昆明汉族维生素d受体基因多态性与2型糖尿病及糖尿病骨质疏松相关性研究

《昆明汉族维生素d受体基因多态性与2型糖尿病及糖尿病骨质疏松相关性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

专业学位硕±学位论文单位代码；１０６７８分类号：Ｒ５８７．１学号：２０１２４９０密级：尾略（｜种太常硕壬学位论文＆Ｅ明汉族维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病及糖尿病骨质疏松相关性研究院系一（）、所屋明医科大学第临床医学院硏究生姓名杜思成学科、专业内科学（内分泌及代谢）学位类型专业学位指导教师杨秋萍教授二〇—五年五月 尾略ｉｌ种太净硕±学位论文昆明汉族维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病及糖尿病骨质疏松相关性研究研究生姓名杜思成学科、专业内科学）（内分泌及代谢申请学位类型专业学位指导教师杨秋萍教授完成日期二〇—五年五月 尾略ｓ种Ａ常研巧生学位论文研巧撰写声明本人郑重声明：本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位课题研究所取得的研究成果。论文中除特别加Ｗ标注和致谢的地方外，不包含他人或其他机构己经发表或撰写过的研究成果。对本研究和论文做过贡献的同道我均在论文中作了明确的说明并表明谢意。该学位论文资料若有不实之处，本人愿承担一切相关责任。￣论文作者（签名Ｘ占年１月＞曰白堯略Ｓ种Ａ嗦研究生学位论文版权用户许可证书本学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。学校可公布论文的全部或部分内容（确属保密内容己注明，并在解密后遵守此规定）；学校可采用影印、缩印或其他手段保存本学位论文。学位论文作者（签名指导教师（签名）；。年怎月立（）曰１皆年Ｉ月Ｈ曰＂本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盘版）电＂子杂志社进行电子和网络出版，并编入ＣＮＫＩ系列数据库，传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。学位论文作者（签名）ｒ＾指导教师（签名）；《苗三口＾年Ｓ月玉（）曰使年反月Ｊ曰谷 目录中英文缩略语对照表１中文摘要３前胃９一第部分云南昆明地区汉族人群维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病相关性ｍ％１１１．对象和方法１１２．躲１６３．職１９第二部分昆明地区汉族人群２型糖尿病患者维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松症的相关性研巧２２１．对象和方法：２２２．錦２６３．ｉｔｉ３０ｔ结论３３参考文献３４综述３９发表论文和参加科研情况４８致谢４９ 昆明医科大学硕±研究生学位论文中英文缩略语对照表英文缩写英文全名中文全名Ｔ２ＤＭＴｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅＵｉｔｕｓ２型糖尿病ＯＰＯｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ骨质疏松症ＤＰＤｉａｂｅｔｉｃｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ糖尿病性骨质疏松ＶＤ民ＶｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒ维生素Ｄ受体ＢＭＩＢｏｄｍａｓｓｉｎｄｅｘ体重指数ｙＨｂＡｌｃ％ＧｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄｈｅｍｏｇｌｏｂｉｎＡ１ｃ糖化血纽蛋白百分比ＦＰＧＦａｓｔｉｎｇｐｌａｓｍａｇｌｕｃｏｓｅ空腹血糖ＦＣＰＦａｓ－ｔｎＣｅｔｉｉｇｐｐｄｅ空腹Ｃ肋ＬＤＬ－ＣＬｏｗｏｅｒｏｄｅｎｓｉｔｙｏｒｔｅｉｎＣｈｏｌｅｓｔｌ低密度脂蛋白胆固醇邮ｐ曲也－０ＨｒｔｉｄｅｎｓｉｔｙｌｉｏｏｔｅｉｎＣｈｏｌｅｓｅｒｏｌ高密度脂蛋白胆固醇纯ｐｐ２５０把＞２５－ｈｄｒｏｘｖｉｔａｍＤ２５３３ｙｙｉｎ３疑维生素ＤＢＭＤＢｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙ骨矿物质密度ＤＥＸＡＤｕａＸ－ｌｅｎｅｒｇｙｒａａｂｓｏｒｔｉｏｍｅｔｒ双能Ｘ线吸收测量法ｙｐｙＴＣＴｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌ总胆固醇ＴＧＴｒｉｃｅｒｏＳ酉ｇｌｙｌ甘油！ＳｃｒＳｅｒｕｍｅｒｅ江ｔｉｎｉｎｅ血ＢＵＮＢｌｏｏｄＵｒｅａｎｉｔｒｏｇｅｎ尿素氮ＵＡＵｒｉｃａｃｉｄ原酸ＢＧＰＢｏｎｅｌａｒｏｔｅｉｎ骨巧素ｇｐＰＴＨＰａｒａｔｈｙｒｏｉｄｈｏｒｍｏｎｅ甲状旁腺素ＢＡＬＰＢｏｎｅａｌｋａｌｉｎｅｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ骨碱麟酸酶１ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文ＣＴＣａｌｃｉｔｏｎｉｎ降锡素ＰＩＣＰＰｒｏｃｏｌｌａｇｅｎｔｙｐｅｌｃａｒｂｏｘｙｔｅｒｍｉｎａｌｒｏｅｔｉｄｅＩ型胶原簇基末端前狀ｐｐｐＴＲＡＰＴｔｔ－ｔａｒｒａｅｒｅｓｉｓｔａｎａｃｉｄｈｏｓａｔａｓｅ抗酒石酸酸性鱗酸酶ｐｐｈＰＣ民－ＲＦＬＰＰｏ－ｔ－ｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｒｅｓｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔ聚合酶链反应限制性片段ｍｏｒｓｍｌｅｎｇｔｈｏｌｙｐｈｉ长度多态性ｐＥＬＩＳＡＥｎｚ－ｌｎｋｅｄｙｍｅｉｉｉｍｎｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔａｓｓ巧酶联免疫吸附法２ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文．屢明汉族维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病及糖尿病骨质疏松相关性研究中文摘要第一部分昆明汉族维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病相关性研究目的：探讨昆明地区汉族人群维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病相关性方法－ＦＲＬＰ技术对昆明地区没族９０例２型糖：采用病例对照方法，运用ＰＣＲ尿病患者、％例健康成人维生素Ｄ受体（Ａｐａｌ位点）进行基因型检测，并计算分布频率。同时测量身高、体重，计算体重指数，腰围、臀围，计算腹臀比，自－、动生化分析仪测迅化（：、ＬＤＬＣ、ＦＰＧ、ＰＢＧＴＣ、ＴＧ、ＢＵＮ、Ｓｃｒ、ＵＡ、ＨｂＡｌｃ、２５０ＨＤ３、血清果糖胺、空腹血族岛素及Ｃ肤水平等。比较两组间各指标的差异。结果：（０２型糖尿病组与正常组间维生素Ｄ受体基因多态性的兰种Ａｐａｌ２基因型存在统计学差异切＝５３４拍２．户＜０．００１，型糖尿病组中Ｃ／Ａ基因型分布频，）率明显高于正常对照姐（６２．２％ＶＳ３８．９％），但两组间的Ｃ和Ａ型等位基因无统２＝＝＝＝０９计学差异切２．６１０，户０．１０句。（２）ＡｐａｌＣ／Ａ基因型（ＯＲ１．３６）、年龄（０民１．）２〇民＝为２型糖尿病的危险因素，而５０ＨＤ３（０．８４）可能是Ｔ２ＤＭ的发生的保护因素。结论：（１）昆明地区汉族２型糖尿病人群中ＶＤ民Ａｐａｌ位点Ｃ／Ａ基因型与Ｔ２ＤＭ＝的发生存在相关性（２）２５０ＨＤ３（ＯＲ０．８４）是Ｔ２ＤＭ的发生的保护因素。；２型－关键词糖尿病，；维生素Ｄ受体基因：多态性；聚合酶链反应限制性片段长度多态性第二部分昆明地区没族人群２型糖尿病患者维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松症的相关性研究目的：探讨昆明地区汉族２型糖巧病人群维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松症３ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文（ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，０Ｐ）的关系。方法－ＦＲＬＰ；采用病例对照方法，运用ＰＣＲ技术测定昆明地区汉族２型糖尿病骨量正常患者９０例，３６例健康成人维生素Ｄ受体（Ａｐａｌ位点）基因型进行检测，并计算分布频率。骨密度ＢＭＤ检测，按骨密度检测结果将糖尿病患者分为（）糖尿病骨量正常组５０例及糖尿病骨质疏松组４０例。同时测量身髙、体重，计算，、、体重指数（ＢＭＩ）腰围臀围，计算腰臀比（ＷＨＲ），自动生化分析仪测血ＣａＰ、ＨｂＡｌｃ等。比较组间的差异。采用酶联免疫吸附测定（ＥＬ松Ａ）检测骨巧素’’ＢＧＰ－（）、骨源性碱性磯酸酶（ＢＡＬＰ）、降巧素（ＣＴ）、２５矮维生素Ｄ３（２５０孤３）、甲状旁腺激素（ＰＴＨ）、Ｉ型胶原綾基末段前肤（ＰＩＣＰ）、抗酒石酸酸性磯酸酶（ＴＲＡＰ）。ｌｏｇｉｓｔｉｃ回旧分析讨论糖尿病骨质疏松的影响因素。结果：（１）糖尿病骨质疏松症组Ａ／Ａ基因型分布频率明显高于其他两组（糖尿Ｍ姐＝病骨质疏松组组６６．７％，正常对照组巧．３％，Ｄ０．０％，Ｐ０．００５）；正常组、糖尿病骨量正常组、糖尿病并骨质疏松组等位基因频率无显著差异，最高的均是＝Ｃ等位基因（戶０．０６６）；（２）Ａ／Ａ组中Ｓｃｒ、ＣＴ均显著高于其他组别（Ｐ＜０．０５）；（３）糖尿病骨质疏松组ＢＭ－２５００Ｉ、曲化。ＨＶＤ显著低于其他组别（ｆ＜．０５），糖尿病骨质疏松组年龄、病程、ＨｂＡｌｃ显著高于糖尿病骨量正常組，＜０．０５），＝０糖尿病骨质疏松组空腹血清Ｃ狀（ＦＣＰ）显著低于糖尿病骨量正常組（ｆ．０２１）；正常对照组骨巧素（ＢＧＰ）显著高于其他组别（片０．００１）正常对照组抗酒石酸，＝酸性憐酸酶（ＴＲＡＣＰ）浓度明显低于糖尿病骨量正常及骨质疏松组（户０．０１４）。（４）ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析中：年龄、ＢＭＩ、ＡｐａｌＡ／Ａ、ＢＧＰ、２５０ＨＤ３有统计学差０＝＝＝异（户＜０．５），其中年龄（ＯＲ１．０９９）、ＨｂＡｉｃＯＲ１．１８４）、ＡａｌＡ／Ａ（０民１．７３８）（ｐ＝０＝为骨质疏松发生的危险因素，而ＢＭＩ（ＯＲ．８０４）、ＢＧＰ（Ｏ民０．２１８）、２５０ＨＤ３＝（Ｏ民０．２５２）是骨质疏松发生的保护因素。－Ａ结论：（１）昆明地区汉族２型糖尿病人群中ＶＤＲｐａｌＡ／Ａ基因型与骨质疏松存在相关性一，对骨质疏松的发生有定的预测价值；（２）昆明地区汉族２型糖尿病患者ＢＭＩ、ＢＧＰ、２５０ＨＤ３是骨质疏松发生的保护因素，年龄、ＨｂＡＣ是ｉ骨质疏松症发病的危险因素。关键词糖尿病，２型生素Ｄ受体基因症；维；骨质疏松；多态性；聚合酶链反应－限制性片段长度多态性４ 昆明医科大学硕止研巧生学位论文Ｔｈｅ＾ａｓｓｏｃｉａｔｉｏ打ｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｉｅｃｅｔｏｒｅｎｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍｐｇｐｙｐａｎｄｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｔｅ２化ａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｏｆｔｈｅＨａｎｐｐｙｐｎａｔｉｏｎａｌｉｔｙｉｎＫｕｎｍｉｎｇｒｅｉｏｎ．ｇＡｂｓｔｒａｃｔＰａｒｔｉ：ＴｈｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｐｇｐｏｌｙｍｏ巧ｈｉｓｍａｎｄｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｉｎｅｌｌｉｔｕｓｏｆ化ｅＨａｎｎａｔｉｏｎａｌｉｔｙｉｎＫｕｎｍｉｎｒｅｉｏｎ．ｇｇＯｂｅｃｔｉｖｅ：Ｔｈｅｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｅｓｅｃｉａｌｌｔｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｊｐ，ｐｙｙｐ（Ｔ２ＤＭ），ｉｓｒｉｓｉｎｇａｌａｒｍｉｎｇｌｙｉｎｔｈｅＣｈｉｎｅｓｅｐｏｐｕｌａｔｉｏ打？Ｔｈｉｓｓｔｕｄｙｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｔｏａｓｓｅ巧ｔｈｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏ打ｂｅｔｗｅｅ打ｖｉｔａｍｉ打ＤＫｃｅｐｔｏｒＶＤＨｅｎｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍａｎｄｔｅ（）ｇｙｐｙｐｐ２＊ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓＴ２ＤＭｏｆ＆ｅＨａｎｎａｔｉｏｎａｌｉｉｎＫｕｎｍｉｎｒｅｉｏｎ．（）ｔｙｇｇ－－ｈｕｎｄｒｅｄ－Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＯｎｅｔｗｅｎｔｙｓｉｘＫｕｎｍｉｎｇｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ９０Ｔ２ＤＭｓａｎｄ６ｃｏｎｔｒｏｌｓ（）ｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｉｓｒａｎｄｏｍｉｚｅｄｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌ．ｒｓ７９７５２３２ｓｉｎｌｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｇｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍＳＮＰｓｏｆｔｈｅＶＤＲｗａｓｅｎｏｔｅｄｂｕｓｉｎｔｈｅＰｏｌｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎ（）ｇｙｐｙｇｙｔｔｔｍｏｒＰＣＲ－ｔＨｅ巧ａｃｉｏｎｏｆｒｅｓｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｍｅｎｔｌｅｎｈｏｌｈｉｓｍＲＦＬＰｍｅｈｏｄ．ｉｔｇｇｐｙｐ（）ｇｈ，ｗｅｉｇｈｔ，Ｂｏｄｙｍａｓｓｉ打ｄｅｘ（ＢＭＩ），ｗａｉｓｔｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ，ｈｉｐｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅ，ｗａｉｓｔｈｉｐ＊ｒａｗｅｅｍｅａｓｕｒｅｄｏｎ－ＣｗｓｔｉｔｅＷＨＲｉ．Ｈｉｈｄｅｎｓｉｔｙｌｉｐｒｏ化ｉＨＤＬｌｏｄｅｎｉｌｉｏｒｏｔｅｎ（）ｇｐ（），ｙｐｐＬＤＬ－ＣｆａｓｔｉｎｌａｓｍａｌｕｃｏｓｅＦＰＧｏｓｔｒａｎｄｉａｌｂｌｏｏｄｌｕｃｏｓｅｔｏｔａｌ（），ｇｐｇ（），ｐｐｇ（ＰＢＧ），ｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌＴＣｔｒｉｌｃｅｒｉｄｅＴＧｂｌｏｏｄｕｒｅａｎｉｔｒｏｅｎＢＵＮｓｅｒｕｍｒｅａｔｉｉｎｅＳｃｒ（），（），（），ｃｎ（），ｇｙｇｕｒｉｃａｃ２５－－Ｄ３ｔＦＡｉｄ（ＵＡ）ＨｂＡｌｃｈｄｒｏｘｖｉｔａｍｉｎ（２５０ＨＤ３），ｆｒｕｃｏｓａｍｉｎｅ，，ｙｙ（），ｃ－ｅｔｔ０２０ｍｔｐｉｄｅｏｆｆａｓｔｉｎｇｏｓｒａｎｄｉａｌｉｎ３ｍｉｎｕｔｅｓａｎｄ１ｉｎｕｅｓｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｅｄａｎｄｐ，ｐｐｃｏｍａｒｅｄｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｒｏｕｓ．ｐｇｐＲ＂ＶＤＲ－ｅｓｕ；１．Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｓｉｎｉ巧ｃａｎｔｄｉ游ｒｅｎｔｆｒｅｕｅｎｃｉｅｓｏｆ３ＳＮＰｓｏｆＡａｌｇｑｐｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｂｅｔｗｅｅｎｔｗｏｒｏｕｓ户＜０．００１？ＴｈｅＣ／Ａｅｎｏｔｅｗａｓｍｏｒｅｃｏｍｍｏｎｇｐ（）ｇｙｐｉｎＴ２ＤＭｐａｔｉｅｎｔｓｔｈａｎｃｏｎｔｒｏｌｓ６２．２％ｖｓ３８．９％．