dads上调mir-7靶向xiap抑制人胃癌细胞增殖和侵袭

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1、ｗｍ分类号Ｒ３密级公开：６１０学校代码１０５５５ＵＤＣｍＭ义＠Ｉ義＃拿，化学位论文（学术学位）＂＊ＤＡＤＳ上调ｍ化－７艳向ＸＩＡＰ抑制人胃癌细胞增殖和侵袭＾研究生姓名：刘芳，‘＾―指导教师、职称：文格波教授ｍｍｕ学科专业：基础医学研究方向：恶性肿瘤的发病分子机制及防治研究所在学院：医学院－－二〇￡＿十二月ｍｈｉＢ年论文题目DADS上调MiR-7靶向XIAP抑制人胃癌细胞增殖和侵袭论文作者签名:指导教师签名:论文评阅人1：吴晓英，教授，博导，中南大学评阅人2：徐长庆，教授，博导

2、，哈尔滨医科大学评阅人3：杨惠玲，教授，博导，中山大学答辩委员会主席：周智广，教授，博导，中南大学委员1：刘振启，教授，博导，中南大学委员2：李灼日，教授，博导，海南省人民医院委员3：姜志胜，教授，博导，南华大学委员4：甘润良，教授，博导，南华大学委员5：曹仁贤，教授，硕导，南华大学委员6：刘江华，教授，硕导，南华大学答辩日期：2015年12月08日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单

3、位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博/硕）士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入

4、《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：年月日导师姓名：年月日中文摘要DADS上调miR-7靶向XIAP抑制人胃癌细胞增殖和侵袭摘要：胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，严重危害人类的健康和生命。随着社会经济发展与生活水平的提高，在欧美等发达国家其发病率和死亡率呈明显下降趋势，然而在亚洲、拉丁美洲仍然高发。由于其发病机制非常复杂，其预后仍不容乐观。二烯丙基二硫（

5、diallyldisulfide，DADS）是大蒜中的脂溶性有效成分，可抑制多种肿瘤发生发展。我们前期研究证实，DADS能在体内外抑制人胃癌细胞增殖，其机制与G2/M期阻滞、p38激活、ERK抑制及其他多条信号转导通路异常有关。MicroRNAs是一类小分子非编码RNA，近年研究表明，其与胃癌的关系密切，参与胃癌的发生发展，在胃癌的增殖、侵袭和转移等过程中发挥了重要作用。miR-7是23个核苷酸miRNA，在多种肿瘤中低表达，具有潜在的抑瘤功能。XIAP（X-linkedinhibitorofapoptosis）作为凋亡抑制因子家族（inhibitorofapoptosi

6、sprotein，IAP）成员之一，在肿瘤发生发展中起着癌基因作用，与肿瘤发生、发展、凋亡、迁移、侵袭和转移密切相关。I南华大学博士学位论文我们前期采用miRNA芯片技术筛选DADS处理人胃癌细胞的差异miRNA表达，发现DADS处理后人胃癌细胞miR-7明显上调。同时，qRT-PCR验证miR-7在胃癌组织与胃癌细胞株中显著下调。蛋白质组学发现XIAP等24种差异表达的蛋白质，并验证显示，多株人胃癌细胞XIAP高表达，而DADS处理胃癌细胞后，XIAP明显下调。本实验分三部分探讨miR-7和XIAP对人胃癌细胞增殖侵袭的影响及二者相互关系。第一部分：DADS上调miR-

7、7抑制人胃癌细胞增殖和侵袭目的：探讨DADS和miR-7对人胃癌细胞增殖和侵袭的影响。方法：构建miR-7高表达和沉默病毒载体，通过细胞转染，建立miR-7稳定高表达和沉默的SGC-7901和HGC-27细胞系，同时各组细胞经30mg/lDADS处理，然后采用qRT-PCR、CCK-8、平板克隆、流式细胞术、划痕实验、迁移实验、侵袭实验和裸鼠移植等分析DADS和miR-7对胃癌细胞增殖和侵袭的作用。结果：qRT-PCR证实成功构建miR-7稳定高表达和沉默的SGC-7901和HGC-27细胞系，且DADS能上调各组细胞miR-