高产甘露醇明串珠菌中甘露醇脱氢酶的特性分析

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3、’＾％＂式。．蠢Ｉ赛赛蓄＾；．一学校代码：１０化４？分类号：农学硕击学位论文高产甘露醇巧串珠菌中甘露醇脫氨酶的特性分析ＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＩＩＣＳＯＦＴＨＥＭＡＮＮＩＴＯＬＤＥＨＹＤＲＯＧＥＮＡＳＥＩＮＰＡＴＨＷＡＹＯＦＬＥＵＣＯＮＯＳＴＯＣＨＩＧＨＬＹＰＲＯＤＵＣＩＮＧＭＡＮＮＩＴＯＬ王新养殖延边大学分类号密级ＵＤＣ学号２０１３０５０２７８—？？延这大聲项：女学位论义高产甘露醇明串珠菌中甘露醇脱氨酶的特性

4、分析巧究生姓名王新给养单位农学膝指导教师姓名、职称金清副教授単科专业聲殖巧突方向微：生物发骑论文提交日期２０１５年５月２５日本论文已达到农学硕±学位论文要求答辩委员会主席（印）寺子Ｃ．答辩委员会委员＿薰薑印）答辩委员会委员迎）悟？答辩委员会委员作硬糞）答辩委员会委员和《表嗔Ｐ：印）延边大学２０巧年５月２５日学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文系本人在导师指导下独立完成的研究成。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标记和致谢的部分外果，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的

5、研究成果，也不包含本人为获得任何教育机构的学位或学历而使用过的材料一。与我同工作的同事对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。一本人如违反上述声明，愿意承捏由此引发的切责任和后果。，研究生签名：－支４匀—日期：年月／曰学位论文使用授权声明本人在导师指导下所完成的学位论文，学校有权保存其电子和纸制文档，可Ｗ借阅或上网公希本学位论文的全部或部分巧容，可Ｌ义向有关部口或机构送交并授权其保存、借阅或上网公布本学位论文的全部或部分巧容。对于保密论文，按保密的有关规定和程序处理。本学位论文属于：１．保密□

6、，在年解密后适用于本声明；２．不保密曰＾：导师签暫！％口期如化年細／日研究生签名：＾＇延边大学硕±毕业论文摘要甘露醇，学名己六醇，可作为甜味剂在饲料中广泛应用。生产甘露醇的方法主要有提取法、化学合成法、酶转化法、微生物发酵法等。微生物发酵法因其可Ｗ提高甘露醇的产率并且能避免山梨醇等副产物的产生成为甘露醇生产的主要趋势。目前己经报道了多种微生物具有产生甘露醇的能力，包括霉菌、酵母菌和细菌，其中异型发薛郭酸菌为主要产生菌。明串珠菌作为弄一种型发酵乳酸菌的，其合成甘露醇的代谢途径是在甘露醇脱氨酶的作用下催化果糖生成甘露醇。

7、为了研巧明串珠菌中甘露醇脱氨酶的特性，使其更好地应用于甘露醇的生产，本实验Ｗ假厮膜明串珠菌为研究菌株，从假肠膜明串珠菌中获得甘露醇脱氨酶基因。：，并在大肠杆菌中获得表达结果显示Ｗ假肠膜明串珠菌基因组ＤＮＡ为模板，经ＰＣＲ扩増出大量甘露醇脱氨酶目的基因，ＰＣＲ扩增产物为１０１７ｂｐ。ＥＴＤｕ－－ｍｄｈ将重組质粒ｐｅｔ１转入大肠杆菌ＢＬ２１（Ｄ巧）进斤转化并且通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析重组蛋白是否成功表达，结果表明，蛋白表达的分子量约为一％．００７ｋＤａ的分子量大小。，与期望致，说明重组蛋白成功表达，且表达量较高为了优化ＥＰＴＧ诱导甘露

8、醇脱氨酶基