紫花牡荆素对宫颈癌hela细胞凋亡及dapk基因的影响

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1、分类号密级UDC编号硕士学位论文紫花牡荆素对宫颈癌HeLa细胞凋亡及DAPK基因的影响研究生姓名：赵霞指导教师姓名、职称：陈忠东教授学科、专业名称：妇产科学研究方向：妇科肿瘤学2012年5月万方数据南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人

2、承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以编入有关数据库进行检索，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：导师签名：年月日年月日2万方数据目录一、中文摘要……………………………………………………1二．英文摘要……………………………………………………2三．正文1．前言……………………………………………………

3、……42．实验设计……………………………………………………83．材料与方法…………………………………………………214．实验结果……………………………………………………275．讨论…………………………………………………………316．结论…………………………………………………………32四．参考文献……………………………………………………34五．附录…………………………………………………………35六．综述…………………………………………………………42七．成果目录……………………………………………………43八．致谢…………………………………………………

4、………44万方数据紫花牡荆素对宫颈癌HeLa细胞凋亡及DAPK基因的影响硕士研究生：赵霞导师：陈忠东教授中文摘要目的探讨紫花牡荆素（casticin）对宫颈癌HeLa细胞凋亡及DAPK基因甲基化以及DAPK蛋白表达的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞，AnnexinV-PI染色流式细胞术定量分析细胞凋亡率；DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞DNA断裂；基因甲基化特异性PCR检测DAPK基因甲基化状态；Westernblotting检测DAPK蛋白表达。结果Annexin-V/PI双染流式细胞术结果表明：casticin诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡百分率

5、增高(P＜0.05)，且呈时间和剂量依赖性。DNA琼脂糖凝胶电泳发现：casticin可以诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡产生DNA核小体间断裂的梯形条带。基因甲基化特异性PCR检测DAPK基因甲基化状态结果表明，casticin可以显著降低宫颈癌HeLa细胞DAPK甲基化程度(P＜0.05)。Westernblotting分析结果显示，casticin有效上调DAPK蛋白表达(P＜0.05)。结论1.紫花牡荆素诱导宫颈癌HeLa细胞凋亡；2.紫花牡荆素有去宫颈癌HeLa细胞DAPK基因甲基化；3.紫花牡荆素上调DAPK蛋白表达水平。关键词：紫花牡荆素；

6、宫颈癌；凋亡；DAPK；甲基化。1万方数据EffectsofcasticinonapoptosisandmethylationofDAPKgeneincervicalcancerHeLacellsAbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofcasticinonapoptosis,methylationofDAPKgeneandexpressionofDAPKproteinofhumancervicalcancerHeLacellsinvitroMethodsHeLacellswereculturedinvitr

7、o.Toquantitativelyassesstherateofapoptosis,AV-PIstainingwasconducted.DNAagarosegelelectrophoresiswasusedtoobserveDNAladderofapoptosiscells.ToassessthemethylationstatusofDAPKgene,methylation-specificPCRwasconducted.WesternblotwasperformedtomeasuretheDAPKproteinexpressionlevel..

8、ResultDataofflowcytometryofAnnexin-V/PIdoublestainingdemonstr