ages对人神经母细胞瘤细胞的毒性作用与其机制的初步研究

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1、重庆医科大学硕士研究生学位论文THEEFFECTSoFADVANCEDGLYCATIoNENDPRoDUCTSoNHUMANNEURoBASToMACELLLINESH.SY5YANDITSMECHANISMABSTRACTobjective:Toinvestigatetheeffectofagedglycationendproducts(AGEs)onthegrowthstateandtheexpressionofp-amyloidproteinincultredSH-SY5Ycell,furthertoexplorethemechanismoftox

2、icityofAGEsonSH-SY5Y.Tostudytheeffectionofa--lipoicacidonthetoxicityofAGES.Methods:Advancedglycationend-productswerepreparedbyincubationofbovineserumalbumin(BSA)withglucosefor90days.TheculturedSH-SY5Ycellsweredividedintofivegroupsrandomly.Thefirstgroup.thecellsweretreatedbydiffer

3、entconcentrationsofBSA(0、20、40、80、160、320ug/m1)for48hours.Thesecondgroup,thecellsweretreatedbydifferentconcentrationsofBSA(0、20、40、80、160、320ug/m1)for48hoursThethirdgroup.thecellswereinterventedbyconcentrationsofa-LAfor30minutesbeforetreatedbyAGE—BSAof160ug/mlfor48hours.Thefourth

4、group.thecellswereinterventedbyQ·LAofO.1g/1for30minutesbeforetreatedbyAGE—BSAof80ug/mlfor48hours.Thefifthgroupwasthenormalcontrolgroup.toexaminethecells’growthstatewithMTT5重庆医科大学硕士研究生学位论文metabolicrate,LDHleakagerate,andtheaxonallength.ToexaminetheexpressionlevelofAPPmRNAandRAGEmR

5、NAbyRT-PCR.ToexaminetheproteinexpressionofABinSH-SY5YcellsbycellularinmmunohistochemistryResults:(1)Comparingwiththecontrolgroup,treatmentwithconcentrationsofBSAfor48hours,therewerenodifferenceinMTTmetabolicrate,LDHleakagerateandtheaxonallength.therewerenodifferenceoftheexpressio

6、nofA13protein,theexpressionofAPPmRNAandRAGEmRNAinSH—SY5Ycellsbetweenthetreatedgroupandthecontrolgroup.(2)ComparingwiththeBSAgroup,treatmentwithconcentrationsofAGE.BSA48hours,(>40ug/m1)MTTmetabolicratereducedsignificantly,LDHleakagerateincreasedsignificantly,theaxonallengthshorten

7、edsignificantly.therewerenodifferenceoftheexpressionofAPPmRNAinSH·SY5Ycellsbetweenthetreatedgroupandthecontrolgroup.TheexpressionofRAGEmRNAintreatedgroupsincreasedsignificantly.theexpressionofA13proteinincreasedsignificantlycomparedtocontrolgroup.(3)ComparedwiththeAGE—BSA(160ug/m

8、1)group,c【一LAof0.1g/1inhibitedthetoxicit

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