Ｈｏｗｅｖｅｒｔｈｅｒｅｗａｓｎｏ（），ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｉｆｅｒｅｎｃｅｂｅｔｗｅｅｎＣａｎｄＡａｌｌｅｌｅｉ打ｔｗｏｒｏｕｓ．２．ＦｒｅｕｅｎｃｏｆＣ／Ａｇｐｑｙ＝ｅｎｏｔｅｏｆＶＤＲＡａｌｗａｓｈｉｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｒｏｕｏｄｄｓｒａｔｉｏＯＲ１．３６ｇｙｐｐｇｇｐ［（），５ 昆明医科大学硕±研究生学位谁文＝－ＣＩ０．５４１７１ＦｕｒＴ２ＤＭｔｔｓｅｒａｎ％％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌ．．ｔｈｅｒｍｏｒｅａｉｅｎｗａｓｏｌｄ化（）］，ｐｔｈａｔｏｆｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｏｄｄｓｒａｔｉｏＯＲｗｅｒｅ１．０９ｒｅｓｅｃｔｉｖｅｌｙ，９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌ［（）ｐＣｗｅｒｅ－０ＨＤｌ１．０３１．１８，２５３ｉｎＴ２ＤＭｒｏｕｗａｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｃｏｎｔｒｏｌｒｏｕ（）］ｇｐｇｐ＝％＝－ｏｄｄｓｒａｔｉｏＯ民０．８４ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉ打ｔｅｒｖａｌＣｌ０．７３０省３，ｓｕｅｓｔｉｎｔｈａｔａｅａｎｄ［（，））（］ｇｇｇｇＣ／ＡｇｅｎｏｔｙｐｅａｒｅｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓｏｆＴ２ＤＭ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ２５０ＨＤ３ｍａｙｂｅａｐｒｏ化ｃｔｉｖｅｆａｃｔｏｒｏｆ了２ＤＭ？Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：１．ＴｈｅｒｅｉｓａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＣ／Ａｇｅｎｏｔｙｐｅｏｆｒｓ７８７５２３２ａｎｄｔｈｅｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆｔｈｅａｎｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｎＫｕｎｍｉｎｒｅｉｏｎ．ｐＴ２ＤＭｏｆＨｙｇｇ２．Ｌｏｗｌｅｖｅｌｏｆｓｅｒｕｍ２５０ＨＤ３ｉｓｓｉｇｎｉ贷ｃａｎｔｌｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＴ２ＤＭ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｔｅ２ｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍ；ｇ；ｐ；，ｙｐｐｙｐＰｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｒｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｇｍｅｎｔｌｅｎｇｔｈｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ．Ｐａｒｔ２：ＴｈｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｐｇｏｌｍｏｒｈｉｓｍａｎｄｄｉａｂｅｔｉｃｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓｏｆｔｈｅＨａｎｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｎｐｙｐｐｙＫｕｎｍｉｎｇｒｅｇｉｏｎ．Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ（Ｔ２ＤＭ）ａｒｅａｔｈｉｇｈｅｒｒｉｓｋｏｆｄｅｖｅｌｏｐｉ打ｇｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓ．Ａｏｓｓ化ｌｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏ打ｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤＫｃｅｔｏｒＶＤＲｐｐｐ（）ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎｄｄｉａｂｅｔｉｃｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ（ＤＰ）ｈａｓｂｅｅｎｄｅｓｃｒｉｂｅｄｉｎｓｏｍｅｐｏｕｌａｔｉｏｎｓ．Ｗｅｅ打ｏｔｅｄｔｈｅＶＤ民ｅｎｅｏｌｏｒｈｉｓｍｉｎ过ｈｅａｌｔｈＫｕｎｍｉｎａｄｕｌｔｐｇｙｐｇｐｙｍｐｙｇｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ，ａｇｒｏｕｏｆａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈＴ２ＤＭｆｒｅｅｏｆＤＰａｎｄｉｎａｒｏｕｏｆｄｉａｂｅｔｅｓｐｐｇｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓｔｏａｓｓｅｓｓｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓａｍｏｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒＶＤＲｐｐ，ｇｐ（）ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，Ｔ２ＤＭａｎｄＤＰｏｆｔｈｅＨａｎｎａｔｉｏｎａｌｉｔｙｉｎＫｕｎｍｉｎｇｒｅｇｉｏｎ．＂－ｈｕｎｄ－ｔ－Ｍｅｔｈｏｄｓ；ＯｎｅｉｅｄｗｅｎｔｙｓｉｘＫｕｎｍｉｎｇｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ０了２ＤＭｓ４０ＤＰｓａｎｄ３６口，ｃｏｎｔｒｏｌｓｗｅｒｅｅｎｒｏＵｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄ．ＡａｌｏｆｔｈｅＶＤＲｗａｓｅｎｏｔｅｄｂｕｓｉｎ）ｙｐｇｙｐｙｇｅｒａｃｔｏ打ｏｆｔｏｎａｅｎｔｅ凸ｔｏｍＰＣ民－ＲＦＬＰＰｏｌｙｍｓｅｃｈａｉ打Ｋａｉｒｅｓｔｒｉｃｉｆｒｇｍｌｇｈｐｌｙｏｒｐｈｉｓｍ（）ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｈｅｉｇｈｔ，ｗｅｉｇｈｔ．Ｂｏｄｙｍａｓｓｉｎｄｅｘ（ＢＭＩ），Ｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙ（ＢＭＤ），ｗａｉｓｔｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅｎｃｅｈｉｃｉｒｃｕｍｆｅｒｅ打ｃｅｗａｉｓｔｈｉｒａｔｅＷＨＲｗｅｒｅｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｓｅｒｕｍ，ｐ，ｐ（）６ 昆明医科大学硕±研究生学位论文ｃａ－ｌｃｕｍ（ＣａｓｅｒｕｍｓｈｏｒｕｓｈｉｄｅｎｓｌｉｏｒｏｔｅｎＣｌｏｗｄｅｎｓｉｔｉ）ｐｈｏＰｇｈｉｔｉＨＤＬ，ｐ（），ｙｐｐ（），ｙ－ｌｉｏｒｏｔｅｉ打（ＬＤＬＣ）ｆａｓｔｉｎｌａｓｍａｌｕｃｏｓｅＦＰＧｏｓｔｒａｎｄｉａｌｂｌｏｏｄｌｕｃｏｓｅＰＢＧ，ｐｐ，ｇ）（）ｐｇ（，ｐｐｇｔｏｔａｌｃｈｏｌｅｓｔｅｒｏｌＴＣｔｒｉｌｃｅｒｉｄｅＴＧｂｌｏｏｄｕｒｅａｎｉｔｒｏｅｎＢＵＮｓｅｒｕｍｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ（），ｇｙ（），ｇ（），ｒｕｒｉｃａｃＵＡ－Ｃ，ｉｄＨｂＡｌｃｗｅｒｅｅｘａｍｉｎｅｄ．Ｓｅｒｕｍｌｅｖｅｌｏｆｂｏｎｅａｍｍａ（）（），ｇｃａｒｂｏｘ－－ｌｕｔａｍｉｃａｃｉｄｃｏｎｔａｉｎｉｎｒｏｔｅｉｎｓＢＧＰ）ｂｏｎｅａｌｋａｌｉｎｅｈｏｓｈａ佔化ＢＡＬＰ，ｙｇｇｐ（，ｐｐ（）－－ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎＣＴ２５ｈｄｒｏｘｖｔａｍｉｎＤ３（３）ａｒａｔｈｒｏｈｏｒｍｏｎｅＰＴＨ（）ｙｉ２５０ＨＤ，ｙｉｄ，，ｙｐ（）ｃａｒｂｏｘｅｒｍｎａ－ｙｔｉｌｐｒｏｐｅｐｔｉｄｅｏｆｔｙｐｅＩｒｏｃｏｌｌａｇｅｎＩＣＰｔａｒｔｒａｔｅｒｅｓｉｓｔａｎｔａｃｉｄｐ（Ｐ），ｗｅｒｅ－ｈｏｓｈａｔａｓｅＴＲＡＰｍｅａｓｕｒｅｄｂＥｎｚｍｅＬｉｎｋｅｄＩｍｍｕｓｏｒｂｅｎｔＡｓｓａＥＬＩＳＡ．ｐｐ（）ｙｙｙ（）Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅＡ／ＡｇｅｎｏｔｙｐｅｉｎＤＰｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｍｏｒｅｃｏｍｍｏｎｔｈａｎｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓ＝６６．７％ｖｓ３３．３ｓ０？０％戶０．００５．Ｈｏｗｅｖｅｒｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（％ｖ，，）ｇｙｂｅｔｗｅｅｎＣａｎｄＡａｌｌｅｌｅｉｎｔｈｒｅｅｒｏｕｓＣａｌｌｅｌｅｈａｓａｄｏｍｉｎａｎｔｒｅｖａｌｅｎｃｅｉｎａｌｌｒｏｕｓ．ｇｐ，ｐｇｐＳｅｒｕｍｌｅｖｅｌｏｆＣｒＣＴｉｎＡ／Ａｃａｒｒｉｅｒｓｗｅｒｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｌｈｉｈｅｒ化ａｎｔｈａｔｏｆｏｔｈｅｒ，ｇｙｇｒｏｕｓ（戶＜００５ｂｕｔＢＭＩＨＤＬＣａｎｄ２５０ＨＶＤｗｅｒｅｓｉｎｉｆｉｃａｎｔｌｌｏｗｅｒ化ａｎ化ａｔｇｐ．，，ｇｙｏｆｏｔｈｅｒｔｗｏｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５）．Ａｇｅ，ｄｕｒａｔｉｏｎｏｆｄｉｓｅａｓｅａｎｄＨｂＡｌｃｉｎＤＰｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｈａｔｓｔ－ｓｈｉｈｅｒｔｈａｎｔｏｆＤＭａｔｉｅｎ（Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅｆａｓｉｎｃｅｔｉｄｅｏｆＤＰａｔｉｅｎｔｇｔｇｐｐｐｐ＝ｉｓｌｏｗｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎＤＭｒｏｕｓ（户０．０２１）？ＴｈｅｓｅｒｕｍｌｅｖｅｌｏｆＢＧＰｉｎｃｏｎｔｒｏｌｒｏｕｇｐｇｐ＝ｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｉｎａｌｌｇｒｏｕｐｓ（Ｐ０．００１）．ＴｈｅｓｅｒｕｍｌｅｖｅｌｏｆＴＲＡＰｉｎｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ＝ｔｈａｎ１）Ｌｏｗａｓｍｕｃｈｌｏｗｅｒｏｔｈｅｒｔｗｏｒｏｕｓ（Ｐ０．０４．ｉｓｔｉｃｒｅｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｓｉｓｓｈｏｗｓｇｐｇｇｙｔｈａｔａｇｅ，ＨｂＡｌｃ，Ａ／ＡｇｅｎｏｔｙｐｅｉｎＤＰｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅｍｏｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｏｔｈｅｒｒｏｕｓｏｄｄｓｒａｔｉｏＯＲｗｅｒｅ１．０１．１８１．７３ｒｅｓｅｃｔｉｖｅｌ，％％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌｇｐ［（）乂，ｐｙ－－－Ｃｌｗｅｒｅ１１．Ｕ６３ｓｅｃｔｖｅＭＩ２０皿ｎ．６１０４１．０３—２７０．９２化ｉｌｙ？ＢＢＧＰ５３ｉＤＭ（），，，ｐ］，ａｎｄｃｏｎｓａｒｅｍｏｒｅａｎａＰｒｏｕｓｒａｗｔｒｏｌｇｒｏｕｈｉｈｅｒｔｈｔｈｔｏｆＤｇｏｄｄｔｉｏＯＲｅｒｅ０．８０ｐｇｐ［（），０１ｗ－－．２０．２５ｒｅｓｅｃｔｉｖｅｌ９５％ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌＣｌｅｒｅ０，９６０．６７０．６２０．０７，ｐ，ｙ，（），－Ａ０ｔｉｏｅｅｌ．９４０．０６ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙｓｕｅｓ打ｔｈａｔｌｄａｈｉｈｒＨｂｃＡ／Ａｅｎｏｔｅａｒｅｔｈｅ］，ｇｇｇｇ，ｇ，ｇｙｐｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓｏｆＤＰ，ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｈｅａｐｐｒｏｐｒｉａｔｅＢＭＩ，ＢＧＰ，ｈｉｇｈｅｒｌｅｖｅｌｏｆ２５０ＨＤ３ｍａｙｂｅｔｈｅｒｏｔｅｃｔｉｖｅｆａｃｔｏｒｏｆｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓ．ｐｐ＾ＤＲａｎＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｉｅｉｓａｎａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅ打ｔｈｅＡ／ＡｇｅｎｏｔｙｐｅｏｆＶｄｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｉｎｔｈｅｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｏｆＫｕｎｍｉｎｇｒｅｇｉｏｎ．Ｆｏｒｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｐａｔｉｅｎｔｓｏｌｄａｅｈｉｈｅｒＨｂＡｌｃＡ／Ａｅｎｏｔｅａｒｅｔｈｅｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓ，ｇ，ｇ，ｇｙｐｏｆｏｓ１ｅｏｓｓｅａｎｗｅａｒｏａｅＢＧｅｅｖｅｏｆ２５０ＨＤ３ｍａ：ｐｏｒｏｉｍｈｉｌｅｔｈｔＢＭＩＩ＼ｈｉｈｒｌｌ，，ｐｐｐｒｉ，ｇｙ７ 昆明医科大学硕±硏究生学位论文ｂｅｔｈｅｒｏｔｅｃｔｉｖｅｆａｃｔｏｒｓｏｆｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓ．ｐｐＫｅｙｗｏｒｄｓ：ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ｔｙｐｅ２；ｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅ，ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，Ｐｏ＾ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｌｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｉｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｆｒａｍｅｎｔｌｅｎｔｈ，ｙｇｇｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ．８ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文，．前言随着经济的不断发展，我国国民的饮食结构和生活方式得到了不断的改善，但伴随而来的是糖尿病（Ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓ，ＤＭ）发病率的迅速增长，２０１０年中１７１１国糖尿病患病率为９．％，患病数达到９２４０万。糖巧病己成为严重威胁我国人一民群众健康的重大公共卫生问题。维生素Ｄ是种脂溶性维生素，对人体巧憐代谢及调节起着重要的作用。近年来，有研究提示维生素Ｄ对于癌症、免疫系Ｐ１统疾病Ｗ及内分泌代谢疾病的发生存在相关性，从分子生物学角度对维生素Ｄ（ｖｔａｍｎｅｃｅｏｒｅｎｅｏｍｓｍ及其受体基因多态性ｉｉＤｒｐｔ，ＶＤＲｇｐｌｙｏｒｐｈｉ）的作用及影响的研究也逐步成为热点。已有研究表明维生素Ｄ受体基因多态性与糖尿病的发生及发展存在相关性，维生素Ｄ能够促进赎岛Ｐ细胞分泌膜岛素、改善膀Ｐ１岛素抵抗。