植物常用培养基附加配制说明

《植物常用培养基附加配制说明》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、备注：培养基和激素母液配制方法（1）母液配制时，先向容量瓶中注入1/3定容体积的蒸馏水，再一一称取各种盐放入烧杯中溶解，装入容量瓶，不得一次称取所有盐，混合溶解！在配制大量母液时，氯化钙最后加入。（2）200×Fe盐溶液称取1.39gFeSO4•7H2O溶于水（A液）；称取1.865gNa2•EDTA溶于热水（B液）；将A液缓慢倒入正在加热的B液中，加水接近250ml，煮沸，混合液颜色变深，冷却到室温，定容到250ml后,置于棕色试剂瓶内4℃保存。 （3）0.5mg/ml2,4-D母液的配法称取50mg2,4-D，置于小烧杯内；加少量无水乙醇或95%乙醇使之完全溶解；加水定容至100m

2、l，4℃保存。如果出现沉淀，需要重新配置。 （4）0.5mg/mlα-NAA母液的配法称取100mgNAA置于小烧杯内；用1N的KOH溶液溶解NAA；用水定容至200ml，4℃保存。 （5）0.5mg/ml6-BA母液的配法称取100mg6-BA置于小烧杯中；加少量的浓盐酸，用玻棒研磨成糊状，再加入少量浓盐酸，使之完全溶解；用水稀释并定容至200ml，4℃保存。 （6）100mM乙酰丁香酮（As）的配制称取196.2mgAs，用5mlDMSO直接溶解，再加水定容至10ml，过滤灭菌后，分装入无菌小管，-20℃冰冻保存。使用前加入灭菌培养基。 （7）0.5mg/mlKT和ABT的配法称取

3、50mgkenetin或ABT生根粉，先用少量1NKOH溶解，再用水稀释定容至100ml，4℃保存。（8）其他附加物的溶解及配制A、称取吗啉乙磺酸（MES）5g溶于水中，定容至10mL。4℃保存。B、称取1gL-半胱氨酸(Cys)溶于2mL0.2mol/L或10%的NaOH溶液,用蒸馏水稀释定容至10mL，现用配制。4℃保存。C、称取850mg硝酸银，用蒸馏水溶解后定容至100mL。4℃保存。D、头孢霉素（cefotaxime）2500mg，用蒸馏水溶解后定容至10mL。4℃保存。E、潮霉素（HygB），商品已溶解，筛选时一般加5、8、12mg/L梯度浓度。植物培养的其他相关知识：培养

4、基culturemedium是植物组织培养的重要基质。在离体培养条件下，不同种植物的组织对营养有不同的要求，甚至同一种植物不同部位的组织对营养的要求也不相同，只有满足了它们各自的特殊要求，它们才能很好地生长。因此，没有一种培养基能够适合一切类型的植物组织或器官，在建立一项新的培养系统时，首先必须找到一合适的培养基，培养才有可能成功。在植物组织培养历史进程中，事实上也紧密地伴随着培养基的研制史。对植物的营养要求的不断认识，对已有培养基的改进，或者将新发现的植物激素、新的有益成分应用于培养基之中，都大大促进了组织培养研究的迅速发展，取得越来越多的成功。一、培养基的种类和成分（一）培养基的种

5、类培养基的名称，一直根据沿用的习惯。多数以发明人的名字来命名，如White培养基，Murashige和Skoog培养基(简称MS培养基)，也有对某些成分进行改良称作改良培养基，目前国际上流行的培养基有几十种，常用的培养基及特点如下：(1)MS培养基它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。特点是无机盐和离子浓度较高，为较稳定的平衡溶液。其养分的数量和比例较合适，可满足植物的营养和生理需要。它的硝酸盐含量较其他培养基为高，广泛地用于植物的器官、花药、细胞和原生质体培养，效果良好。有些培养基是由它演变而来的。(2)B5培养基是1968年由Gamborg等为培养大

6、豆根细胞而设计的。其主要特点是含有较低的铵，这可能对不少培养物的生长有抑制作用。从实践得知有些植物在B5培养基上生长更适宜，如双子叶植物特别是木本植物。(3)White培养基是1943年由White为培养番茄根尖而设计的。1963年又作了改良，称作White改良培养基，提高了MgSO4的浓度和增加了硼素。其特点是无机盐数量较低，适于生根培养。(4)N6培养基是1974年朱至清等为水稻等禾谷类作物花药培养而设计的。其特点是成分较简单，KN03和(NH4)2S04含量高。在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。(5)KM-8P培养基它是1974年为原生质体培养而设计

7、的。其特点是有机成分较复杂，它包括了所有的单糖和维生素，广泛用于原生质融合的培养。常用培养配方见表3-1。（二）、培养基的成分培养基的成分主要可以分水、无机盐、有机物、天然复合物、培养体的支持材料等五大类。1．水水是植物原生质体的组成成分，也是一切代谢过程的介质和溶媒。它是生命活动过程中不可缺少的物质。配制培养基母液时要用蒸馏水，以保持母液及培养基成分的精确性，防止贮藏过程发霉变质'大规模生产时可用自来水。但在少量研究上尽量用蒸馏水，以防成分的