黄芩苷酸解制备黄芩素纯化分离工艺的研究

《黄芩苷酸解制备黄芩素纯化分离工艺的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、第3章黄芩苷酸解制备黄芩素纯化分离工艺的研究3.1引言黄芩素（Baicalein）：又名黄芩苷元，黄芩元，黄芩黄素，5，6，7-三羟基黄酮。其分子式为，分子量为270.24，结构如下图所示：纯黄芩素为黄色棱柱状结晶(由乙醇中)。溶于乙醇、甲醇、乙醚、丙酮、醋酸乙酯、热冰醋酸，微溶于氯仿和硝基苯，几乎不溶于水，溶于稀氢氧化钠呈绿棕色，浓硫酸中呈黄色并显绿色荧光。存在于唇形科植物黄芩(ScutellariabaicalensisGeorgi)的根、紫葳科植物木蝴蝶[Oroxylumindicum(L.)Vent.]的种子、茎皮中，也可化学合成。3.2实验材料、仪器、药品3.2.1实验原料从

2、黄芩根中提取得到的黄芩苷作为原料。3.2.2实验所需的试剂试剂生产厂家黄芩素标准品（>98%）阿拉丁试剂（中国）有限公司无水乙醇（分析纯）天津市大茂化学试剂厂甲醇（分析纯）天津市凯通化工有限公司硫酸山东莱阳市双双化工有限公司乙酸乙酯天津市凯通化工有限公司氯仿天津市凯通化工有限公司乙醚天津市凯通化工有限公司3.2.3实验仪器仪器及设备型号生产厂家数显恒温水浴锅HH-2国华电器有限公司旋转蒸发仪RE-3000A上海亚荣生化仪器厂数控超声波清洗器KQ5200DE昆山市超声仪器有限公司三用紫外灯UV-Ⅱ北京智源通生物技术研究所紫外分光光度计U-2001日本日立公司循环水式多用真空泵SHZ-D(

3、Ⅲ)天津华鑫仪器厂电热恒温鼓风干燥箱DHG-9053A上海市实验仪器总厂高效液相色谱分析仪Surveyor美国Finnigan托盘天平HC-TP11-1O上海清科天平电子天平AL204梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司常规玻璃仪器3.3实验方法3.3试验方案首先以中药黄芩根部为原料提取黄酮类化合物，经乙醇水溶液热回流得黄酮类化合物提取液，再用酸沉碱溶法纯化出黄芩苷，再分别用水，５０％，９５％的乙醇洗涤得高纯度黄芩苷；将黄芩苷酸水解得黄芩素，分别探讨不同条件下的酸解效果并分析得出最佳酸解工艺条件，用不同极性的溶剂萃取得高纯度黄芩素。3.４可行性分析实验所用到的黄芩原料及各环节的药品已储备

4、，而且各种相应仪器设备（包括数显水浴锅、油浴锅、真空循环水泵等）和技术条件均已具备。本研究通过乙醇热回流提取总黄酮，酸沉碱溶法分离纯化，方法简单，乙醇易于回收再利用，易于实现工业化。从黄芩根部提取黄芩苷酸水解制备黄芩素，并对黄芩素进行纯化。综上，通过对大量文献的查阅，并借助于实验室已具备的设备，完成本实验的每一个过程，最终的目标是能够实现的，本实验方案是可行的。3.3.1黄芩苷酸解基本原理利用黄芩素与黄芩苷结构相似的特点及黄芩苷在强酸、加热条件下不稳定易水解生成黄芩素和葡萄糖醛酸的性质进行反应。图3.1、黄芩苷酸解制备黄芩素的反应式3.3.2黄芩素提取纯化分离的工艺流程图准确称取一定质

5、量的黄芩苷，并按一定的固液比加入酸，乙醇，去离子水，在水浴锅中设定好反应时间和温度加热回流。用薄层色谱（TLC）跟踪反应进程（展开剂为：乙酸乙酯/丁酮/乙酸/水=10/7/5/3,体积比），待反应完成后将反应液倾入一定体积的去离子水中，有浅黄色析絮状沉淀出，静置若干小时后，减压抽滤，取滤饼，用蒸馏水洗至中性，干燥，即得到黄芩素粗品。本实验采用无毒，价廉的溶液作为反应物及催化剂，首先通过单因素实验考察各因素对总黄酮含量的影响，然后采用正交试验进行工艺优化，确定最佳的工艺参数。其次在选用一定的有机溶剂对得到的黄芩素粗品进行萃取纯化，得到纯度较高的黄芩素，其工艺流程图如图3.1所示。薄层色谱

6、跟踪乙醇水溶液+酸黄芩苷析出黄色沉淀反应液倾入去离子水减压浓缩静置去离子水洗至中性干燥黄芩素粗品图3.1黄芩苷酸解制备黄芩素工艺流程图3.3.3.黄芩素总黄酮含量的测定及计算以黄芩素标准品为对照，采用采用紫外/可见分光光度计测定黄芩素中的总黄酮含量。将反应得到的黄芩素粗品精密称取1.0mg，用甲醇溶解并定容至50ml的容量瓶中，加甲醇至刻度即得，在吸收波长272nm条件下测定吸光度。根据下列公式计算总黄酮得率：总黄酮得率=（浸膏质量×总黄酮含量）/原料质量×100%3.3.4黄芩素的分析方法3.3.4.1定性分析试验中采用薄层层析（TLC）法对黄芩苷进行定性鉴定，其方法为将标准品及样品

7、配成合适浓度的甲醇液，用点样毛细管点样，点3~4次，保证点样斑点直径不大于2mm。将点样好的硅胶板下端浸入展开剂中上行展开。展层完毕后，取出硅胶板晾干，在三用紫外灯下观察对比显色及展开情况。3.3.4.2定量分析3.1测定波长的确定准确取黄芩素标准品0.1mg加甲醇溶解，稀释至50ml容量瓶中，置于紫外/可见分光光度仪中，在200~600nm扫描，绘制紫外吸收光谱，其中max=262nm、335nm分别为黄酮的吸收峰。黄芩素在272nm处有最大