因此，维生素Ｄ的营养状态及其受体基因多态可能参与了糖尿病的发生和发展维生素Ｄ受体基因可能是糖尿病的易感基因一。本研巧第部分，－采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术（ＰＣＲＲＦＬＰ）对维生素Ｄ受体基２因型进行测定，旨在明确昆明地区汲族人群维生素Ｄ受体基因多态性与型糖ｅｄｉａｂｅｔｅｓｅｌｌｉｔｕ尿病（Ｔｙｐ２ｍｓＴ２ＤＭ）的相关性。，糖尿病性骨质疏松（ｄｉａｂｅｔｉｃｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，ＤＰ）是指在糖尿病基础上发生的Ｗ骨密度下降、骨脆性增加、骨折风险升商为主要临床特点的代谢性骨病，是糖尿病在骨骼系统的慢性并发症，引起致残、致死率高，正受到越来越多的内分泌科医师的关注。ＤＰ的发病机制复杂《样，相关研究发现维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松可能存在相关性，但国内外不同地域、种族、性别人群中的研巧结果各不相同。日光中的紫外线可Ｗ促进活性维生素Ｄ的形成，与机体内骨代谢、Ｗ骨密度及骨质疏松症的发生有非常密切的关系。高海拔地区日照时间长、紫外线强、人们接受的照射剂量比平原高，继而摄取及皮肤转化巧调节类激素增多，肠巧吸收比平原地区增多，骨重建增强，故骨Ｐ１Ｗ密度峰值要比平原高。良明地区人群的骨密度高于平原地区人群，可能是与日照增加而导致维生素Ｄ合成増加有关。但目前维生素Ｄ受体基因多态性对２型糖尿病合并骨质疏松发病的影响机制仍不十分明确。因此二，本研究第部分中作者民－ＲＦＬＰ采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性技术（ＰＣ）对昆明地区汉族２型糖尿病性骨质疏松患者维生素Ｄ受体基因型进行测定，同时比较糖尿病性骨质９ 昆明医科大学硕±研究生学位论文疏松组、糖尿病骨量正常沮及健康对照组不同基因型亚组间骨代谢、骨转换生化２指标的异同，旨在明确屋明地区汉族型糖尿病患者维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松的相关性，为探讨糖尿病合并骨质疏松的发病机制和在基因水平的早期诊断、预防骨质疏松发生、提高糖尿病患者的生活质量提供理论依据。１０ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文．第一部分云南昆明地区汉族人群维生素Ｄ受体基因多态性与２型糖尿病相关性研究１．对象和施－１．１设计；病例对照实验１一１．２单位：昆明医科大学第附属医院糖尿病科１１；．３对象：本实验共收集观察对象２６例，分组如下９０例２型糖尿病患者，选一２０－自１３年５月２０１４年５月在昆明医科大学第附属医院糖尿病科住院的昆明地区无血缘关系且父母兰代均为汉族的２型糖尿病患者，符合１９９９年ＷＨＯ关于＝＋２，并征得患者同意，男／女４３４７（．３１．７）型糖尿病的诊断标准／，年龄５９０岁。健康对照組（ＮＣ）；自愿参加该研究的３６名体检中也体检的昆明地区汉族＝＋健康成人，男／女１７／１９，年龄（４８．０１２．１）岁。１．３．１病例组入选对象排除标准：１）非２型糖尿病患者２）；伴有糖尿病丽症、急慢性感染３、、；）有甲状腺甲状旁腺疾病或其他内分泌疾病者；４）恶性脚瘤长期卧床５）使用影响巧憐代、近期有创伤、手术及慢性肝病或风湿性疾病者；谢药物者；６）妊娠妇女；１．３．２健康对照组入选标准：经检查排外糖尿病、甲状腺疾病、甲状旁腺疾病、冠也病、高血压、高血脂、肾脏疾病等。１．４临床及生化指标收集：所有研究对象均测量身高、体重，计算体重指数（ＢＭＩ），腰围、臀围，计－算腰臀比，自动生化分析仪测血Ｃａ、Ｐ、ＨＤ＾Ｃ、ＬＤＬＣ、ＦＰＧ、ＰＢＧ、ＴＣ、ＴＧ、ＢＵＮ、Ｓｃｒ、ＵＡ等；测定ＨｂＡｌｃ、血清果糖胺、空腹血膜岛素及Ｃ狀水平等。１．５主要仪器、Ｅｅｎｄｏ任５１．５．１离屯机德国ｐｐ公司８１０Ｒ型１．５．２实时蒙光定量ＰＣＲ仪西安天隆公司化９８８型１．５．３琼脂凝胶成像系统美国ＧＥ公司ＩｎｍｇｅＱｕａｎｔＬＡＳ５００型１．５．４电泳仪上海天能公司ＥＰＳ３００型１．５．５恒温箱法国Ｔｈｅｒｍｏ公司ｈｙｂａｉｄｍａｘｉｌ４型１．５．６加热模块北京来亨科贸有限公司以１１９型１．６ＶＤ民基因型检测：１１ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文１．６．１全血ＤＮＡ抽提；１６丄１２％ＥＤＴＡ（１２）全血５００ｏｔｅｋｅ．抗凝：０．阵，用Ｂｉ公司全血ＤＮＡ抽提试剂盒，抽提基因组ＤＮＡ。使用柱式小量全血基因组ＤＮＡ快速提取法。根据试剂盒说明书，先将蛋白酶Ｋ冻干粉剂短暂离也后，加入１毫升灭菌注射２０－２０用水溶解，按照每次使用量（微升）分装冻干摄氏度保存备使用。再，按Ｗ下步骤提取：１．６丄２将上述抗凝血（使用前回复到室温）颠倒均匀后，取１ｍｌ加入到１．５ｍｌ５００ｕ－离也管中再加入ｌ红细胞裂解液，颠倒６８次，并倒置轻弹管壁，确保充分混匀。１．６丄３室温放置１０分钟，，期间颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞。１６丄４１２０００．于离也机上ｒｐｍ离也３０砂，倒弃红色上清液，由于有璧标本血，质量不高，有较多血凝块，若离也后管底仍见较大红细胞团块加入０．９％的生理盐水１ｍｌ，充分打匀后，再１２０００ｒｐｍ离也３０秒，倒弃红色上清液，留下管底的白细胞团和大约１０山的残留上清。１．６丄５加入２００ｕｌ缓冲液ＢＢ祸旋振荡重悬白细胞团，充分分散白细胞团。１６丄６加入２０ｕ，００ｕＢ立刻．ｌ蛋白酶Ｋ溶液充分混匀，再加入２ｌ结合液Ｃ，‘（：以１祸旋振荡，充分混匀，在７０１９型加热模块中放置１０分钟，溶液变成偏黑色清亮。１．６丄７冷却后加入１００山异丙醇，立刻祸旋振荡充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀。丄上一一１．６８将步混合物（包括可能有的絮状沉淀）加入个吸附柱ＡＣ中（吸ＯＯ、附柱放入收集管中），ｎＯｒｐｍ离屯６０秒，倒掉收集管中的废液。１．６丄９加入５００山抑串（１物去除液，１２０００ｒｐｍ离也３０砂，弃废液。１．６．１．１０力口入７００ｕｌ洗漂液ＷＢ（用前已加用无水立醇），１２０００ｒｐｍ离也３０砂，弃废液。１．６丄１１再加入５００址漂洗液ＷＢ，１２０００ｒｐｍ离也３０秋弃废液。１；６丄１２将吸附柱ＡＣ放回空的收集管中，１３０００ｒｐｍ离也２分钟，尽量除去漂洗液，Ｗ免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。６一１．丄Ｂ取出ＡＣ吸附柱，放在个干净的离也管中，在吸附柱中间部分加入１２ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文－－１００山洗脱缓冲液ＥＢ（事先在６５７（ｒＣ水浴预热），室温放置３５分钟，１２０００ｒｐｍ离屯、１分钟。１６．丄１４将事先得到的溶液重新加入离也吸附柱中，室温放置２分钟，°ＤＮＡ－１２０００ｒｍ离也１分钟２０Ｃ保存备用。ｐ，所得溶液放置１．６．２引物的设计与合成：’’’５－ＡＣＡＡＧＧＧＧＣＧＴＴＡＧＣＴＴＣＡＴ－３－上游引物，下游引物５ＧＧＴＡＴＣ’ＡＣＣ－ＧＧＴＣＡＧＣＡＧＴＣ３，由昆明硕阳生物工程技术有限公司合成。■１．６．３琼脂糖凝胶制备２％琼脂凝胶制备：称取Ｉｇ电泳用琼脂糖粉，用５０ｍｌ的ＩＸＴＡＥ煮沸溶解，°待冷却至６５Ｃ左右，加入５山ｌＯｍ／ｉｎｒ漠化乙巧胆存液，混匀ｇ，冷却至凝。用于ＰＣＲ扩增产物及酶切产物的电泳检测。ＲＲ－ＲＦＬＰ１．６．４ＶＤ基因ｒｓ７９７５２３２多态性特异性片段的ＰＣ的实验条件１．６．４．１ＰＣＲ体系２ｘＰｏｗｅｒＴａｑＰＣ民ＭａｓｔｅｒＭＩＸ体系：样本ＤＮＡ２地２ｘＰｏｗｅｒＴａｑＰＣＲＭａｓｔｅｒＭ技２５此初浓度为ｌｕｍｏｌ／Ｌ的上、下游引物各加１地无核酸双蒸水琳足体系至５０山，于ＶＤ民基因扩増仪扩増。’１．６．４．２ＰＣＲ反应条件；９４Ｃ预变性５分钟，在较高退火温度逐渐降循环１次°’’即：９４Ｃ变性１分钟，５８Ｃ退火１分钟，７２Ｃ延伸１．５分钟的循环条件下扩增３５’１。个循环，总共３１个循环，终末７２Ｃ延伸０分钟〇１．６．４３ＰＣ民产物的检额；／。！１取ｌＯｕｌ扩増产物在２〇的琼脂糖凝胶上电泳（＾ＤＬｌＯＯＯＤＮＡｍａｒｋｅｒ为杨准分子量对照，待指示剂移动至合适位置后停止电泳。在美国ＧＥ公司ＩｍａｇｅＱｕａｎｔＬＡＳ５００型琼脂凝胶成像系统下观察扩增的产物片段。１．６．４．４ＲＦＬＰ体系：取扩增成功的产物１０地限制性内切酶Ａｐａｌｌ地ｌＯｘＢｕｆｅｒ‘２山；无核酸酶双蒸水补足体系至２５ｕｌ，瞬时离也２ｓ后放入３７Ｃ水浴酶切１小时。〇１：ｉＬ．６．４．５ＲＦＬＰ产物的检视！｜和分析取１５酶切后的ＰＣＲ扩増产物在２／〇的琼月旨＾糖凝胶上电泳。ＷＤＬｌＯＯＯＤＮＡＭａｒｋｅｒ为标准分子量对照，待指标示剂移动至合适位置后停止电泳。在美国ＧＥ公司ＩｍａｇｅＱｕａｎｔＬＡＳ５００型琼脂凝胶成像系统下观察扩増的产物片段。（见图１）１３ 昆明医科大学硕±研究生学位论文Ｍ１２３４５６７８９１０ｌＯＯＯｂｐ詔搬３９０ｂｐｌＯＯｂｐ图１ＰＣＲ产物琼脂凝胶电泳图－Ｍ代表１００化递増的ＤＮＡ标记物ｍａｒｋｅｒ－１。ｐ。１０代表扩増产物ｒｓ７９７５２３２位点经Ａｐａｌ酶切后缺乏相应酶切位点为Ａ／Ａ型（３９０ｂｐ），Ｃ／Ａ型为杂合子（３９化Ｐ，２７８ｂｐ，９２ｂｐ），Ｃ／Ｃ型代表存在相应酶切位点的基因型（２７８ｂｐ，９２ｂｐ）（见图２）Ｍ１２３４５６了８９１０３ＷｂＰ瓣３０化Ｐ２７８ｂｐ■２〇〇ｂｐ■：９側ｌＯＯｂ．．．＾ＢＩ＾Ｍ■．ｉ图２ｒｓ７９７５２３２基因型（Ａｐａｌ）酶切位点聚合酶链反应产物酶切电泳Ｍ代表ｌＯＯＯｂｐ递增的ＤＮＡ标记物ｍａｒｋｅｒ。１、１０为Ａ／Ａ基因型，２、３、４、７、８、９代表Ｃ／Ｃ基因型，５、６代表Ｃ／Ａ基因型。１ＤＮＡ．７测序取不同基因型的ＰＣ民扩增产物样本各４０ｕｌ，连同２０ｕｍｏｌ／ｌ的上游、下游引物各６ｕ，验证测序结果和ｌ由硕阳生物工程技术有限公司进行测序（正向、反向），ＰＣ民反应后酶切产物经琼脂糖凝胶电泳结果的一致性（见图３、４、５）。１４ 昆明ｇ科大学硕±研巧生学位论文２４０２５０２１＾２７０＾ｋＧＡＡＧＡＡＧＧＣＡＣＡＧＧＡＧＣＴＣＴＣＡＧＣＴＧＧＧＣＣＣＣＴＣＡＣＴＧＣＴＣＡＡＴＣＣＣＡＣＡｍｕＬ／ｕｙｉｙ／ｗｖｕ麻崖編４庭麵图３ＡａｌＣ／Ｃ基因型，ＡｐａｌＣ／Ｃｇｅｎｏｔｙｐｅ．ｐ２Ｊ０２３０２４０２＾２６０ＧＣＴＣ么五ＴＣＣ〔ＡＧ占在ＧＧＣＡＣ占ＧＧＡＧＣＴＣＴＣＡＧＣＴＧＧＧＣＣＣＣ了ＣＡＣＴ牛ｉＬｋ龜ＵＭＪＬＳｋｌｉｋＭ图４ＡｐａｌＣ／Ａ基因型，ＡｐａｌＣ／Ａｇｅｎｏｔｙｐｅ２３０２４０２Ｔ０２６０ＧＣＡＣＡＧＧＡＧＣＴＣＴＣＡＧＣＴＧＧＧＣＡＣＣＴＣＡＣＴＧＣＴＣＡＡＴＣ牛图５ＡｐａｌＡ／Ａ基因型，ＡｐａｌＡ／Ａｇｅｎｏｔｙｐｅ±标准偏差、１１０：．８统计学分析：采用ＳＰＳＳ２．进行统计学分析基本描述采用均数２率及相关图表表示，假设检验：Ｃ检验、两独立样本ｔ检验，完全随机设计的方，Ｐ＜〇二分类Ｌｏｉｓｔｉｃ回归分析评价ＤＭ差分析．〇５表示差异有统计学差异，采用ｇ＝＜（ａ，Ｐ０．０５。相关危险因素。检验水平取值０．０５０．０５）为有统计学意义１５ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文２．结果：２－．１ＨａｒｄｙＷｅｉｎｂｅｒｇ衡检验平ＶＤＲ－Ｗ各姐样本的Ａａｌ位点基因型分布符合Ｈａｒｄｅｉｎｂｅｒ平衡（Ｐ＞０．０５）Ｃｐｙｇ，位点基因频率为化６７，Ａ位点基因频率为化巧（见表１）。ａｒｄ－ｅ表１研巧样本的ＨｙＷｉｎｂｅｒｇ平衡检验基因型实际观察值（％）期望值等位基因频率Ｃ／Ｃ５０（３９．７）５７．３００．６７＝Ｃ／Ａ７０（５５．６）５５．３Ａ０．３３Ａ１－／Ａ６（４．７）３．３Ｔｏｔａｌ１２６２３Ｘ＝＝５．７８７ｄｆ２，／Ｍ）．０５５，２．２观察对象维生素Ｄ受体Ａｐａｌ基因型进行分析（见表２）２＝两组间的Ｈ种Ａｐａｌ基因型存在统计学差异（ｘ５３．４３２，ｆ＜化００１），具体分析得出：Ｃ／Ａ基因型分布频率与Ｃ／Ｃ和Ａ／Ａ型均存在差异（户＜０．０５），Ｃ／Ｃ和Ａ／Ａ型两者间并无差异户＞０．０５组间的Ｃ和Ａ型等位基因无统计学差异（）；两２＝２１切．６０片０．１０６）。表２两组间基因型及等位基因频率分布［ｎ（％）］组别等位基因基因型例数（ｇｒｏｕｐ）ＡＣＣ／ＡＡ／ＡＣ／ＣＴ２ＤＭ９０６４（３５．６）１１６（６４．４）５６（６２．２）４（４．５）３０Ｇ３３）１８（２５）５４（７５）１４（３８５２０（５５．６）ＮＣ３６．９）２（５．）１６ 昆明医科大学硕±研究化学位论文７０６２．２；；｜■ＬＩＨｈｈ３。ＩＭＩＬＵＢＩＩｂＩ０—Ｃ／ＣＣ／ＡＡ／Ａ■２型糖尿巧■正常对照图６两组基因型频率分布［％］８０７５；ｔｈｉｉ＾１ＡＣ■２型糖尿病■正常对照图７两组等位基因频率分布％［］２．３两组间临床和实验室数据比较：（见表３）２型糖尿病组的年龄、ＦＰＧ、ＬＤＬＣ高于正常对照组（尸＜０．０５），２５０ＨＤ３、Ｃａ低于正常对照纽（尸＜０．０５）；两组间其余各指标均未见显著差异（Ｐ＞０．０５）。１７ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文表３两组间临床和实验室数据比较Ｕ±ｓ）指标ＮＣＴ２ＤＭｔ值户值年龄－（岁）４８．００±１２．１０５８．５７＋１２．１０４．４３０＜０．００１－病程２３－－（年）６．８１±６．＾ＢＭＩ（ｋｇ／ｍ）２４．８９±３．２３２５．０８１３．３１０．３０１０．７６４ＨｂＡ－－－ｌｃ（％）８．９８±２．５３＇ＦＰＧ－（ｍｍｏＬ４±０＋１１ｌ／）．８７．８３７．７９２．１７０．８９４＜０．００（ｍｏ－－－ＦＣＰｐｌ／Ｌ）１．３６＋０．８６（ｍｍｏ＋－ＬＤＬＣｌ／Ｌ）２．５３０．８０３．０１±１．０４２．４９２０．０１４ＨＤＬ－Ｃ（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．３１＋０．６１１．１１＋０．３３１．８８５０．０６６２５０ＨＤ３（ｎｇ／ｍｌ）４０．７０±８．６２２６．１化１１．１６７．８３５＜０．００１ａ－Ｃ（ｍｍｏｌ／Ｌ）２．３３＋０．０８２．２化０．１１３．８０２＜０．００１Ｐ（ｍｍｏＬ－ｌ／）１±０１１．±．０．０５８０名５４．０６．６０６００９２．４糖巧病姐各基因型亚组临床和实验室数据进行比较（见表４）Ａ／Ａ组中Ｓｃｒ显著高于其他组别（户＜化０５）。各组间其余各指标均未见显著差异（戶＞０．０５）。Ｃ／Ａ姐中ＢＭＩ、ＦＰＧ、ＦＣＰ、２５０ＨＤ３值虽然未显著低于其他组别（Ｐ值分别为０／７５５，０．３２９，０．０６８，０．４６０），但与Ｃ／Ｃ、Ａ／Ａ组相比存在降低的趋势。表４Ａｐａｌ各基因型亚姐临床和实驗室数据比较（三±８）指标Ｃ／ＡＣ／ＣＡ／ＡＦ值Ｆ值（５４．％±．．５虹．巧．６巧．．年龄岁）１１３６％１５５３７．２７０２７８０７５８病程（年）７．２５±２．９９７．１７±２．１４６．５８±１．４３０．０９７０．９０８＾ＢＭＩ（ｋｇ／ｍ）２５．１２＋３．８６２４．８９＋２．８２２４．１０＋２．２９０．２８２０．７５５ＨｂＡｌｃ（％）８．１８±２．８１８．１２±３．１３７．５０１２．７３０．８９６０．４１１ＦＰＧ（ｍｍｏｌ／Ｌ）７．２２±２．２６６．５９±２．３５６．８７＋２．４２１．１２１０．３２９ＬＤＬＣ（ｍｍｏｌ／Ｌ）２．５８±０．９５２古３±０．８６２．９６±１．１９０．５１８０．巧７ＨＤＬ－Ｃ４＋０±０４＋（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．１．３６１．２１．５１．０５０．２８０．５３４０．５８８１８ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文ＴＣ（ｍｍｏｌ／Ｌ）４４３±１２０＋１３４３４＋００．２５０．２８８．．４．６８．．９．８１８ＴＧ（ｍｍｏｌ／Ｌ）２．０４±１．８０１．９９＋１．０９２．２０＋１．１１０．０５３０．９４８Ｓ灯（ｕｍｏｌ／Ｌ）６８．４７±１５．６９６７．７４＋１９．２８１０１．９７±２３．２７３．６２１０．０３０．１３５２ＢＵＮ（ｍｍｏｌ／Ｌ）４０４±１．４２．１１．３．±．０５３０．．４化９５１９１６５ＵＡ（ｕｍｏｌ／Ｌ）３５８４化８４．０７％．１２±７．．７３±６７．１２２．４３７０．０％．３７０５３２９ＦＣＰｍ／ｍＩ０．６７±０．４１１．５０±０乂６１．１９±０．８４２．７８００．０６８（ｇ）２５０ＨＤ３（ｎｇ／ｍｌ）２４．１化１１．８３３０．６１１１３．１２３０．６２±１１．８９０．７８００．４６０（ｍｍｏｌ／Ｌ３０００９９２０±０１．Ｃａ）２．３２０７２５．±．２．３１±０．０．３．９０３Ｐ（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．０６±０．１４１．０６１０．１１１．０６±０．１２０．１８８０．８２９＊与Ｃ／Ｃ组相比，Ｐ＜０．０５；与Ｃ／Ａ组相比＃Ｐ＜０．０５，２．５维生素Ｄ受体基因Ａｐａｌ位点多态性与２型糖尿病的关系（见表５）＾是否发生ＤＭ作为、ａ＾因变量，基因型年龄、ＢＭＩ、ＬＤＬＣ、２５０ＨＤ３、Ｃ作为＝协变量，采用二分类Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析结果提示，ＡｐａｌＣ／Ａ基因型（０民１．