黄花白芨组培快繁技术

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1、维普资讯http://www.cqvip.com浙江林学院学报1999，16(2)：164—169文章编号：1000．5692(1999)02-0164-06黄花白芨组培快繁技术．(】浙江林学院资源环境系．浙江临安311300~2．浙江省临安市锦城林业站，浙江临安3113130)摘要：用不同的基本培养基、不同的植物生长调节荆覆其配比、不同的原球茎切割方式系统地研究了黄花白茇(Bletilkoehracea)组织培养技术。试验蛄果表明：1／2Ms+I．0nag·LBA+0．1mg·LNAA培养基有利于原球茎增殖．培养60d

2、增殖到4．21倍：Kyoto+10nag·L‘。BA+0．1nag，LNAA的培养基有利于诱导原球茎增殖、分化及幼苗的生长，培养60d分化形成的芽数为接种原球茎数的4．79倍；Kyoto+2．0nag·LBA+0．1nag·LNAA的培养基时球茎切块诱导芽的效果最好。在继代培养中，应采用纵切法切割球茎或用自然掰开法来分割原球茎。同时，对进一步的研究提出了建议。表5参4关键词：墓蓝皂墓；雹耋齐；雹越塑里；丝中图分类号：$682．31；O944．6文献标识码：B一——黄花白芨(盯。ochraeea)属兰科(OchJdacea

3、e)自芨属植物，分布于我国的云南、贵州及四川西南部。其花鲜黄，花期5—6月，具有较高的观赏价值，深受人们喜爱。因长期无限制人工采挖，生态环境遭破坏，天然贮置日益减少，目前市场上已将其视为稀有名贵的观赏种。黄花白芨多行球茎增殖．在人工栽培条件下，1个球茎1a形成1—3个新球茎(多数为1个)．年增殖率极低。本研究从无菌播种、基本培养基、植物生长调节剂种类与配比等环节撵讨黄花白芨的组织培养技术．旨在建立起无性繁殖系．探索行之有效的快速繁殖技术。这对于扩大栽培，满足市场需求以及保护野生资源都具有十分重要的意义。1材料与方法1．1

4、材料人工栽培的黄花自芨经人工授粉取得种子，用于无菌苗培育和组织培养试材。1．2方法无菌苗培育采用1／2MS(MurashigeandSkoog，其中大量元素减半)培养基，固态静止培牧槁H期：1998．09—28；恬I"／月埘：1999．01—20怍卉筒靠：求辟t1963一)，女浙江永求人，史骑虾．从恤物遗传肯种卅究。维普资讯http://www.cqvip.com第16卷第2期朱玉球等：黄花白芨组培快繁技术养方式。组培技术的研究选用3种基本培养基，即1／2MS(1962)，KC[Knudson(1946)C]与Kyoto

5、(KyotoSolution)，3种植物生长调节剂，即6-苄基氪基嘌呤(BA)、6-糠基氨基嘌呤(KT)和萘L~(NAA)不同配比，并用不同的外植体种类和切割方法观察原球茎的增殖和分化，统计原球茎个数和分化形成的芽数作为分析指标。2结果与分析2．1无菌苗培育采用成熟未开裂的蒴果，先用70％乙醇浸泡5mln，擦去果面的脏物，再放人I．0g·L升汞溶液中消毒20II1in，用无菌水冲洗3次。然后在无菌条件下呈十字状纵切果实，将种子轻轻抖落到培养基表面。约1周后可见种子吸水膨胀，并由黄褐色变为淡黄绿色，继而成小球体状(即原球茎

6、)。1个月后有80％的原球茎顶部出现幼叶，继续培养长成具根的小茁。22原球茎增殖和分化的一般情况原球茎经分割接种后I周左右，在原球茎表面开始形成纤细的白色绒毛，继续培养10d左右，产生1个或多个肉眼可见的乳白色的瘤状小突起，即新原球茎的初期。它是一类呈珠粒状的，由胚胎性细胞组成的，类似嫩茎的器官。在兰科植物中多以这种器官发育、增殖、分化，不同于多数植物组培中首先形成一团无固定结构形态的分生细胞(即愈伤组织)。随后，球状突起逐渐增大，呈浅绿色(新原球茎形成)。新形成的原球茎不经分割继续培养，有的形成丛生形的原球茎，有的形成

7、芽和小植株。即在同一培养物中，同时存在着不同发育时期的原球茎、芽和小植株。这与王熊等(1990)在地生兰离体培养中所观察的结果是相一致的。2．3基本培养基和植物生长调节剂对原球茎增殖与分化的影响23．I基本培养基对原球茎增殖和分化的影响以1．0rag·L。。BA和0．1rag·LNAA作为附加物，对3种不同养分水平的培养基作试验比较。连续进行了2次培养试验(试验1和试验2)。将接种后60d时统计结果列于表I。表1基本培养基对原球茎增殖与分化的影响TablelEfectofbasleeMturom*dlaonpjf哪t_啪

8、明dflifereafimJonoforlg~a]bulbs由表1可见，在I／2MS培养基中，原球茎只增殖，几乎不分化，而且新形成的原球茎短而粗，多数呈树权状丛生形。在另2种培养基中，情况与1／2MS不同，在培养30d时观察，原球茎与芽并存．培养到60d时观察，原球茎全部都分化成丛生芽和具有少量根的丛生苗。其中，Ky