)为横坐标,以峰面积Y为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为:Y=×106X+×104,r=。结果表明,葛根素进样量在~μg范围内与峰面积线性关系良好,可用外标两点法计算含量。.精

4、密度考察在色谱条件下,吸取同一对照品溶液10μl,连续进样5次,测得峰面积,RSD=%,表明进样与峰面积积分的精密度良好。.重复性考察取同一批柴葛、粉葛样品5份,按外标法计算含量,RSD=%,表明分析方法重复性良好。中国.稳定性考察精密吸取对照品溶液10μl,分别在0,1,2,4,8,12,24,48h时进样,在色谱条件下测定峰面积,其RSD值为%。表明葛根素在室内正常条件下48h内稳定,因此整个实验过程可以在常温不避光的条件下操作。.回收率考察精密称取已知葛根素含量的同一样品药材粉末5份,20mg/份,精密称定后,每份加入浓度为/ml的对照品溶液~ml,按

5、“供试品溶液制备”项下操作,精密吸取10μl,进样,计算回收率。中国编辑。.样品测定按“供试品溶液制备”项下操作,制备各样品溶液,精密吸取10μl,进样,在所选色谱条件下测定,外标两点法计算含量。.2紫外分光光度法测定葛根中总黄酮含量课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果.线性关系考察精密称取葛根素对照品,甲醇定容于25ml量瓶。移取,,,,置于10ml

6、量瓶,水定容,为紫外测总黄酮用对照品溶液。以溶液浓度为横坐标,吸收度为纵坐标,得线性方程:Y=+,r=。表明总黄酮浓度在~μg/ml范围时与吸收度线性关系良好。.供试品制备方法1:分别称取柴葛、粉葛,置于圆底烧瓶,乙醇回流提取3次,40ml/次,时间均为1h。合并3次滤液并浓缩置25ml量瓶,乙醇定容。取1ml用乙醇定容于100量瓶,再取1ml上清液于10ml量瓶,水定容,待测。以1ml乙醇加水定容于10ml量瓶中为空白对照。方法2:取上述液相用索氏提取法制得的待测品,置于10ml量瓶,水定容,待测。.吸收波长考察与样品测定在200~800nm间紫外扫描浓度

7、为μg/ml的葛根素对照品溶液。在249~251nm处有最大吸收,选用250nm测定。分别测定两种方法制得4个样品。讨论课题份量和难易程度要恰当,博士生能在二年内作出结果,硕士生能在一年内作出结果,特别是对实验条件等要有恰当的估计。从本学科出发,应着重选对国民经济具有一定实用价值和理论意义的课题。课题具有先进性,便于研究生提出新见解,特别是博士生必须有创新性的成果HPLC法对不同产地的柴葛、粉葛中的葛根素的含量进行了测定,表明柴葛中葛根素含量约为粉葛的3倍,紫外测总黄酮含量表明,柴葛中葛根素量占总黄酮量的55%左右,粉葛中葛根素量占其总黄酮量的48%左右。同

8、时比较了不同提取方法对葛根素和总黄酮含量测定的影响,

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