３６）、＝＝年龄（０Ｒ１．０９）为２型糖尿病的危险因素而２５０ＨＤ３（ＯＲ０．８４）可能是Ｔ２ＤＭ，的发生的保护因素。表５二分类ｌｏｉｓｔｉｃ回归分析ｇ因素Ｂ值ＳＥＰ值０民值９５％ＣＩ００９０－．０４０００７１．０９１０３１．１８年齡．．．Ａａ－－ＩＣ／Ａ１５０．７６．１．３６．１．７１ｐ（．４００４６０５４）２５０ＨＤ３－０００－．１９０．０６０．００２．８４．７３０．９３３．巧论早在上世纪八十年代Ｗ，美国学者Ｎｏｒｍａｎ等对从维生素Ｄ缺乏大鼠体内分离出的膀岛细胞狙织进行研究发现，葡萄糖和精氨酸刺激该组织膀岛素分泌与合一成能力均明显下降２５－ＯＨ２Ｄ３。而进步的研巧发现补充ｌ治疗可使维生，，（）素Ｄ缺乏同时伴有糖耐量和膜岛素分泌受损大鼠的族岛素合成能力恢复其Ｗ一后Ｚｅｉｔｚ等进步将无义突变型ＶＤ艮基因通过基因打範技术导入小鼠体内后导致小鼠表达ＶＤＲ失活，虽然实遊小鼠膀岛细胞的数量及结构未见异常，但与正常对照组小鼠此较发现其糖负荷后血糖水平明显升高，血清族岛素分泌高峰，１９ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文下降超过６０％，且膜岛Ｐ细胞ｍＲＮＡ表达水平也显著降低。这些研究均提示维生Ｗ素Ｄ是维持正常膜岛素分泌和糖耐量所必需的物质。荷兰学者通过对维生素Ｄ与代谢疾病的ｍｅｔａ分析发现，维生素Ｄ与２型糖尿病、代谢综合征呈负相关，一将维生素Ｄ保持在适度水平可有效预防２型糖尿病的发生，更进步的说明了维生素Ｄ与２型糖巧病的发生密切相关。人类维生素Ｄ受体基因位于染色体１２ｑｌ３－１４区由９个外显子和８个内含，子构成。其中，在第２外显子和第９外显子内分别存在ＦｏｋＩ和ＴａｑＩ酶切位点，在第８和９外显子之间存在ＢｓｍＩ和Ａｐａｌ酶切位点。将存在上述酶切位点的ＶＤＲ基因用ＢＴ表１气维生素Ｄ受体基因多态性，ｆｂ，ａ，ｔ表示，反么用Ｆ，，Ａ，示＾１ｓ２型糖１１ＩＷＰｌ、ＬｉＬｅｉ与尿病相关性成为了研巧的热点，李慧敏的研究均提示Ｆｏ过位点和２型糖尿病存在相关性ＦＩｆ２型，且ＶＤＲｏｋ位点中的等位基因是糖尿病的易感基因。徐加蓉研究发现ＶＤＲ基因ＢｓｍＩ位点基因多态中等位基因Ｕ】口口７】ｂ为２型糖尿病的髙危因素。关于Ａａｌ位点ｅｅｒ、ＹｅＷＺ、ＤｉｌｍｅｃＦ、ｐ，Ｓｐ公＇１１１１ＩＷＡａＮｏｓｒａｔａｂａｄｉ民对离加索人群研究并未发现维生素Ｄ受体基因ｐｌ、ＴａｑＩＩＷ位点多态性与２型糖尿病存在相关性。而美国加州学者在对当地小区患有２型糖尿病或代谢综合征老年人群的研究中发现ＶＤＲＡｐａｌ位点多态性与空腹血糖Ｕ＂３水平升高及糖耐量异常有关一ＶＤ艮。项对亚洲人的研究提示基因多态位点ｐｑＡｐａｌ在葡萄糖应答方面影响膜岛素的分泌。国内Ｗａｎｇ和崔木绪均发现Ａａｌ位点多态性与膜岛素分泌水平存在相关性，且Ａ／Ａ基因型血清膀岛素水平ｐ最低，Ｃ／Ａ基因型居中，Ｃ／Ｃ基因型最高。本研究提示：２型糖尿病组与正常组间的存在ＶＤ民基因Ａｐａｌ酶切位点多态性，Ｈ种Ａｐａｌ基因型存在统计学差异２＝＞５３４＜０００１。２〇．３２ｉ．型糖尿病沮中Ｃ／Ａ基因型分布频率明显高于正常对照组Ｃ，）（化２％ＶＳ３８．９％），但两组间的Ｃ和Ａ型等位基因无统计学差异２＝＝乂２乂１００．１０６。二分类１〇如化回归分析结果提示３１［／八（义式），糖尿病的发生与口＝＝＝＝１１０９ＰＧ０民ＯＲ０８４基因型（ＯＲ．３６）、年龄（０民．）、Ｆ（５．９７）、２５０弧３（．）相关，其中ＡｐａｌＣ／Ａ基因型、年齡、ＦＰＧ为２型糖尿病的危险因素。而２５０皿３ＵＩ１Ａ－可能与Ｔ２ＤＭ的发生保护因素。ｌＤａｇｈｒｉ等对钞特阿拉伯地区２型糖尿病、代谢综合征患者研究发现ＶＤＲ基因ＡａｌＣ／Ａ基因组中维生素Ｄ７ｊＣ平显著低于ｐＰ１１其他组别，但Ａｐａｌ与２型糖尿病无相关性。山东地区奮木绪发现糖耐量异常２０ 昆明医科大学硕±研究生学位论文组中ＡｐａｌＣ／Ｃ基因型频率盈著高于糖尿病组及正常对照组，而各基因型组间＞２５０ＨＤ３水平未见明显差异。Ａｐａｌ的识别位点位于第８内含子内。其５端引导块域内的多态性位点影响＞ｍＲＮＡ的表达，３端非翻译区的多态性位点影响ｍＲＮＡ的稳定性和蛋白质翻译的效率。可能机制如下：（１）ＡｐａｌＣ／Ａ基因型可能通过对赎岛Ｐ细胞内ＶＤ艮受体作用的改变进而影响膜岛素分泌；（２）ＡｐａＩＣ／Ａ基因型可能通过调控ＶＤＲ受体使体内维生素Ｄ水平下降，导致膜岛素分泌减少和糖爾量异常。族岛Ｐ细胞功能缺陷和族岛素抵抗是２型糖尿病的两大发病机制。维生素Ｄ可ＩＭ１能通过抑制Ｐ细胞调亡、改善膀岛Ｐ细胞功能对２型糖尿病起到预防作用。研究ｎｓｊ表明维生素Ｄ参与了膜岛素的分泌。维生素Ｄ的缺乏可导致膜岛３细胞分泌｜ｎｗ功能受损可能存在的机制包括直接作用和间接作用。直接作用即膜岛Ｐ细胞内存在ＶＤＲ，其与活性维生素Ｄ结合后，刺激族岛素转录基因表达，促进膜岛素分泌，间接作用则是指通过调节膜岛细胞膜巧离子通道调控膜岛素分泌ＰｆｗＶｉＤ水平与膜岛，ｔ素抵抗呈负相关，而炎症是膜岛素抵抗的促进因素，维生ｎｗ素Ｄ可Ｗ启动巨睡细胞并减少炎性因子释放，从而增加膜岛素敏感性。另外，－－酪固丽系统－动物实验显示，维生素Ｄ缺乏使得肾素血管紧张素（ｒｅｎｉｎＵＷａｎ－ＲＡＡＳｉｏｔｅｎｓｉｎａｌｄｏｓｔｅｒｏｎｅｓｓｔｅｍＲＡＡＳｇｙ，）活性增加，而活性增加容易导致外周組织对膜岛素的抵抗加重Ｐ１１。林賽东等发现上海地区中老年人群中低水ＵＵ平的２５０ＨＤ３可能是糖尿病的独立危险因素。Ｎａｇｐａｌ等对于维生素Ｄ缺乏的Ｕ３３Ｔ２ＤＭ月Ｅ胖男性患者，补充维生素Ｄ可提高族岛素敏感性。ｖｏｎＨｕｒｓｔ等在对居住于新西兰的南亚妇女研究中同样发现补充维生素Ｄ可改善族岛素抵抗。ｌ研究结论：（１）昆明地区汉族２型糖尿病人群中ＶＤＲＡｐａ位点Ｃ／Ａ基因型与Ｔ２ＤＭ的发生存在相关性；（２）低水平的２５０ＨＤ３与２型糖尿病存在相关。２１ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文第二部分昆明地区汉族人群２型糖尿病患者维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松症的相关性研究１．对象和方法：１－．１设计：病例对照实验一１．２单位：昆明医科大学第附属医院糖尿病科－－一１．３对象；对昆明医科大学第附属医院糖尿病科２０１３０５／２０１４０５住院的昆明地区无血缘关系且父母Ｈ代均为汉族的２型糖尿病患者９０例，糖尿病诊断标准参照ＷＨ０１９９９年标准，并且除外伴有糖尿病酬症、急慢性感染、甲状腺、甲状旁腺疾病或其他内分泌疾病者、恶性肿瘤、长期邸床、近期有创伤、手术及慢性肝病或风湿性疾病者、使用影响巧磯代谢药物者。其中２型糖尿病骨量正常组５０＝３１／１９３＋例（男／女０、年龄巧．５１１．）岁，２型褲尿病伴骨质疏松组４０例（男＝＋／女１２／２８）、年龄（巧．０１０．４）岁，骨质疏松症诊断参照ＷＨＯ诊断标准；经双ＸＤｕａＸ－（ｌｅｎｅｒｒａＥｉｂｓｏｒｐｔｉｏｍｅｔＸＡ能线吸收法ｇｙｙ：ｒｙ，Ｄ）测定骨矿物质密度（Ｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙ，ＢＭＤ）值对比同性别、同种族健康成人骨峰值差距１个标准偏差（ＳＤ）内为正常；差距大于等于２．５ＳＤ为０Ｐ标准为依据。并Ｗ昆明医科大学第一ＮＣ附属医院体检中也３６例骨密度正常的健康成人作为对照组（），男／女二＋口１９（４８１）１７／，年龄．０．岁。一１．４临床及生化指标收集：同第部分１．５ＢＭＤ的测定：（见表１）采用美国ＧＥ公司生产的双能Ｘ线骨密度仪。研究对象均采取仰位测正位腰椎－（Ｌ一）ＢＭＤ。测量精度在腰椎正位为０．５％０．８％。２±表１各组骨矿含量比较（ｇ／ｃｍ，ｘｓ）项目ＤＰ组（４０例）ＤＭ组（５０例）ＮＣ姐口６例）＊＊＊□＊°Ｌ１０．８１６＋０．巧２１．１１９＋０．２０５１．７４１＋０．１９６＊＊＊°＃□Ｌ２０．８８９＋０．１７４１．１巧＋０．２１９１．７６０＋０．２２６＊＊＊°＊□Ｌ３０．９６０＋０．１６５１．２４９±０．２２８１．８１０＋０．巧９＊＊＊□＊°Ｌ４０．９８５＋０．１８１１．２６４＋０．２１５１．７４６＋０．２１６＊＊＊□＊□Ｌ１－１３１４０．９＋０．１７１１．２０１＋０．２１７．７７３＋０．巧９＞＃°与ＮＣ组相比，＜０．０５；与ＤＭ狙相比，Ｆ＜０．０５；与ＤＰ组相比，Ｐ＜２２ 昆明医科大学硕±研充生学位论文０．０５。１．６主要仪器１．１５５８１０民．６离也机德国９９６１１＜１〇巧公司型１．６．２ＯＤ酶标仪法国Ｔｈｅｒｍｏ公司ＭＫ３型１．６．３Ｐｒｏｄｉｇｙ双能Ｘ线骨密度测定仪美国ＧＥ公司一１６．．４其余仪器同第部分一１．７ＶＤ民基因型检测：同第部分。’一１．８ＤＮＡ测序：同第部分１．９骨代谢指标：．．采用酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）检测①骨巧素（ＢＧＰ）、②骨源性碱性磯酸酶－Ｄ－－（ＮＢＡＰ）、③降巧素（ＣＴ）、④２５哲维生素３（２５（ＯＨ）２ＶｉｔＤ３）、⑤甲状旁腺激素（ＰＴＨ）、⑧Ｉ型胶原簇基末段前肤（ＰＩＣＰ）、⑦抗酒石酸酸性礎酸酶（ＴＲＡＰ），试剂盒均胸自硕阳生物科技有限公司。－－１２０５－１．９．１自备物品：１．酶标仪．：．０、２２〇ｈＬ、２０２０（ｉＬ、；高精度加样器及枪头咕Ｈ。２００－１００（＾１＾３．巧Ｃ恒温箱。１－．９．２血浆：检测标本收集：空腹过夜，于次晨８：００９；００肘静脉采血，凝固°ｒｍ离也ｌＯｍ－后４０００ｐｉｎ，收集血清，２０Ｃ保存。１．９．３操作步驟１．９．３．１从室温平衡２０分钟后的侣淸袋中取出所需板条，剩余板条：用自封袋密°Ｃ封放回４。１．９．３．２设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品５０ｌＬ。＾１．，ｌ．９．３３样本孔先加待测样本１０叫Ｌ空白孔不加。＾再加样本稀释液４０＾；１．９．３．４除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加人辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的检测抗体’１００叫用封板膜封住反应孔Ｃ水浴锅或。，３７桓温箱温育６０分钟１．９．３５，，５。．弃去液体吸水纸上拍干如此反复洗板次Ａ°１．９．３．６每、Ｂ各５０ｉＬ３７０避光解育１５分钟。孔加人底物，＾１．９．３乃每孔加入５０ｉＬ终止液，１５分钟内，在４５０ｎｍ波长处测定各孔的ＯＤ值。｜－１．９．４结果判定：（见图１７）在Ｃｕｒｖｅｅｘｐｅｒｔｓ软件中绘制标准曲线，Ｗ标准品浓度为横坐标，对应ＯＤ值作纵坐标，绘制出标准品线性回归曲线，按曲线方程２３ 昆明崖科大学硕ｄ：研究生学位论文计算各样本浓度值。ＰａｓｉｎｏｉＩｅ■ｌｅｅｒｅｎｔｈｅｌｈｔｎｏｕｓｅｂｕｔｔｏｆｈＳ化肪泌的７８ｐｇ４ｊｎ化ＩＪＥ１ｅｆｌｕ．ｅｓ＊ｏｒｅ．■－．ｇｆａｐｈｉｎｇｆｅａｔｕｒｓｌａｅＰｒＦＩ（ｈｌｐ０９９８９２１３０、、＞＾！＾ｇ成。＾。］．＊．‘，，＞０．０８．８１７．６２６＞４３５．２４４．０５２．８ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ＇‘图１２５０ＨＶＤ曲线方程Ｐ－ｌｉｉｈｂｆｈｓＳ０蛇３０９５閒ｅａｓｅｅ？ＩｈｅｒｔｎｏｕｓｅｕｔｔｏｎｏｒＩ．ｐｇｊＩｎｆｏ‘：■，，Ｉｕｒｅｉｎｇｆｅａｅｎ．ＰｉＦＩｆｈｄ．０．９９６９３９６０ｇｒａｐｈｔｓｎｕｅｔｔｏｉｐ■．：．．．．．．．．：；］＾－Ｉ／＊■ｉ■．■，■．■■■Ｖ？ＩＩ■ＩＩＩ０．０７３．３１４６．７ＫＯ．Ｏ巧３．３３６６．７４４０．０ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｏｎｉ图２ＢＡＬＰ曲线方程ＰｌｅａｓｅｒｅｓｓｔｈｅｌｉｈｌＭｏｕｓｅｂｕｔｔｏｎｆｏｉＩｈｅ５？化０１６７化巧ｐｇＩｆＩｊｎｏＬｉｈｉｆ．ＰＦＩｆｈｌ．－０．的７妨妨９ｒａｐｎｇｅａｔｕｒｅｓｍｅｎｕｒｅｓｓｏｒｅｐｒｇ＾■八■片Ｉ§：／…於‘：］；＼ｉ作ｊｌＩＩＩＩＩＩＩｌＩＩＩＩｉＩ０．．０１．５２９４Ａ５＊９７．３８．８ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ图３ＢＧＰ曲线方程２４ 昆巧控科大学硕±研巧化学位论文Ｓ■ｅａ化ｉｅｔｓＩｅｔＢｌｏｕｓｅｕＵｏｎｏｉｔ０．邮４４如巧＾＾ＰｌｐｈｒｉｇｈｂｆｈｅＩｗ＝１－ＳＩｒａｐｈｉｎｇｆｅａｔｕｒｅ，ｍｅｎｕ．Ｐｔ。ｆｏｒｈｅｌｐ．ｒ０．９９９９１５４ｇ；之；＾：：１０．：ｏ８於：￣－￣＇ＩＩＩＩ＇＇＇Ｉ＇ｔ诉１Ｉｒ＜ＩＩ．．０．１５．９１１１７．６２３４２９３３５．１．８ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ４Ｔ曲图Ｃ线方程．．？ｆ＾Ｓ０．０１２４５３２Ｐｌｅａｔｅｍｔｔｈｅｒｉｍｏｕｓｅｂｕｔｔｏｎｏｒ２ｊｐ（＾ＩｎｈＩ■－１枯巧Ｒｆｈｌ．■０．３９３６３７４８１ｒａｐｌｅａｔｗｅ＊ｍｅｎｕ．ＰｉｅＭｃＨｅｇｐ—、典１：１至从－ｓ＾：Ｌ／■■■／Ｉ尸！．１■，■■■Ｉ■■■瓜＊｜＇ＩＩＩ■■Ｉｉ０５８６．〇．７３１３８８０Ｄ■〇１４６．７２９３．３４４０．７ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ图５ＰＩＣＰ曲线方程ｎ■１Ｊｔｔｈｅｌ５０．０２０６７４２１ｒＰｌｅａｓｅｉＭｍｏｕｔｅｂｕｔｔｏｆｃＭｔｈｅｒｅｔｇｐＩ＝Ｌ１Ｐｎｆｈｌ．ｆ０．的如６０７１ｇｉｈｉｎｇｆ础Ｕｆ＂ｎｅｎｕ．ｉｅ？ｗｅ０坤ｐ￣、＊；７］三］、々－■■■■■：？：．．．．…ｈ＾－６〇１＇■■＇＇＇■■＇１ＩＩＩＩＩ＇＇ＩＩ在ＩＩ０．１００１３２０．０．０４４０６６．００１．．２２，如ｃｏｎｃｅｎｒａｏｎｔｔｉ園６ＰＴＨ曲线方程２５ 昆明隆科大学硕±研巧生学位论文Ｓ■ＰｌｅａｓｅｈｅｉｈｔＮｉＨｎｆ化０．０１４９４０７７巧巧ｔｒｔｍｏｕｓｅｏｏｒ０ｊＰｇｈｑｆ＊ｒａｐＮｎｇｆｅａｌｕｉｅｔｍｅｎｕ．ＰｒｅｓｔＦＩｆｏｒｈｅｌ．０．９９９８８６６２ｇｐｒ作＾Ｔ１＊－－、：１一々甚ｖ：＃■（＾立；＞々圓———々ＩＩＩ１ＩＩ＇１Ｉ广ＴＩｉＩＩＩＴｉＩ皆Ｉ）Ｉ０．０１．５么９４．４５．９７３８８．．ＸＡｘｉｓｕｎｉｔｓ（）图７ＴＲＡＰ曲线方程ＵＯ统计学分析：采用ＳＰＳＳ２１．０进行统计学分析：基本描述采用均数±标准偏差、率及２相关图表表示，假设检验：Ｃ检验、两独立样本ｔ检验，完全随机设计的方差分析，户＜化０５表示差异有统计学差异，采用二分类Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析评价ＤＭ相关危险因素＝。化０５（ａ０．０５）尸＜０．０５检验水平取值，为有统计学意义。２．结果：一研巧样本的Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅ巧平衡检验见第部分２．１糖尿病骨质疏松症患者组（Ｄ巧、糖尿病非骨质疏松患者组（ＤＭ）、正常对照组（ＮＣ）维生素Ｄ受体基因型分布的比较：（见表２）正常对照组中Ｃ／Ｃ基因型分布频率明显高于其他组别（正常对照组４００，．％＾糖尿病骨量正常组％，３４０％／）．０％糖尿病胥质疏松组．，０．００５糖尿病骨量正；常组Ｃ／Ａ基因型分布频率明显高于其他组别（糖尿病骨量正常组组５２．９％，正常２０＝．０％组组２７１％１４７８７，片００５对照组，糖尿病骨质疏松．，肛．．０）糖尿病骨质；疏松症组Ａ／Ａ基因型分布频率明显高于其他两组（糖尿病骨质疏松组组６６．７％，〇正常对照组＝＝３３．３／〇，ＤＭ组０，１戶）．０％４．７８７，０．００５正常组、糖尿病骨量於；正常姐、糖尿病并骨质疏松姐等位基因频率无显著差异，最高的均是Ｃ等位基＝＝（５４３戶因．８０．０６６）。於，２６ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文表２各组间Ａｐａｌ基因型及等位基因频率分布［ｎＣＷ］基因型例数ＮＣＤＭＤＰＣ０／Ａ７０１４（２０．０％）３７（５２．９／０）１９（２７．１％）〇Ｃ／Ｃ５０２０（４０．０％）１３（％．０／〇）１７（３４．０％）＊°Ａ／Ａ６２Ｇ３．３％）０（０．０％）４（６６．７％）Ｃ１７０５４（３１．８％）６３（３７．１％）５３（３１．１％）Ａ８２１８Ｑ２．０％）３７（４５．１％）２７（３２．９％）＃□与ＮＣ组相比／Ｐ＜０．０５；与ＤＰ组相比，Ｐ＜０．０５；与ＤＭ组相比，户＜００５．．１５０－１口ＮＣ組１１＾ＤＭ组－ＤＰ细１００Ｉ１Ｉ３１．１３２．９５０－３７．１化１３１．８ｉＴｏｊ—〇，，ｃＡ图８等位基因分布频率［％］１５－０１Ｉ１ＮＣ姐ｒ￣￣ｉＤＭ组口ＤＰ姐－１００＾２７．１３４．０＿＿＿＿＿６６．７－２６５０－０——５２．９—￣占一－４０３３．３．０２０－０ｌ－ｌＩｌ〇；＿，Ｃ／ＡＣ／ＣＡ／Ａ图９基因型分布频率［％］２．２Ａａｌ各基因型亚组临床和实验室数据进行两两比较ｐ（见表３）Ａ／Ａ组中Ｓｃｒ、ＣＴ均显著离于其他组别（Ｐ＜＾０５）。各组间其余各指标均未见Ｘ显著差异（尸＞０。．０５）２７ 昆明医科大学硕±研究生学位论文表３Ａｐａｌ各基因型亚组临床和实验室数据比较（三±ｓ）指标Ｃ／ＡＣ／ＣＡ／ＡＦ值戶值年龄（岁）５４．９８±１１．％％．５化１５．３７５３．６７±９．２７０．２７８０．７５８±２±２９０８病程（年）６．５化１．４３７．１７．１４７．２５．９９０．０９７０．＇＃Ｓｃｒ（ｍｍｏｌ／Ｌ）６８．４化１５．６９６７．７４＋１９．２８１０１．９７±２３．２７３．６２１０．０３０ＢＧＰ（ｎｇ／ｍｌ）５．１８±０．４６５．３２＋０．６１５．２２±０．２５０．９Ｚ２０．３８１ＰＴＨ（ｐｇ／ｍｌ）２７．９２１８．２４２７．２５＋９．８４２８．１６±６．７５０．０９４０．９１０＋０６ＢＡＬＰ（Ｕ／Ｌ）６７１００．９１．±２．３０８．巧．４４＋２．６４６２４．３５７３４８．６８０＊＾ＣＴ（ｐｍｏＩ／Ｌ）０．０６±０．０１０．０８±０．０２０．１７＋０．０６４．５７９０．０１２２５ＶＤ（ｎｇ／ｍｌ）３０．６２±１１．８９３０．６１±１３．１２２４．１４±１１．８３０．７８００．４６０ＭＣＰ（ｎｇ／ｍｌ）１０７．５９±４２．７５１１２．７３１４４．２６１００．４０±４１．５９０．３３８０．７１４ＴＲＡＰＵ／Ｌ６．５９１０．５７６．６８１０．６７６．７９＋０．４８０．５０３０．６０６（）Ｃａ（ｍｍｏｌ／Ｌ）２．３１±０．０９２．３０±０．０９２．３０±０．１９０．３２３０．巧５Ｐ（ｍｍｏｌ／Ｌ）１６±０１０６１０１２．０６±０１２０．１８８０．８２９．０．１２．．１．‘＃与Ｃ／Ｃ组相比，Ｐ＜０．０５；与Ｃ／Ａ姐相化，Ｐ＜０．０５２、．３正常组糖尿病骨质疏松组、糖尿病非骨质疏松组间临床和实验室数据比较；（见表４）曲化－２０ＨＤ３显＜００５糖尿病骨质疏松组ＢＭＩ、（：、５著低于其他组别（ｆ．），糖尿病骨质疏松组年龄、病程、ＨｂＡｌｃ显著高于糖尿病骨量正常组，（Ｐ＜０，．０５）＝糖尿病骨质疏松组空腹血清Ｃ肤（ＦＣＰ）显著低于糖尿病骨量正常组（Ｐ０．０２１）；＝正常对照组骨巧素（ＢＧＰ）显著高于其他组别（ｆ０．００１）正常对照姐抗酒石酸，＝酸性磯酸酶（ＴＲＡＰ）浓度明显低于糖尿病骨量正常及骨质疏松组（ｆ０．０１４），＞各组间其余各指标均未见显著差异（Ｐ０．０５）。表４各沮间略床和实验室数据比较Ｇ±ｓ）指标ＮＣＤＭＤＰＦ值＇值＊年龄（岁）化化１２．１５３．５＋１１．０６５．０±１０．４２３．４８０＜０．００１＊一＋２病程（年）５．６６１２５．３±．６８．６．５６９０．０＞＾＃ＢＭＩ（ｋｇ／ｍ）２５．０８±３．３１２５．７８１３．０５２３．７７±３．１３４．５９００．０１２Ｓｃｒｕｍｏｌ／Ｌ的．７化１７．４７６７．４化１７．２７７２．６７±４８．５２０．３１７０．７２９（）２８ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文＊ＨｂＡ—Ｗｌｃ（％）８．８１±２．８４９．１２＋２．２６．９４５０．００１ＦＰＧ（ｍｍｏｌ／Ｌ）４±±２０７±２２２９０００．８７０．８３７．５３．１．９９．３０３１．．１—ＦＣＰ（ｍｇ／ｍｌ）１．５５±０．８８１．１３＋０．７９２．３４２０．０２１ＬＤＬ－Ｃ（ｍｍｏＶＬ）２．５３±０．８０３．０４±０．９８２．９７１１．１４３．１３１０．０４７＊＃－ＨＤＬＣ（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．３１±０．６１１．２２±０．３６１．０２±０．２７５．４５３０．００５＊°ＢＧＰｎ／ｍｌ５．６８＋０．６６５．０８±０．３１５．０４±０．３１２４．９７３０．００１（ｇ）ＰＴＨ／ｍＩ２７．８９＋８．５８２６．３６±７．３５２９．０９±１０．４７１．０８２０．３４２（ｐｇ）ＣＴｐｍｏｌ／Ｌ０．０９１０．１５０．０６＋０．０１０．０８±０．１０１．１８００．３１１（）＊ｍ＾２５０ＨＤ３ｎ／Ｉ４０．７０±８．６２３４．５２±７．３９１５．７０１３．７３１４０．６０９０．００１（ｇ）＊＊°ＴＲＡＰ（Ｕ／Ｌ）６．４４＋０．５３氏７５±０．６３６．７７±０．６２４．４４７０．０１４＃°Ｃａ（ｍｍｏｌ／Ｌ）２．２５±０．１１２．扣±０．０８２．３化０．０８９．５６６０．００１Ｐ（ｍｍｏｌ／Ｌ）１．０６±０．１６１．０８±０．０９１．０４劫．０９０．９３１０．巧７Ｄ＜＃与ＮＣ组相比／Ｐ０．０５；与ＤＭ组相比，Ｐ＜０．０５；与ＤＰ组相比，ｆ＜０．０５。２．４．二分类ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析；（见表５）ＷＯＰ是否发生作为因变量，抓Ａｌｅ、年龄、Ａｐａｌ、ＢＧＰ、２５０ＨＤ３、ＢＭＩ、ＴＲＡＰ、Ｃａ为协变量，采用二分类ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析：年龄、ＢＭＩ、ＡｐａｌＡ／Ａ、＝ＢＧＰ、２５０皿３有统计学差异（Ｐ＜０．０５），其中年龄（ＯＲ１．０９９）、＝＝ＨｂＡｉｃ（ＯＲ１．１８４）、ＡｐａｌＡ／Ａ（０艮１．７％）为骨质疏松发生的危险因素，而ＢＭＩ＝＝＝（ＯＲ０．８０４）、ＢＧＰ（〇民０．２１８）、２５０ＨＤ３（ＯＲ０．２５２）是骨质疏松发生的保护因素。表５二分类ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析因素Ｂ值ＳＥＰ值ＯＲ值％％ＣＩＨｂＡ－Ｕ５ｌｃ０．１６９０．６１１０．０１６１．１８１．０３Ａａ－ｐｌＡ／Ａ０．５３３０．拍３０．０３８１．７３０．９２３．２７ＢＧＰ－－１．５２４〇ｊ３４０．００４０．２１０．０７０．６２－ＷＯＨＤＳ０－１．３７７０．６７２０．０４０．２５０．０６０．９４－０．０９４００２８００１９１４年龄．．０１．０．０１．１６－ＢＭＩ０－．２１８００９３０．０１９０８００７．．．６０．％２９ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文３：．讨论３－．１ＶＤＲ基因多态性与糖尿病骨质疏松：ＶＤ民基因位于人类的１２ｑｌ２１４，包含１１个外显子，全长７５Ｋｂ。运用限制性片段长度多态性技术的研究发现与骨代谢相关的ＶＤＲ基因多态性（ＶＤＲＧｅｎｅＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ）分别对应ＢｓｍＩ，ＡｐａＩ，ＴａｑＩ和ＩＭｌＦｏｋＩ的酶切位点。自从Ｍｏｒｒｉｓｏｎ等的研究表明维生素Ｄ受体与骨密度有相关性；１（＾来，在有关骨质疏松的遗传候选基因的研究当中关于维生素Ｄ受体基因的，研究最为广泛。近年的研巧结果显示，维生素Ｄ不仅在调节骨和矿物质代谢中起重要作用，而且还与多种慢性疾病密切相关，基础研究发现，维生素Ｄ及其活性代谢物参与炎性反应和免疫调节的过程。临床研巧发现，高血压、肥胖、也血管疾病和糖尿病等现代流行病的发生与发展与维生素Ｄ及其活性代谢物有不可分割的联系。族岛细胞上存在维生素Ｄ受体及维生素Ｄ依赖性巧结合蛋白。维生Ｐ素Ｄ作为糖尿病的影响因子己成为近年来研究的新领域及研究热点。ＰＳ１±耳其学者对１３６名绝经后女性的Ａｐａｌ位点的ＶＤＲ基因多态性进行分析发现Ａｐａｌ位点的多态性是决定绝经后女性的腰椎骨密度水平的重要的遗传ＰＷ。ｅｒＡＤ受体因素但荷兰的ＵｉｔｌｉｎｄｅｎＧ等在对欧洲９个研巧小组关于维生素基因多态性与骨密度相关性研巧的菩萃分析发现，所有ＶＤＲ位点发生骨折的比－００－ＩＣ值比（０民值）接近１．（０．９８１．０２，９５％０．９４ｌ．０７），提示包括Ａｐａｌ在内的ＶＤＲ基因多态性与骨折发生或骨密度无相关性。而近期波兰学者对伴有骨质疏松症的绝经后５０１名女性ＶＤＲ基因多态性与骨密度及骨折情况相关研究。发现Ａｐａｌ位点中的ａ型与非椎体性骨折的发生显著相关（／Ｍ）．０２１）。但ＶＤＲ基Ｐ８ＰＷ一１因多态性与骨密度无显著相关性。这结论与日本、黎己嫩等地研究结论一致一。但值得注意的是，中国与欧美及亚洲其他国家在这位点的研究结论存在差异。染军伟等通过观察山东地区汉族人群维生素Ｄ受体基因ＡｐａＩ多奈性分布发现发现ａａ基因型在腰椎（户＜０．０５）、ｗａｒｄｓＨ角（ｆ＜化０５）骨密度较低，提示维生素Ｄ受体基因ＡｐａＩ酶切位点多态性在决定个体骨质疏松症遗传易感性方面起重要作用ｌＷＶＤＲ。ＬｉＹ等对包括４０７５名中国汉族女性在内的２５项涉及Ａ＇ｐａｌ位点的基因型和腰椎、颈椎、股晉粗隆或ＷａｒｄｓＨ角的骨密度之间的相关性的研究进行芸萃分析，在绝经后女性中，腰椎的曾密度在ＡＡ和Ａａ型中有显＝２Ａａ和ａＰ＝著的差异ＣＰ０．０１，股晉粗隆的骨密度在ａ型中有显著地差异（）３０ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文化０００）。提示在中国绝经期后女性的ＶＤＲＡｐａｌ位点多态性中杂合子基因型组具有更高的骨密度。目前国内关于Ａｐａｌ位点对骨代谢和骨密度的影响是较为确切的。对于国内外研究结果的差异提示Ａａｌ位点多态性对骨密度的作用可能存在ｐ种族差异。本研究显示糖巧病骨质疏松症组Ａ／Ａ基因型分布频率明显高于其他两组（糖％％％＝６６正常对照组巧．０户．０）。尿病骨质疏松姐．７，３，糖尿病骨量正常组．０，００５Ｗ而崔木绪等对山东青岛地区糖尿病患者维生素Ｄ受体基因Ａｐａｌ位点研巧发现Ｃ／Ｃ基因型在骨量减少和骨质疏松患者中分布频率显著高于糖尿病骨量正常者（骨量减少组６３．３％，骨质疏松组７３．５％，骨量正常组４１．３％，户＜０．０５），骨量减少和骨质疏松患者Ｃ／Ａ基因型分布频率湿著低于胥量正常者（骨量减少组一２６－．７％．，８％，０．０５。Ａａ，骨质疏松组％５％骨量正常组４４．Ｐ＜）这差别提示ＶＤＲｐｌ位点基因多态性对骨代谢的影响可能存在地区差异。本研巧对各基因型亚组临床和实验室数据进行比较盾发现Ａ／Ａ组中Ｓｃｒ、ＣＴ均显著高于其他组别＜一０．０５）。这结果提示昆明地区化族人群维生素Ｄ受体基因ＡｐａｌＡ／Ａ可能通过肾脏ＶＤ民受体导致肾小球对巧的滤过增加及重吸收减少引起尿巧增加、血巧水平下降，血巧不足刺激降巧素分泌增加。但患者血钩水平与其他细别并无蟲著差异，推测可能与云南昆明高原地区丰富日照起到了补偿作Ｗ一用，这与连星婢的结论致。我们的研究还发现，２型糖厥病合并骨质疏松组的年齡大、病程长、体重轻、膜岛细胞功能差、空腹血糖控制不佳。研究表明位于骨组织Ｗ及成骨细胞的膜Ｐ岛素样生长因子１受体可与族岛素特异性的结合，而成骨细胞表面也存在膜岛素受体，膜岛素在调控成骨细胞增殖与骨胶原的合成的同时，还可促进肾小管对巧憐的重吸收。因此，族岛素不足或外周组织对膜岛素的抵抗是糖尿病性骨质疏松发生的重要原因可见糖尿病对骨质疏松的影响是多方面的，糖尿病的积极治疗对于预防骨质疏松症的发生有重要意义。而关于血脂与骨代谢的关系目前仍存在争化国内林东平等发现中青年糖尿病患者ＨＤＬＣ－Ｃ增加可能与骨密度降低存一Ｗ５Ｉ在定的关系，张秀珍等对２型糖尿病伴曾质疏松症患者的血脂谱进行分ｔＷｒ析后并未发现血脂与骨质疏松存在相关性，而国外学者Ｂｏｄｅｕｒ的研巧表明ＨＤ＾Ｃ－Ｃ可Ｗ减少脂质氧化对成骨细胞的影响。提示对血脂与骨质疏松关系的３１ 尾明医科大学硕±研巧生学位论文研究还需要从细胞分子水平加！多方面的研究。３．２骨代谢指标检测：４７１１３．２．１骨巧素（ＢＧＰ）糖尿病组低于正常对照组，差异具有统计学意义，与陈宾、甘利萍朱敏洁等的研究结果一致。骨巧素是细胞内非胶原蛋白的主要成分，由成骨细胞分泌其主要生理功能是维持骨的矿化速率糖尿病患者骨质疏松，，的发生率高于正常人满尿病骨质疏松骨密度降低且ＢＧＰ也降低，可能与膜岛素水平降低对刺激成骨细胞的作用减弱有关。３．２．２正常对照姐抗酒石酸酸性磯酸酶（ＴＲＡＰ）浓度明显低于糖尿病骨量正常及５ＷＰ１１Ｉ骨质疏松组，提示糖尿病患者骨吸收増加。与国内陈玲、王燕等的研巧结一致一论。抗酒石酸酸性磯酸酶（ＴＲＡＰ）是反映骨吸收的重要标志物之，糖尿病患者存在膀岛素绝对或相对缺乏，可引起机体Ｈ大营养物质代谢奈乱，巧、憐、镑等微量元素代谢障碍导致骨量减少和骨的微细结构破坏，骨吸收过趕増加，最终导致骨强度减低、骨脆性增加，引起骨折。０册３一３．２．３２５糖尿病组低于正常对照组，差异具有统计学意义。送结论与北ＩＳ６１脚ＩＳＳ］５４１１、京、山东、新西兰瑞典等不同地区、种族、年龄及性别人群中维生一Ｄ缺乏素Ｄ与糖尿病关系研巧结果相致，即维生素与糖尿病的发生存在相关性。其可能的机制为：维生素Ｄ受体不仅存在于麻道，还存在于膀岛Ｐ巧胞等多种组织细胞，因此维生素Ｄ调节巧、磯代谢外，在膜岛素分泌、淋己细胞和巨隆细胞功能等多种方面起作用，因此对糖脂代谢、炎症反应等均发挥调节作用，糖尿病ＳＳＤＲＤＩ１患者族岛Ｐ细胞受损，Ｖ受体信号转导障碍，维生素合成减少。３，．２．４正常对照组血巧水平低于糖尿病及糖尿病骨质疏松组差异具有统计学意ｓ义ｔｗ－。本研究结论与动物实验结果致，其的机制可能为糖尿病性骨质疏松加５７速骨吸收Ｉ１的研究结论也与本实，骨溶解增加导致血巧升高。吉林地区刘锐等验结论相符，他们在对吉林地区男性２型糖尿病患者骨质疏松症相关因素分析发＞＜现正常对照组较２型糖尿病患者血清巧离子显著降低（ｉ０．０１），提示血清巧是早期诊断糖尿病性骨质疏松症的重要指标。但国内外其他地区并未发现相同的研究结论，存在送种差异的原因是多方面的，，首先受研究对象糖保病和骨质疏松症的患病时间不同，骨吸收及骨质破坏程度亦有不同；其次，受研究对象饮食习惯也存在较大差异，即饮食巧的摄入量不同；再次，受研究对象患病后的治疗时３２ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文一间及效果也存在个体、性别、种族及地区差异，因此仍需要更多研究进步探讨。一骨质疏松症的发生是个渐进的过程，骨代谢标志物的改变要早于ＢＭＤ，早期骨密度测定联合骨代谢标志物的检测，能更全面的反映骨形成与骨吸收功能的状态。结论：（１）－ａＡ昆明地区汉族２型糖尿病人群中ＶＤＲＡｐｌ／Ａ基因型与骨质疏松存在相一关性，对骨质疏松的发生有定的预测价值；（２）昆明地区汉族２型糖尿病患者ＢＭＩ、ＢＧＰ、２５０ＨＤ３是骨质疏松发生的保护因素，年龄、ＨｂＡｃ。ｉ是骨质疏松症发病的危险因素３３ 昆明居科大学硕±研究生学位论文参考文献ＹａｎｇＷＹ，ＬｕＪＭ，Ｗｅｎｇ舟，ｅｔａｌ．ＰｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆｄｉａｂｅｔｅｓａｍｏｎｇｍｅｎａｎｄｗｏｍｅｎｉｎＣｈｉｎａＭｅ－Ｎｌ１０３６２：１１１？ＥｎｇＪｄ２０ｎ０９００１．阴，，（）ｏｌｃｋＭＦａ－２Ｈｉ．Ｖｉｔｍｉ打Ｄｄｅｆｉｃｉｅｎｃｉｙ］．ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ，２００７，３巧（３）；２６６２８１．［］口ＡＫｈ－Ｎａｓｉｉｎ３ＮａｓｓｅｒＭ．ＡＯｍａＳ．ｌｉｄＭ．ＡｄｄＫｈｔｌ．ＡｉｔｉｏｎｆＶＤＲｅｎｅ［］，ｒ，ａｒｕａｎ，ｅａｓｓｏｃａｏ，ｇｖａｒｉａｎｔｗｉ化Ｄｓｆａｃｔｏｒｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｅｔａｂｏｌｉｃｓｎｄｒｏｍｅｔｅ２出ａｂｅｔｅｓａｎｄｖｉｔａｍｉｎｄｅｆｉｓｒｅｍｙ，ｙｐｃｎｃｅｅ１－：１ｉｅｙＪ．Ｇｎ２０４５４２１２９３３［］，（）４连星婢，孟增东．不同地区光照量与人体维生素Ｄ水平及骨密度么间的关系阴．中华骨［］２（０－：１６５质疏松杂志，２０１，１８２）８３１８７１．，５．罗德军．［］，魅宏斌，周旭国内不同海拔地区中老年妇女骨质疏松的比较研究阴中国骨质２０１０－疏松杂志，１６２１０５１０８１１２．，（），阀ＮｏｒｍａｎＡＷ，ＦｒａｎｋｅｌＪＢ，Ｈｄ出ＡＭ，巧ａｌ．Ｖｉｔａｍｉｎ口ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｉｎｈ化ｉｔｓｐａｎｃｒｅａｔｉｃｓｅｃ－ｒｅｔｉｏｎｏｆｉｎｓｕｌｉｎＪ．Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９８０１５，２０９４４５８：８２３８２５．［］，（）７Ｂｒｒｅ－ＤｕＢｏｕｌｏｎＰＭＦａｕｓｓｅｒｔＡｉｌｌａｕｄｅｌ艮．Ｔｈｅｄｅｎｏｖｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｎｕｍｅｒｏｕｓｒｏｔｅｉｎｓｉｓ［］，，ｐｄｅｃｒｅａｓｅｄｄｕｒ－ｉｎｖｉｔａｍｉｎＤ３ｄｅｆｉｃｉｅｎｃａｎｄｉｓｒａｄｕａｌｌｒｅｓｔｏｒｅｄｂＩ２５ｇｙｇｙｙ，ｄｉｈｙｄｒｏｘｙｖｉｔａｍｉｎＤ３ｒｅｐｌｅｔｉｏｎｉｎｔｈｅｉｓｌｅｔｓｏｆＬａｎｇｅｒｈａｎｓｏｆｒａｔｓＪ．ＪＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌ，１９９９，［］１６２－：１０１０９．１Ｗ＂ｒ［８ＺｅｉｔｚＵ，ｅｂｏＳｏｅｉａｔｏＤＷ，ｅｔａｈＩｍｉｒｅｄｍｓｕｌｉｎｓｅｃｒｅｔｏｒｃａａｃｉｔｉｎｍｉｃｅ］ｇｐａｙｐｙｉｉ１－ｌａｃｋｉｎｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｖｔａｍｎＤｒｅｃｅｔｏｒＪ．ＦＡＳＥＢＪ２００３７３：０９５１１．ｇ，，）５ａｐ［］（［９］ＫｈａｎＨ，ＫｕｎｕｔｓｏｒＳ，ＦｒａｎｃｏＯＨ，ｅｔａｌ．ＶｉｔａｍｉｎＤ，ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓａｎｄｏｔｈｅｒｍｅｔａｂｏｌｉｃｍａｃ—＊ｏｕｔｃｏｍｅｓｒｅｖｒｏｓｅｃＪＰ：ａｓｓｔｅｔｉｉｅｗａｎｄｍｅｔａａｎａｌｓｉｓｏｆｐｐｔｉｖｅｓｔｕｄｉｅｓ［］？ｉｏｃＮｕｔｒｙｙ－Ｓｏｃ，２０１３，７２（１）：８９９７．１０侯丽君，唐先格，开文波．糖耐量减低患者维生素Ｄ、维生素Ｄ受体基因ＦｏｋＩ多态［］－，２０１４２２６５８９．中国糖尿病杂志７（７）：５８．性与膜岛素抵抗的相关性研究机，，［１１］Ｎｏｓｒａｔａｂａｄｉ民，ＡｒａｂａｂａｄｉＭＫ，ＳａｌｅｈａｂａｄＶＡ，ｅｔａｌ．ＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓＷ細ｉｎｅｘｏｎ９ｂｕｔ打ｏｔｉｎｔｒｏｎ８ｏｆｔｈｅｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒａｒｃａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｔｈｅｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｉｃｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏ打ｏｆ－２Ｉ１０－ｔｙｐｅｄｉａｂｅｔｅｓ…？ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔｉｃｓ２０，３７：４巧４９７．［ｎ］ＳｐｅｅｒＱＣｓｅｈＫｊＷｉｎｋｌｅｒＱｅｔａｌ．ＯｅｓｔｒｏｇｅｎａｎｄｖｉｔａｍｉｎＤＫｃｅｐｔｏｒ（ＶＤＲ）ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ－ａｎｄ化ｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＥｒｂＢ２ａｎｄＥＧＦｒｅｃｅｐｔｏｒｉｎｈｕｍａｎｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒｓ．Ｅｕｒｏｅａｎ口］ｐ３４ 昆明医科大学硕±研究生学位论文Ｊｏｕｒｎａ４６３－ｌｏｆＣａｎｃｅｒ，２００１巧：１１４６８．，３ＹｅＷＺ民ｅｉｓＡＦｕｂｏｉｓＬＤｅｔａｌ．ＶｉｔａｍｉｎＤＫｃｅｔｏｒｅｎｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍｓａｒｅ。］，，Ｄ，ｐｇｐｙｐａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｏｂｅｓｉｔｙｉ打ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｉｃｓｕｂｊｅｃｔｓｗｉｔｈｅａｒｌｙａｇｅｏｆｏｎｓｅｔ．ＥｕｒｏｐｅａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＥｎｄｏｃｒｉｎｏ１４１８１—ｌｏｇｙ２００１５：１％．，，一１４兵２．李養敏．型糖尿病易感性的研究饥［］，缪祇鲁，等维生素Ｄ受体基因多态性与２００５－１５７９８９９２中国现代医学杂志：９．，，（）［１５］ＬｉＬ，ＷｕＢ，ＬｉｕＪＹ，ｅｔａｌ．ＶｉｔａｍｉｎＤＲｅｃｅｐｔｏｒＧｅｎｅＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓａｎｄＴｙｐｅ２－－口ｉｔｅｓＡＪ．０１２３５２４１ａｂｅＭｔａａａｌｓｉｓＡｃｈｉｖｅｓｏｆＭｅｄｉｃａｌＲｅｓｅａｈ，４４３：：ｅｎｙ［ｒｒｃ］口）６一徐加蓉．２Ｕ］，鲁兵，耿厚法等维生素Ｄ受体基因多态性与型糖尿病发病的关联，工程研巧与临床康２００７１１３０：５８８１－５８８３阴．中国组织．氮，（）１７ＤｉｌｍｅｃＦＵｚｅｒ．ｍｏｒＥＡｋｋａｆＦｅｔａｌＤｅｔｅｃｔｉｏｎｆＶＤＲｅｎｅＡａｌａｎｄＴａＩｏｌｈｉｓｍｓ［］，，ａ，ｏｇｐｑｐｙｐ－ｉｎａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｔｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓｍｅｌｌｉｔｕｓｕｓｉｎＰＣＲＲＦＬＰｍｅｔｈｏｄｉｎａＴｕｒｋｉｓｈｏｕｌａｔｉｏｎ．ｐｙｐｇｐｐＤｉ－Ｊｉ１４ａｂｅｔｅｓＣｏｍｌｃａｔｉｏｎｓ２６．ｐ，２００，：１８１９１。８］Ｎｏｓｒａｔａｂａｄｉ民，ＫａｚｅｍｉＡｒａｂａｂａｄｉＭ，ＡｋｂａｒｐｏｕｒＳＶ．ＶｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ２－ｉｎｔｅ２出ａｂｅｔｅｓｉｎｓｏｕｔｈｅａｓｔｅｒｎＩｒａｎｉａｎａｔｉｅｎｔｓ．ＬａｂＭｅｄ，２０１１，４２：３３４．ｙｐｐＯｈ—Ｃ１９ｉＤｍＪＹ，ＢａｒｒｅｔｔｏｎｎｏｒＥ．Ａ巧ｏｃｉａｔｏｎｂｅｔｅｎｉｔａｉｃｅｔｏｒｏｌｒｈｉｗｅｖｍｎｒｅｍｏｓ［］ｐｐｙｐ—ａｎｄｔｙｐｅ２ｃｉｉａｂｅｔｅｓｏｒｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｎｄｒｏｍｅｉｎｃｏｍｍｕｎｉｔｄｗｅｌｌｉｎｏｌ舶ｒａｄ山ｔｓ：化ｅｙｙｇ—民抑ｄｉｏＢｅｒｎａｒｄｏＳｔｕｄ［Ｔ，００２，５１６３巧ｙ＜］．Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ２３：３５．（）２０ＨｉｔｍａｎＧＡ，ＭａｎｎａｎＮ，ＭｃＤｅｒｍｏｔｔＭＦ，ｅｔａｌ．ＶｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅ［］ｐｇｏｌｒｉｓｍｓｉｎｆｌｕｅｎｃｅｉｎｓｕｌｉｎｓｒｉｎＢｓｈｓｉａ？ａｂｅｅｓ，，ｐｙｍｏｐｈｅｃｅｔｉｏｎａｎｇｌａｄｅｉＡｎｓ［Ｊ］口ｉｔ１９９８４７４－６６（）：８８９０．口。ＷａｎｇＳＱＬｉｕＪＨ，ＨｕＳＱ，巧ａｌ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｖｉｔａｍｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｗｉｔｈｉｉ２００３４－ｉｄｉｏａｔｈｉｃｈｅｒｃａｌｃｅｍａＪ．ＣｈｎａＪＭｏｄｅｍＭｅｄ１３：４７．ｐｙｐ［］，，（）２、巧霍木绪．维生素Ｄ２型糖尿病相，刘芬，陈希平等受体基因多态性与糖耐量异常［＾关性研究Ａ．潍坊医学晓学报２００８３０１：４７４９．［］，，，－－ＤＮＭＡ－ＡＯＳｒＡｅ口引ＡＩａｇｈｒｉｌｔｔａｓ，Ａｌｋｈａ，ｅｔａｌ．ｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆＶＤＲｇｅｎｖａｒｉａｎｔｓ，ｆｙＫＭｗｉｔｈｆａｃｔｏｒｓｒｅｌａｔｅｄ化ｔｈｅｍｅｔａｂｏｌｉｃｓｙｎｄｒｏｍｅ，ｔｙｐｅ２ｄｉａｂｅｔｅｓａｎｄｖｉｔａｍｉｎＤ口－ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ？Ｇｅｎｅ２０１４Ｊｕｉｉ５４２２：９巧．阴，；〇）２４３１张珍，刘春燕，王昕怡等？维生素Ｄ对膜岛功能的调控作用机中国全科医学，２０１６［］，４－１（）；１４０４４０７．３５ 昆明医科大学硕立研巧生学位论文２５ＨｏｎｅｎＥ，ＰｏｗｅｒＣ．ＶｉｔａｍｉｎＤｓｔａｔｕｓａｎｄｌｕｃｏｓｅｈｏｍｅｏｓｔａｓｉｓｉｎｔｈｅ１９５８Ｂｒｉｔｉｓｈｂｉｒｔｈ［］ｙｐｐｇｃｏｈｏｒ－ｒｔｏｆｅＤｉ油ｅｔｅ２００６０２２４４２２４６：ｔｈｅｏｌｅｏｂｓｉｔｙ．ｓＣａｒｅ２９１．阴，，（）［２６］ＫｈａｌｅｅｌｉＡＡ，ＪｏｈｎｓｏｎＪＮ，ＴａｙｌｏｒＷＨ．Ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅｏｆｇｌｕｃｏｓｅｉｎｔｏｌｅｒａｎｃｅｉｎｐｒｉｍａｒｙｈｙｐｅｒｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｉｓｍａｎｄｔｈｅｂｅｎｅｆｉｔｏｆｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｅｃｔｏｍｙ［Ｊ］．ＤｉａｂｅｔｅｓＭｅｔａｂＲｅｓ２００７２３－Ｒｅｖｌ：４３４８．，，（）口７］ＭａｅｓｔｒｏＢ，ＤａｖｉｌａＮ，ＣａｒｒａｎｚａＭＣ，ｅｔａｌ．ＩｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｓｐｏｎｓｅｅｌｅｍｅｎｔＭ２００３ｉｎｔｈｅｈｕｍａｎｉｎｓｕｌｉｎｒｅｃｅｐｔｏｒｅ打ｅｒｏｍｏｔｅｒ［Ｊ］？ＪＳｔｅｒｏｉｄＢｉｏｃｈｅｍｏｌＢｉｏｌ，，ｇｐ８４（２）２２３－２３０／３：．口８］ＢｅａｕｌｉｅｕＣ，ＫｅｓｔｅｋｉａｎＲ，ＨａｖｒａｎｋｏｖａＪ，巧ａｌ．Ｃａｌｃｉｕｍｉｓｅｓｓｅ打ｔｉａｌｉｎｎｏｒｍａｌｉｚｉｎｇｏｒｅｃｏｓｅａｃｃｏｍａｎｅｓｖａｍｎＤｅｅｔｖＪ］ｅｅｓ＊３．ｉｎｔｌｅａｎｃｔｏｇｌｕｔｈａｔｐｉｉｔｉｄｐｌｉｏｎｉｎｉｖｏ［．Ｄｉａｂｔ１９９４２（１－）：３５４３．口刊ＢａｅｌｃｅＦＧｓｅｍａｎｓＣＫｏｒｆＨ巧ａｌ．Ｖｉｔａｍｉｎｉｎｓｕｆｉｃｉｅ扫ｃ：ｉｍｌｉｃａｔｉｏｎｓｆｏｒｔｈｅｉｍｍｕｎｅ，ｙ，，ｙｐｓｔｅｉａｈｒｏｌ－ｓｔｒＮｅ，２０１０，２５（９）！１７１６０ｙｍ［Ｊ］．Ｐｅｄｐ巧６．口０］ＣｈｅｎＱ，ＢｏｕｃｈｅｒＢＪ，ＬｅｕｎＰＳ．ＭｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｈｙｐｏｖｉｔａｍｉｎｏｓｉｓＤ－ｉｎｄｕｃｅｄｉｓｌｅｔｇｇｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｉｎｓｕｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｈｒｏｕｇｈｄｉｒｅｃｔｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏ打ｏｆｔｈｅｐａｎｃｒｅａｔｉｃｉｓｌ巧ｒｅｎｎｉｎ－ｎｎ－ａｉｏｔｅｎｓｉｓｓｔｅｍｎｍｃｅａｂｅ２０１３３：５３ｇｉｉ［Ｊ］．Ｄｉｔｏｌｏｇｉａ，５６（）５５６２．ｙ，－３１林寞东，高健，马慧等．中老年人群２５疑维生素Ｄ与代谢综合征关系的研究［Ｊ］．中华［］－内分泌杂志，２０１３２９：８４０８４５．，－－３ａａｌＪｄｅＢｈｔｉ．Ａｄｌｂｌｉｉｌｔｒｏｌｌ［巧Ｎｇｐ，ＰａｎＪＮ，ａｒａＡｏｕｂｅｎｄ？ｒａｎｄｏｍｚｅｄ？ｐａｃｅｂｏｃｏｎｅｄ■ｔｒｉａｌｏｆｔｈｅｓｈｏｒｔｔｅｒｍｅｆｅｃｔｏｆｖｉｔａｍｉｎ口３ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｎｉｎｓｕｌｉｎｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｉｎａｒｅ－００９６ｐｐａｎｔｌｈｅａｌｔｈ，ｍｉｄｄｌｅａｇｅｄ，ｃｅｎｔｒａｌｌｏｂ的ｅｍｅｎ［Ｊ］？ＤｉａｂｅｔＭｅｄ，２，２ｙｙｙ－（１）：１９２７．口３］ｖｏｎＨｕｒｓｔＰ民，ＳｔｏｎｅｈｏｕｓｅＷ，ＣｏａｄＪ．ＶｉｔａｍｉｎＤｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔａｔｉｏｎｒｅｄｕｃｅｓｉｎｓｕｌｉｎｗｏｍ＊ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎＳｏｕｔｈＡｓｉａｎｅｎｌｉｖｉｎｇｉｎＮｅｗＺｅａｌａｎｄｗｈｏａｒｅｉｎｓｕｌｉｎｉｅｓｉｓｔａｎｔａｎｄ－－１ｖｉｔａｍｉｎＤｄｅｆｉｃｉｅｎｔａｒａｎｄｏｍｉｓｅｄ，ｐｌａｃｅｂｏｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄｔｒｉａｌ［Ｊ］．ＢｒＪＮｕｔｒ，２０１０，０３（４）４９－５５５：５．口句ＭＯＲＲＩＳＯＮＮＡ，ＹＥＯＭＡＮ民，ＫＥＬＬＹＰＪ，ｅｔａｌ．Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓａｃｔｉｎｇｆａｃｔｏｒａｌｌｅｌｅｓｔｏｎｏｒｍａｌｈｓｉｏｌｏｉｃａｌｖａｒｉａｂｉｌｉｔ：ｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍａｎｄｐｙｇｙｐｇｐｙｐｃｒｃＰＡ１＂ｉｕｌａｔｉｎｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎ．ｒｏｃＮａｔｌｃａｄＳｃｉＵＳＡ１９９２８９：６６６５６６６９．ｇ，，（巧巧［３５］ＤｕｎｄａｒＵ，ＳｏｌａｋＭ，ＫａｖｕｎｃｕＶ，ｅｔａＬＥｖｉｎｄｅｎｃｅｏｆａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒＡｐａｌ３６ 昆明展科大学硕±研究生学位论文ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｗｉｔｈｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙｉｎｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌｗｏｍｅｎｗｉｔｈｓｅｏＪｏ２００９２８－ｏｔｏｒｏｓｉｓ．ＣｌｉｎＲｈｅｕｍａｔｌ〇：１１８７９１．ｐ［］，，ｙ）口６］ＵｉｔｔｅｒｌｉｎｄｅｎＡＱ民ａｌｓｔｏｎＳＨ’ＢｒａｎｄｉＭＬ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏ打ｂｅｔｗｅｅｎｃｏｍｍｏｎｖｉｔａｍｉｎｒｅｃｅｓｓｒｏｓ－－Ｄ：ａａｉｃｅｖｅｅａｓｎｎｐｔｏｒｇｅｎｅｖａｒｉａｔｉｏｎａｎｄｏｔｅｏｐｏｉｓｐｒｔｉｐａｎｔｌｌｍｔａｎａｌｙｉｓＪ．Ａ［］虹ｔｅｍＭｅｄ２００６５０４。－６４１４５５．，，（）７Ｈｏｒｓ－ｒｓＤｅＪＷａｗｒｚｎＡｅａＶａｍｎｅｃｅｅｎｅｏｏｒｍｓｔＳｉｋｏｋａＷｔｆｌｄｉａｋｔｌ．ｉｔｉＤｒｔｏｒｌｉｓ口’ｙ，，ｐｇｙｍｐｈ，］ｙｐｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙａｎｄｆｒａｃｔｕｒｅｓｉｎｏｓｔｍｅｎｏａｕｓａｌｗｏｍｅｎｗｉｔｈｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓＪ．Ｍｏｌｐｐｐ［］ｅ２０１３０１－Ｂ：ｉｏｌＲ４０３８３９０．ｐ，，（）口８ＭｅｒｉｔａＡ，ＩｋｉＭ，Ｄｏｈｉ义ｅｔａｌ．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅ打ｓｉｔｙｆｒｏｍｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒ］ｐｏｌｍｏｒｈｉｓｍｓｉｓｕｎｃｅｒｔａｉｎｉｎｒｅｒｅｓｅｎｔａｔｉｖｅｓａｍｌｅｓｏｆＪａｐａｎｅｓｅＷｂｍｅｎ．ＴｈｅＪａｐａｎｅｓｅｐｙｐｐｐ－ＰａＯｓｅｏｏｒｏｕｄｎＪ－ｏｕｌｔＥｅｍｏ２００４０：９ｉｏｎｂａｓｅｄｔｐｓｉｓＳｔＪＰＯＳＪ．Ｉｔｐｉｄｉｌ３３５７９８８．ｐｙ（）［］，，（）口刊ＡｒａｂｉＡ，ＭａｈｆｏｕｄＺａｈｅｄＬ，ＥｌＯｎｓｉＬ：约ａｌＥｆｅｃｔｏｆａｇｅ，ｇｅｎｄｅｒａｎｄｃａｌｃｉｏｔｒｏｐｉｃｈｏｒｍｏｎｅｓｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｏｌｙｍｏｒｈｉｓｍｓａｎｄｂｏｎｅｐｐｎ－ｅｒａｅｎｓｒｏＪＣＮｉｎ２０００４９１ｍｉｎｌｄｉｔｙ？Ｅｕｏｆｌｉｉｔｒｉｔｏ，１，６４：３巧．…（）４０楽军伟，骨质疏松症与维生素Ｄ受体基因多态性的相关性的．中國组织工趕研究与［］２０－临床康复，１１，１５（５０）：９４８６９４９０．４１ＬｉＹＡ巧ｏｃｉ汹ｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｉｓｍｓａｎｄｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌ［］，ｐｇｐｈｓｎｅｓｅ－ｄ抑ｗｏｍｅｎＪｏＢｏＲｅ２０１２：５７０１ｉｌｙｉＣｈｉｎ．ＭｌｉｌＭａ５９７．，ｙ；巧［ｊｐ（）４２．Ｊ蜜木绪，梁亮，杨荣等搪尿病患者维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松的相关性［，［］．］中国临床康复－，２００５，６，９（２３）：１７７１７９．［４３周智广攪尿病的骨量改变及其机理机．中園糖尿病杂志，１９９８，６：１７１．］巧境４４林东平，郭郁郁，周锡等．中青年２型糖尿病患者血脂与骨密度关系阴．中国骨质疏松［］０１３巧（）－：５５６０．杂志，２戊０６５７４５．张秀珍，王博，杨军等．２型糖尿病患者伴骨质疏松与血脂的关系［Ｊ中华骨质疏松和［］］－骨矿盐疾病杂志，２００８１０２：１０７。２，（）４６ＢｒａＢＦＤＬ－Ｃ３ｒｄｅｕｒＭＲｒｉｓｓｅｔｅａｌｓｔｒａｕｌｔＬ，巧ａｌ．Ｈｅｄｕｃ货化ｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏ凸加ｄ［］’ｋｅｍｘＬＤＬ－ｏｓｅｏｂｓｃｃｅｔａｂｏ：ｃｏｎａｍｏｄｕｌａｔｅｓ也ｅｍｌｉｓｏｆｏｉｄｉｚｅｄＣｂｙｔｌａｔｉｌｌｓａｒｏｔｅｔｉａｉｎｓｔｐｇｃｅ－ｌｌｄｅａｔｈＪ．ＣｅｌｌＢｉｏｃｈｅｍ２００８Ｄｅｃ１０５：１３７４８５．［，，］巧）［４７］陈宾，李裕华，张丽萍等．老年女性糖巧病骨质疏松症ＶＤＲ基因与血清ＢＧＰ的变化３３４０６－，２００４３（的）：４０７．町重庆医学，，３７ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文４８甘利萍，陈治卿，蒋广恩，等．老年糖尿病并骨质疏松血膜岛素与骨巧素及ＰＴＨ研巧［］Ｊ２００８１（１０００－７０３．中国骨质疏松杂志，４）：７．［］，４９．．朱敏洁Ｉ梁兴伦老年２型糖尿病并骨质疏松骨密度与血族岛素研究分析［Ｊ］中国医药［］－１０１）：２９指南，２０８（０２８．，５０２５ＶＤ水平在２型糖尿病患者的状况Ｊ陈玲．血ＯＨ．中国［，胡肇衡，纪立农清］骨质疏松］］（）［－杂志，２０１２８：７２８７３１．，２，刘岩，张伟暮绝经后型糖尿病患者骨质疏松影响因素及骨转换特点．印］王燕［Ｊ］中国－老年学杂志，２０１１３１（０９）１５０６１５０８．，：＇口引ＹｉｎＸ＾ｕｎＱ，ＺｈａｎｇＸ，ｅｔａｌ．Ｓｅｒｕｍ２５（ＯＨ）Ｄｉｓｉｎｖｅｒｓｅｌｙａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｍｅｔａｂｏｌｉｃ－ｓｒｏｍｅｒｉｓｋｒｏｆｉｒａｎｅｓｅｏｕａｏｎ．ＮｙｎｄｐｌｅａｍｏｎｇｕｂａｎｍｉｄｄｌｅｇｅｄＣｈｉｐｐｌｔｉ口ｕｔｒ］Ｊ２０１２１１：６８．），，－ＳｃｒａＲＳｏｗｅＭＢＤｎｄｅｔｈｎｉｃｉｔｌｌＣＳｅｒｕｍ２５ｈｄｘｖｉｔｉｎｄｉａｂｅｔｅｉｎ化口引ｊｒｓ，ｅ，ｙｒｏｙａｍ’ｓ，ａｙｅｇｇＴｈｉｒｄＮａｔｉｏｎａｌＨｅａｌｔｈａｎｄＮｕｔｒｉｔｉｏｎＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎＳｕｒｖｅｙ口］．ＤｉａｂｅｔｅｓＣａｒｅ，２００４，Ｄｅｃ，２７（１２：２８１３－８．））［５４］ＰｉｎｃｉｋｏｖａＴ，ＮｉｌｓｓｏｎＫ，ＭｏｅｎＩＥ，ｅｔａｌ．ＶｉｔａｍｉｎＤｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙａｓａｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｆｏｒｃｙｓｔｉｃｒｏｓ－ｎｆｉｂｉｓｒｅｌａｔｅｄｄｉａｂｅｔｅｓｉｔｈｅＳｃａｎｄｉｎａｖｉａｎＣｙｓｔｉｃＦｉｂｒｏｓｉｓＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＳｔｕｄｙＪ．［］－Ｄｉａｂｅｔｏｌｏａ１１Ｄ１２７１５ｉ２０ｅｃ５４：３００．ｇ，，（）口３ＣｈａｑａｓＣＥ，ＢｏｒｑｅｓＭＣ，ＭａｒｔｉｎｉＬＡ，巧ａｌ．Ｆｏｃｕｓｏｎｖｉｔａｍｉｎ０，化。ａｎｉｍａｔｉｏｎａｎｄｔｙｐｅ２出ａｂｅｔｅｓ［Ｊ］．Ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ，２０１２，４（ｌ）：５２－６７．一５一甄Ｉ沈稚舟．Ｊ．［巧徐，方京冲等糖尿病大鼠氧化氮与骨代谢变化的研巧［中华内分泌］００２３－代谢杂志，２：２２９２３１．，［５７刘锐，何成彦，徐冬岩等．男性２型糖尿病患者骨质疏松症相关因素分析［Ｊ．吉林大学学］］报（医学版），２０１０３６（２）：４０８４１１．，３８ 昆明医科大学硕±研究生学位论文综述维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松症相关性的研究进展杜思成，杨秋萍昆明医科大学第一附属医院糖尿病科６５００３２（，云南昆明）【摘要】，：骨质疏松是威胁人类健康的常见疾病目前的研究认为维生素Ｄ受体基因多态性是影响骨质疏松的关键因素之一ＶＤＲ基因多态性和骨质疏，本文对松的关系进行综述。【关键词】；骨质疏松症，维生素Ｄ受体，基因多态性ＲｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｇｅｎｅｐｏｌｍｏｒｈｉｓｍａｎｄｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓ．ｐｙｐｐ－ＤＵＳｉ－ｃｈｅｎＹＡＮＧｉｕｉｎｇ，Ｑｐｇ巧（Ｄｅｐｔ，ｏｆｄｉａｂｅｔｅｓ，Ｔｈｅ１ＡｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＫｕｎｍｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ６５００３２，Ｃｈｉｎａ）【ａｂｓｔｒａｃｔ】：Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓｉｓａｃｏｍｍｏｎ出ｓｅａｓｅｗｈｉｃｈｔｈｒｅａｔｅｎｉｎｇｈｕｍａｎｈｅａｌｔｈ，ｔｈｅｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｏｆＶｉｔａｍｉｎＤＲｅｃｅｐｔｏｒｈａｓｂｅｅｎｓｕｇｇｅｓｔｅｄａｓｔｈｅｋｅｙｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇｆａｃｔｏｒｏｆｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，ＴｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍａｎｄｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ．【ｋｅｙｗｏｒｄ】；ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，ｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ．目前研究认为维生素Ｄ受体基因多态性对骨质疏松症存在着影响，但维生素Ｄ受体基因不同位点多态性与骨质疏松症的关系从及影响机制在不同种族人辭中的研究结果仍然存在争议，本文对近年来的相关研究进行综述。１Ｄ．维生素受体的生物功能维生素Ｄ受体（ＶｉｔａｍｉｎＤＲｅｃｅｐｔｏｒ，ＶＤＲ）是核受体超家族的成员，主要介导维生素Ｄ对觀细胞的生物效用。ＶＤ民不仅分布于与骨、帮代谢有关的小肠、３９ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文、、，、腎和骨等组织，还存在于脑肝皮肤、牙齿等器官影响这些组织对巧磯的代谢—二哲。１２５维生素Ｄ３ｌ２５ＯＨ２Ｄ３］是体内生物活性最强的维生素Ｄ，［，（），活性形式的代谢产物，其作为配体与骨组织中的ＶＤ民结合后参与骨形成和骨吸收的代谢调。１，２５０Ｈ２，Ｄ３与维生素Ｄ结合蛋白ＤＢＰ转运到觀器官与ＶＤＲ结（）（）合，再与视黄酷Ｘ受体（ＲＸＲ）形成异二聚体（ＶＤＲＲＸＲ）后与维生素Ｄ反应姐件（ＶＤＲＥ）结合，对鞭基因的转录和翻译进行调控，进而实现其生物学功能。ＶＤＲ同时存在于成骨细胞和破骨细胞之中，因此ＶＤＲ对于骨代谢的调节作用是双向的，成骨巧胞的ＶＤ民可调控破骨细胞的ＶＤＲ，调控方向取决于ｌ；２５（ＯＨ）２，Ｄ３含量，既可抑制其增殖亦可促进其分化，从而对骨的合成和分解代谢起着双向调节作用一。这骨吸收和骨形成过程的动态平衡保证了正常的骨再建过程，对于维持骨骼健康具有重要意义。２．维生素Ｄ受体与骨质疏松研巧发现骨质疏松的发生与ＶＤＲ基因、雌激素受体（Ｅｓｔｒｏｇｅｎ民ｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＲ）基因３－、Ｐ肾上腺素能受体基因、巧敏感受体基因、降巧素受体基因和糖皮质激１１１Ｗ素受体基因等有关。自从Ｍｏｒｒｉｓｏｎ等的研究表明维生素Ｄ受体与骨密度有相关性Ｗ来，在有关骨质疏松的遗传候选基因的研巧当中，关于维生素Ｄ受体基因的研究最为广泛。２．１维生素Ｄ受体基因位点多态性与骨质疏松ＶＤＲ基因位于人类的１２号染色体长臂，包含１１个外显子，全长７５Ｋｂ。运用限制性片段长度多态性技术的研究发现与骨代谢相关的ＶＤＲ基因多态性ＶＤ民ＧｅｎｅＰｏｌｍｏｒｈｉｓｍ）分别对应ＢｓｍＩＡａＩＴａＩ和ＦｏｋＩ的酶切位点。（ｙｐ，ｐ，ｑＢｓｍＩ，ＡｐａＩ的识别位点位于第８内含子内，ＴａｑＩ的酶切位点位于第９外显子内，Ｐ１而Ｆｏ过的酶切位点位于基因的ｙ端。不同区域的多态性位点对ＶＤＲ基因表＞达的影响不同＜。５端引导块域内的多态性位点影响ｍＲＮＡ的表达，３端非翻译区的多志性位点影响ｍＲＮＡ的稳定性和蛋白质翻译的效率。２丄ＩＳｓｍｌ、Ａｐａｌ位点多态性与骨质疏松ｐｉｍｏｒｒｉｓｏｎ等研究发现，维生素Ｄ受体基因调控血清骨巧素浓度，骨巧素浓度生理性的差异与维生素Ｄ受体基因多态性有关：在ＢｓｍＩ中ＢＢ型的骨钩４０ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文＇－１－１３＜）Ａ素水平显著高于ｔ）ｂ型（３３３ｎ／ｍｌＶＳ３ｎ／ｎｉｌ，Ｐ０．０００１ａｌＡＡ型ｇｇ；在ｐ中骨巧素水平显著高于ａａ型，Ｐ＜０．００１。这可能与ｙ端调控ｍＲＮＡ稳定性和蛋Ｗａｓ－ＦａａｒｄｏＬ白质的翻译有关。Ｂｏｉ等对１３３名绝经后妇女（５４例骨质疏松症，ｊｊ２４例骨量减少，５５名正常对照）维生素Ｄ受体ＢｓｍＩ基因多态性分析显示：ＢＢ基因型在骨质疏松组中的出现率为５２％，对照組为２０％，提示ＢＢ基因型于骨质５６〇＂如１］疏松症存在相关性。而？等研究了１０４名健康青年男性的腰椎及股骨颈的＇骨密度与ＶＤＲ基因中ＢｓｍＩ与ＦｏＫＩ位点多态性的关系。发现在ＢＢ基因型血清中甲状旁腺激素水平较其他基因型显著上升，但只有当同时携带ｆ等位基因时，＇其骨密度值才出现明显低下，位于ＶＤＲ基因５端ＦｏｋＩ位点多态性影响ｍＲＮＡ的表达，对骨密度的影响较大，而ＢｓｍＩ位点多态性对骨密度的作用尚不明确。一饮食因素纳入分姐标准后发现ＢＢ组在将巧磯摄入量这，在低巧稱饮食组中，骨无机磯重吸收能力和血浆中无机磯的含量都明显降低，这提示了饮食因素与ＶＤＲ多态性对骨密度的共同影响。因此在研究ＶＤＲ基因与骨密度关系时，还应考虑到环境与食物因素。但维生素Ｄ受体ＢｓｍＩ位点基因多态性与骨质疏松症风险的墓萃分析发现高加索人和其他亚洲人群中，维生素Ｄ受体ＢｓｍＩ位点基因多态性与骨质疏松症易感性之间无相关性。国内针对不同人群的研究未发现该Ｗ＇＇ＵＩＷＩＩ位点与骨密度或骨代谢指针存在湿著相关性。此外，ＢｓｍＩ位于ＶＤＲＷ基因第８内含子内，内含子对翻译产物的结构无意义因此ＢｓｍＩ位点基因多态性对骨代谢的影响仍然存在争议。ｔｎｉＶＤＲ基因第８内含子位点Ａｐａｌ的研究：止耳其学者对１％名绝经后女性的Ａｐａｌ位点的ＶＤＲ基因多态性进行分析发孤与ＡＡ型相比较ａａ型绝经后女性腰椎骨密度较低，且血清巧水平明显较ａａ型女性高，这提示ＶＤＲ基因Ａｐａｌ位点的多态性是决定绝经后女性的腰椎骨密度水平的重要的遗传因素。但荷兰的ＩＵ１ＵｉｔｅｒｌｉｎｄｅｎＡＧ等在对欧洲９个研究小组关于维生素Ｄ受体基因多态性与骨密度相关性研究的尝萃分析发现，所有ＶＤＲ位点发生骨折的比值比（ＯＲ值）接—１（０９８－２９５１Ｃ１ａｌＶＤＲ．００．１．０％０．９４．０７）Ａ近，，提示包括ｐ在内的基因多态性与骨折发生或骨密度无相关性Ｍ。而近期波兰学者对伴有骨质疏松症的绝经‘后５０１名女性其中有２８５名女性有骨折病史（包括了１６８例椎体性骨折和１１７例非椎体性骨折）ＶＤＲ基因多态性与胥密度及骨折情况相关研巧。发现Ａｐａｌ位点４１ 昆明医科大学硕壬研巧生学位论文中的ａ型ＢｓｍＩ位点中的ｂ型和ＴａＩ位点中的Ｔ型与非椎体性骨折的发生显著相，ｑ关（其Ｐ值分别为０．０２１、０．０３２、化０２０）。ＶＤ民基因多态性与骨密度无显著相关性。日本项日本人口的骨质疏松症研究也显示ＶＤ艮基因多态性与骨密度及ｒａｂ－骨密度的改变无明显相关性。黎己嫩的ＡｉＡ等对２０３名６５８５岁老年人和３３６名０－１７１岁的儿童的维生素Ｄ受体基因多态性与骨密度相关研究后发现ＶＤＲ基因多态性并不是骨密度的影响因素。一但值得注意的是，中国与欧美及亚洲其他国家在这位点的研究结论存在差ｉｎｉ异。楽军伟等通过观察观察山东半岛没族人群维生素Ｄ受体基因Ａｐａｌ多态性分布发现，基因型频率分布依次为ａａ型占５３．ｌ％，Ａａ型占１０．６％，ＡＡ型占％．３％．年龄与不同部位骨密度值之间呈负相关（Ｐ＜０．０１），体质量指数与骨密度值之间呈正相关（Ｐ＜０．０１），在将年龄和体质量指数进行校正后发现ａａ基因型在腰椎（Ｐ＜０．０５）、ｗａｒｄｓＨ角（Ｐ＜０．０５）骨密度较低．运用巧检验分析骨密度正常组各基＝Ｐ＞化０５因型与骨质疏松性晉折组之间差异无显著性意义（Ｘ２４．７９５。这提示，）维生素Ｄ受体基因ＡｐａＩ酶切位点多态性在决定个体骨质疏松症遗传易感性方Ｐ８１面起重要作用。邵雪景等对南京地区１０５例汉族２型糖尿病患者维生素Ｄ受—体基因的Ａｐａｌ酶切位点多态性与２型糖尿病及血清１，２５二泻基维生素Ｄ１，［２５（ＯＨ）２Ｄ］进行分析后发现，Ａｐａ１位点的ＶＤＲ基因多态性与２型糖尿病存在相关性（ＰＣＯ．Ｏｌ）。基因型ＡＡ组及Ａａ组血清ｌ，２５（ＯＨ）２Ｄ３高于基因型ａａ组，而收缩压、舒张压及空腹血糖低于基因型ａａ组，且差别有显著性意义（Ｐ＜０．０５或ＩＷ０．０１。Ｌｉｙ等对包括４０７５名中国汉族女性在内的２５项涉及ＶＤＲＢｓｍＩ位点和）Ａ’ｐａｌ位点的基因型和腰椎、颈椎、股骨粗隆或ＷａｒｄｓＨ角的骨密度之间的相关性的研究进行尝萃分析，当苔萃分析局限于绝经前女性时，观察并未发现明显不＝同。而在绝经后女性中股骨颈的骨密度在ＢＢ和Ｂｂ型中有显著差异（Ｐ０．０３７），，ＡＡ和Ａ＝化腰椎的骨密度在ａ型中有显著的差择（Ｐ０１２），股骨粗隆的骨密度在Ａａａａ＝一和型中有显著地差异（Ｐ化０００）。这结果提示在中国绝经期后女性的一ＶＤＲＢｓｍＩ位点和Ａｐａｌ位点多态性与骨密度之间存在个适度而又有明显统计学相关性，即杂合子基因型组具有更高的骨密度。对于国内外研巧结果的差异提示Ａｐａｌ位点多态性对骨密度的作用可能存在种族差异，目前国内关于Ａｐａｌ位点４２ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文＾一对晉代谢和骨密度的影响是较为确切的，故送位点有望在今后成为我国在分子一水平诊断骨质疏松症的临床指标，值得进步关注。２丄２ＦｏｋＩ位点多态性与骨质疏松ＶＤＲ基因＇５端ＦｏｋＩ位点多态性影响ｍＲＮＡ的表达，该位点与骨密度之间ＰＷ的关系存在种族、性别及年龄差异。有学者研巧了欧洲离加索人１７７例健康绝经前妇女及１５５例青春期前女孩ＶＤＲ基因ＦｏＫＩ的多态性，并用双能Ｘ线吸收比色法测定腰椎、股骨颈和股骨干的骨密度，同时也考虑到每日食物中巧摄入量及年龄的关系。发现ＶＤＲ基因ＦｏＫＩ多态性的分布是ｆｌ５％、Ｆ朽０、ＦＦ３５％，没有发现ＶＤＲ基因ＦｏＫＩ多恣性和骨密度之间有明显的相关。只有当分析位点扩大至ＢｓｍａＩａａＩ和Ａｐ位点多态性时发现具有忧和基因型青春期前的女孩，中，ｆ基因型的脊椎骨密度显著地比ＦＦ低，而Ｆｆ基因型的脊椎骨密度值居中。Ｐｉ这提示ＦｏｋＤｌＩ位点与骨密度联系不显著。Ｗａｎｇ等在对１４项包括了３２４３名绝经后的健康亚洲女性的研究进行尝萃分析之后发现，ＶＤＲＦｏｋＩ位点中ｆ基因型＝０与腰椎ＢＭＤ下降存在相关性（ｆｖｓＦＦＰ．００１），在腰椎ＢＭＤ下降的ＢｓｍＩ位＝＝０一点中ｌ）ｂｖｓＢＢＰ０．５３１在Ａａｌ位点中ａａｖｓＡＡ，Ｐ．１１３，；ｐ这研究提示是ＦｏＫＩ位点而非ＢｓｍＩ和ＡｐａＩ位点的多态性和绝经后的亚洲女性的骨密度关系密切，印度带有Ｆｏ凹位点任基因型的绝经后女性表现出有风险的腰椎低ＢＭＤ（任ｖｓＦＦＰ＜０．００１）。即带有ｆ基因类型的部分亚洲绝经后女性存在较高的患一ｐｑ骨质疏松症的风险，但因其地区局限性结果仍需进。，相关步研巧证实韩昕等对北京地区男性维生素Ｄ受体基因ＦｏｋＩ多态性进行分析后发现，受试者维生素Ｄ受体基因ＦｏｋＩ的基因型及基因频率的分布为巧３６．９６％Ｆｆ４６．９６％，ｆ，＾６Ｈ－１．０沪／？ａｒｄＷｅｉｎｂｅｉ、，符合ｙｇ定律浪正年齡体质量、身高和体质量指数对骨密？巧岁年龄段男性任基因型组骨密度较ＦＦ＝度的影响后，４０，Ｆｆ基因型低（Ｐ０．０３７）．其余各年齡段、各部位任基因型組骨密度大多低于ＦＦ，Ｆｆ基因型，但差异无显著性意义Ｐ＞０５一．０ＦｏｋＩ，（），这提示多态性分型与骨密度之间可能存在定关联但该项检测对筛查男性骨质疏松症高危人群的意义需进一步研巧。２丄３ＴａｑＩ位点４３ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文３１芬兰的艮ｅｍｅｓ叶等采取对照、随机干预的方法对１４０名芬兰中年男性的ＶＤ民４（－）基因多态性与骨密度进行了为期年的研究，在测得腰椎腰２腰４、股骨颈、股骨近端的骨密度Ｗ及和ＶＤ民有关的骨转换指标（抗酒石酸酸性磯酸酶－５ｂＤＲ基因多态性Ｔａ活性，在随机抽，ＶＩ位、血清骨巧素浓度）后发现样中ｑＴ＝点为ｔ或行基因型的身高较ＴＴ型对象的高（Ｐ０．００１）。同时ＶＤＲ基因ＴａｑＩ位点多态性也被发现与骨密度之间存在相关性，Ｔｔ或ｔ基因型的股骨颈骨密度＝０一较ＴＴ型对的高（Ｐ．００３），这相关性在校正了股骨颈与身高的误差之后仍存＝在（Ｐ０．０２１）。但在其他部位骨密度和骨转换指针中并未发现ＶＤ民基因多态性一ＤＲ与之存在关联性。这结果提示Ｖ基因多态性ＴａｑＩ位点中ｔ基因与股骨颈骨ｔＭｌ一Ｆｕｎａｋｏｓｈｙ６２＞密度和身高存在关联性。ｉ等对１名２２４４岁日本家大规模综合制造企业中绝经前女性进行横断面研究，ＴａｑＩ基因频率为ＴＴ型７７．２％、Ｔｔ型２２％、ｔ型化０％。协方差分析校正ＢＭＩ后Ｔｔ．８年龄和基因型的平均骨密度显著低于ＴＴ基因型。多元线性回归分析提示年龄、体重指数（ＢＭＩ）和ＶＤ民基因多态性是ＢＭＤ的独立决定因素。提示ＢＭＤ与维生素Ｄ受体基因的Ｔｔ基因型ＰＳＩ呈负相关，但与年龄，ＢＭＩ呈正相关。波兰学者３２１名绝经后女性（其中１６３名骨质疏松症患者、％名骨量减少者与６３名Ｔ值正常女性）的ＶＤＲ基因多态性进行分析后发现ＶＤＲ基因多态性位点ＢｓｍＩ、Ａｐａｌ、ＴａｑＩ的出现频率在各研究组中并无统计学差异。ＴａｑＩ位点多态性中的纯合子ＴＴ型基因在骨质疏松组及骨量减少绝中出现频率较对照组高且ＢＭＤ值低。提示ＴａｑＩ位点多态性中Ｔ等位ＯｚａｌＷｎＥ８基因可用于预测骨质疏松症的发生。主耳其学者ｙｄｉ等８８名年龄在至１５岁且无骨骼影响疾病青少年的ＶＤＲ受体基因多态性、骨密度、身高、体重进巧相关性研究后发现，ＡＡ、ＴＴ基因型的腰椎骨密度较ｔ、Ａａ基因型高；ＴＴ基因型的儿童较ｔ型的儿童更高且更重，送提示ＶＤＲＴａｑＩ多态性可能与体一重及骨量有关，但与其他不同年龄段和性别人群之间的关系仍需进步研究。国ｎｉｉＴ内的李生强等对福州地区６０岁上汉族老年男性维生素Ｄ受体ａｑＩ多态性分布及与骨密度的关系进行分析后发现，ＴａｑＩ基因型分别为ＴＴ型１３６例（占９０．７％）、Ｔｔ型１４例（占９．３％），无ｔ型，Ｔ等位基因频率为９５．３％、ｔ等位基因频率４、、ａｒｃＴｓ为．７％，各基因型骨密度在腰椎股骨颈大转子、Ｗ区４个部位骨密度４４ 昆巧医科大学硕±研究生学位论文－．＞〇差异无统计学意义巧．〇５。目前国内各地区关于该位点对骨密度影响的研究报）告不多。一目前ＶＤＲ基因多态性与骨质疏松症的研究结论不，这与性别、年龄、受试人种一、样本量、环境影响等多种因素相关。同时骨质疏松症是个多基因作用的复杂疾病，，其遗传学发病机制尚不完全清楚为使ＶＤＲ基因多态性与骨质疏松症的真实联系得Ｗ揭示，今后的研究应当０）增加样本量，最好进行多中也协作，Ｗ获得较高的统计效率；２扩大候选基因研究范畴，考虑不同基因位点之（）间的相互作用，便更好的评价基因位点联合作用对０Ｐ的影响；（巧考虑性别及年齡差异导致机体受激素水平、环境因素影响对实验所带来的影响。目前对女性尤其是绝经期、绝经后妇女ＶＤＲ与ＯＰ的研究较多，但Ｗ儿童和男性为研究对象的研究较少；（４）探讨骨质疏松症表型的选择，恰当的选择研究表型能更全面准确地反映骨质疏松症的遗传特性５开展前瞻性研究－，充分考虑基因环境因；（）素之间的协同作用、分析易感基因与骨折风险的关系。３．参考文献：２００８，［１］朱慧锋，王珠美，王维佳，骨质疏松症相关基因的研究进展，实用医学杂志，－２４（１１）：１８６３１８６４．口］ＭＯＲＲＩＳＯＮＮＡ’ＹＥＯＭＡＮ民，邸ＬＬＹＰＪ，ｅｔａｌ．Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｔｒａｎｓａ幻ｉｎｇｆａｃｔｏｒａｌｌｅｌｅｓｔｏｎｏｒｍａｌｈｓｉｏｌｏｉｃａｌｖａｒｉａｂｉｌｉｔ：ｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｇｅｎｅｏｌｙｍｏｒｈｉｓｍａｎｄｐｙｇｙｐｐｐ－ｃｒｃｌａｓａｃ．ｒｌｃａｄｃｌＷ２１６６５ｉｕｔｉｎｏｔｅｏｃｌｉｎＪＰｏｃＮａｔＡＳｉＵＳＡ８５５：６６６６９．ｇ，，［］Ｋ）口］ＱＩＡＮＧｕｏｆｅｎｇ，ＺＨＡＮＧＸｉｕｚｈｅｎ－ＶｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅａｎｄｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ．Ｍｏｄｅｍｒｎａ２００３ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｌ，，３１：２７７０２８０４４Ｂ－ｍｏｏｉａｓＦａａｒｄｏＬ，ＡｎａｌｓｉｓｏｆＢｓｍＩｏｌｒｈｉｓｍｏｆｔｈｅｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒＶＤＲ［］［］ｊｊｙｐｙｐｐ（）ｇｅｎｅ扣ＶｅｎｅｚｕｅｌａｎｆｅｍａｌｅｐａｔｉｅｎｔｓｌｉｖｉｎｇｉｎｔｈｅｓｔａｔｅｏｆＺ山ｉａｗｉｔｈｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ，［Ｊ］Ｉｎｖｅｓｔ－Ｃｌｍ２００３，４４（０４）：２７５８２．，口］口］ＦｅｒｒａｒｉＳ，ＭａｎｅｎＤ，ＢｏｎｊｏｕｒＪＰ＂。／．ＢｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｍａｓｓａｎｄｃａｌｃｉｕｍａｎｄｐｈｏｓｐｈａｔｅｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｉｎｏｕｎｍｅｎＫｌａｔｉｏｎｓｈｉｓｗｉｔｈｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒａｌｌｅｌｉｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍｓ．；ｙｇｐｐｐｙｐ—ＪＣＵｎｄｏｃｂ．［］ＥｎｒｉｎｏｌＭｅｔ１９９９．Ｊｕｉｉｅ８４０６；２０４３２０４８．，（）雄等，维生素Ｄ受体基因ＢｓｍＩ、ＡａＩ、ＴａＩ、ＦｏｋＩ的邢丹，马信化马健ｐｑ和４５ 昆明医科大学硕±研究生学位论文Ｃｄｘ－２ｅ位点多态性与骨质疏松性椎体骨折相关性的Ｍｔａ分析，中华骨质疏松和骨矿２０１３０６０－盐疾病杂志：１６５１７３．，（巧［７］ＱｉｎＧ，ＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｖｉｌｉａｍｉｎＤ巧ｃｅｐｔｏｒＢｓｍＩｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｗｉｔｈｒｉｓｋｏｆ－ｔ－ｏｓｅｏｐｏｒｏｓｉｓｌｉｆ４１巧．ＪＭｌＢｉｌＲ．２０１４０ｌ４９７５０６．：ａｍｅｔａａｎａｙｓｓｏｕｄｉｅｓｏｏｅｐ３Ｊａｎ：［］；（），，Ｄ閒吴文，智喜梅李东风等广州地区绝经后妇女维生素受体基因多态性与骨密度－：关系的研究，中国病理生理杂志２００７２３０３５６３５６５．，，（），刘杰，巧］苗懿德，何培英等老年男性维生素Ｄ受体基因多态性与曾转换指标及１０Ｈ口Ｄ３的关系－，中国临床康氨２００４０８３：７４６９７４７１？，巧，巧）１０Ｄ陈堯，张莉萍，邱君凤等，重庆地区绝经妇女骨质疏松症与维生素受体基因多态［］－性的关系，中华医学遗传学杂志，２００３２００２：１６７１６８．，（）１１ＫｕｎｇＡＷＣＹｅｕｎｇＳＳＣＬａｕＫＳ．ＶｉｔｏｎｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｏｌｍｏｒｈｉｓｍｓａｎｄｅａｋ［］，，ｐｇｐｙｐｐｂｏｎ－ｅｍａｓｓｉｎＳｏｕｌｌｉｅｍＣｈｉｎｅ化ｗｏｍｅｎ＾…Ｂｏｎｅ．１９９８．Ａｒ２２０４：３８９９３？ｐ；（）［１２］ＤｕｎｄａｒＵ，ＳｏｌａｋＭ？ＫａｖｕｎｃｕＶ，ｅｔａＬＥｖｉｎｄｅｎｃｅｏｆａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｏｆｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒＡｐａｌｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｗｉｔｈｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙｉｎｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌｗｏｍｅｎｗｉｔｈＪＣｎｅｕｍａ００９〇－ｏｓｔｅｏｏｒｏｓｉｓｌｉＲｈｔｏｌ？２２８：ｌ１８７９１．ｐＪ］，ｙ）。３］ＵｉｔｅｒＵｎｄｅｎＡＱＲａｌｓｔｏｎＳＨ，ＢｒａｎｄｉＭＬ，巧ａｌ．Ｔｈｅａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｃｏｍｍｏｎｖｉｔａｍｉｎ－Ｄｒｉ－ｉｒｏｓｉｓａｎａｗｃｅｐｔｏｒｅｎｅｖａａｔｏｎｓａｎｄｏｓｔｅｏｏ：ａａｒｔｉｃｉａｎｔｌｅｖｅｌｍｅｔａｌｓｉｓ．ＡｉｍＩｎｔｅｒｎｇｐｐｐｙＭｅｄ５０４－Ｕ：２５５６４．．２００６，（）。４］Ｈｏｒｓｔ－ＳｉｋｏｒｓｋａＷ，ＤｙｔｆｅｌｄＪ，ＷａｗｒｚｙｎｉａｋＡ，ｅｔａｌ－Ａ＾ｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ，ｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙａｎｄｆｒａｃｔｕｒｅｓｉｎｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌｗｏｍｅｎｗｉｔｈｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ．［ＪＭｏｌ］Ｂ３－ｉｏｌＲｅ．２０１３，４００１：３８９０．ｐ（）。５ＭｏｒｉｔａＡ，贴Ｍ’ＤｏｈｉＸｅｔａＬＰｒｅｄｉｃｔｉｏｎｏｆｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙｆｒｏｍｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒ］ｐｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓｉｓｕｎｃｅｒｔａｉｎｉｎｒｅｐｒｅｓｅ打ｔａｔｉｖｅｓａｍｐｌｅｓｏｆＪａｐａｎｅｓｅＷｏｍｅｎ？了ｈｅＪａｐａｎｅ化－Ｐｏ－ｐｕｌａｔｉｏｎｂａｓｅｄＯｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓＳｔｕｄｙＪＰＯＳ．ＩｎｔＪＥｐｉｄｅｍｉｏｌ．２００４３３０：９巧８８．（），（＾口巧Ａ巧ｂｉＡ，ＭａｈｆｏｕｄＺａｈｅｄＬ，ＥｌＯｎｓｉＩ＿，ｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｏｆａｇｅ，ｇｅｎｄｅｒａｎｄｃａｌｃｉｏｔｒｏｐｉｃｈｏｒｍｏｎｅｓｏｎｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｏｌｒｈｉｓｍｓａｎｄｐｐｇｅｎｅｐｙｍｏｐ－ｂｏｎｅｍ．ｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙＥｕｒｏＪｏｆ口ｉｎＮｕｔｒｉｔｏｎ．２０１００４：３８９１，６４３．（）１７楽军伟，骨质疏松症与维生素Ｄ受体基因多态性的相关性，中国组织工程研究与临［］２０１１巧巧０－床康复：９４８６９４９０．，，）１Ｄ一二到邵雪景维生素受体基因多态性与２型糖尿病及血清１，巧疑基维生素Ｄ３的［，４６ 島明医科大学硕±研巧生学位论文２０１２Ｆｅｂ４－相关性研苑医学研究杂志：５０５４：〇２．，Ｕ），１９ＬｉＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｐｏｌｒｉｓｍｓａｎｄｂｏｎｅｍｉｎｅ口Ｉ［］乂ｙｍｏｐｈ口Ｍａ－ｄｅｎｓｉｔＣｉ巧：５７１７ｙｉｎｈｉｎｅｓｅｗｏｍｅｎ，ｏｌＢｏｌＲｅｐ．２００９．［Ｊ］Ｍｙ；间［２０］ＦｅｒｒａｒｉＳ，ＲｉｚｚｏｌｉＲ，ＳｌｏｓｍａｎＤ．Ｏ／ｅｔａｌ．ＤｏｄｉｅｔａｒｙｃａｌｃｉｕｍａｎｄａｇｅｅｘｐｌａｉｎｔｈｅｃｏｎｔｒｏｖｅｒｓｙｓｕｒｒｏｕｎｄｉｎｇｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙａｎｄｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｏｒｅｎｅｏｒｓｍｓｏｎｅ—ｔＭｎｅ９９１３７０ｌｍｏｈｉ？ＢｉｒＲｅｓ１８．３：３６３．ｐｇ，ｐｙｐ…２Ｄ，ＶｉｔｍｉｎＤ巧ｔＦｏｋＩｌｉｍｉｓｏｉａ化ｄｗｉ化ｌｏｗｂｏｎｉｎｅ巧Ｉ［ＵＷａｎｇａｃｅｐｏｒｐｏｙｍｏｒｐｈｓａｓｓｃｅｍｄｅｎｍｅ－ｓｉｔｓａｏｍｅｎ：ａｍｅａｎａｉｓＡｓｉａｙｉｎｐｏｓｔｎｏｐａｕｌｗｔａｌｙｓｆｏｃｕｓｅｄｏｎｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓｉｎｎ－〇５ｕｎｔｒｉｅｓＪＪｂｓＧｃＢｉｏ２１３Ｊｕｌ：６．ＥｕｒＯｔｅｔｏｌＲｒｏｄｌ．０１６９０２３８０．［］ｙｎｅ巧）；（２２，Ｆｋ，［韩昕北京部分汉族男性维生素Ｄ受体基因ｏＩ多态性与骨密度的关系中国组织］１３２４－工程研究与临床康复，２００９：４７６３４７６６．，（）［２３］ＲｅｍｅｓＴ，ＶａｉｓａｎｅｎＳＢ，ＭａｈｏｎｅｎＡｊｅｔａｌ．Ｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｙ，ｂｏｄｙｈｅｉｇｈｔ，ａｎｄｖｉｔａｍｉｎｍ－－Ｄｗｃｒｅｎｅｏｌｙｍｏｒｈｉｓｍｉｄｄｌｅ．ＪＡｎＩｔＭｅｄ２００５巧０：３８３９２．ｍａｇｅｄｍｅｎｎｎ，邱化ｇｐｐ［］（引２４ＦｕｎａｋｏｓｈｉＹ，ＲｅｌａｔｉｏｎｏｆｂｏｎｅｍｉｎｅｒａｌｄｅｎｓｉｔｔｏｖｉｔａｍｉｎＤｒｅｃｅｔｏｒｅｎｅｏｌｒｈｉｓｍ［］ｙｐｇｐｙｍｏｐ－－ｉｉ４４巧ｉａｎｄｌｆｅｓｔｙｌｅｆａｃｔｏ巧ｎＪａｐａｎｅｓｅｆｅｍａｌｅｗｏｒｋｅ巧ａ呂ｅｄ２２ｙｅａ；ａｃｒｏ巧ｓｅｃｔｏｎａｌｄＮｔｒ－巧ｓｔｕｉＶｉｔｉｌＴｏｋ２０１０５６１：２７ｙ，叫ｕＳｃａｍｎｏｏ．．ｇｙ（ｙｏ）；（）＊Ｓ－２５ｍａｋＭｉＭｒＰｉ化ｒｅ巧ｒｏｚｉｋｅｗｉａＡＤ巧ｗｓＫｉｋｉｅｉｃＭｅｔａｌ．ＣｏｌａｔｉｏｆｔａｉＤ［］，＇ｏｚｗｚ＇ｉｒｅｎｏｖｍｎｒｅｃｅｐｇｅｎｅ（ＶＤＲ）ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｗｈ：ｈｏｓｔｅｏｐｏｒｏｔｉｃｃｈａｎｇｅｓｉｎＰｏｌｉｓｈｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌｗｏｍｅｎ．Ｎｅｕ－ｒｏＥｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｌｅｔｔｅｒｓ２００９３〇４：５４０．Ｊｇｙ，５４６［］（）］－ｄ－口巧ＯｚａｉｎＥ，ＤａａｎｇａｃＥｒｄｅｎＤ，ＥｒｄｅｍＹｕｒｔｅｒＨ，约ａｌ．ＴｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｂｅｔｗｅｅｎｖｉｔａｍｉｎｙｙｐＤｒｅｃｅｐｔｏｒｇｅｎｅｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓａｎｄｂｏｎｅｄｅｎｓｉｔｙ，ｏｓｔｅｏｃａｌｃｉｎｌｅｖｅｌａｎｄｇｒｏｗｔｈｉｎ￣ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｓ．ＵｅｄｉａｔｒｉｃＥｎｄｏｃｏｒｉｎｅ在Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，２０１０２３０：４９１４％．］Ｐ，（如２７，葛继莱，］谢冰颖等，福州地区汉族老年男性维生素Ｄ受体基因多态性与骨［李生强密度的关系－，中国骨质疏松杂志２００９１５０８：巧８６０１．，（）４７ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文发表论文和参加科研情况１、杜思成．，杨秋萍维生素Ｄ受体基因多态性与骨质疏松症相关性的研究进展机，３５－昆明医科大学学敢２０１４，〇巧：３２７３３１．一２、２０１３年成功申请云南省教育厅科研创新基金研究生项目项（维生素Ｄ受体基因多态性与糖尿病性骨质疏松的相关性研究２０１３Ｊ０５４）４８ 昆明医科大学硕±研巧生学位论文致谢在本论文即将完成之际，谨此向我的导师杨秋萍教授致Ｗ衷必的感谢和崇高、的敬意！本论文的撰写工作是在杨老师的悉屯指导下完成的。杨老师她敏锐的洞察力、渊博的知识、严谨的治学态度、精益求精和不计较个人得失的工作作风给我留下了深刻的印象。在攻读硕±的这三年里，导师，将是我毕生学习的典范不仅为我创造了优越的科研和学习环境，同时在思想上、人生态度和意志质量方面给予了我惇淳教诲，送必将激励着我在今后的人生道路上奋勇向前。真诚感谢昆明医科大学第一附属医院内分泌二科全体医护人员在工作和学习中给予我的帮助！一真诚感谢昆明医科大学第附属医院检验科王玉明教授、、刘华副主任医师宋宇老师等对我科研实验的帮助！衷也的感谢我的父母、女友和其他亲朋好友对我的关也、支持和理解，没有他们对我的关也、鼓励和支持，我无法完成现在的硕±学业。、、最后，感谢曾经教育和帮助过我的所有老师和师兄师姐师弟、师妹们。衷也地感谢为评阅本论文而付出宝贵时间和辛勤劳动的专家和教授！４９