一种快速提取香蕉叶片总核酸、总RNA和总DNA的新方法.pdf

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1、热带作物学报2014，35(1)：104—109ChineseJournaIofTrooicalCro一种快速提取香蕉叶片总核酸、总RNA和总DNA的新方法柴娟1'2，冯仁军。，史后蕊，一，任梦云．-，王静毅，张银东1}21海南大学农学院．海南海口5702282裹农业部热带磊作物耋生物学鸯与釜遗传资源利莆用重点磊实验錾室海辟南【羊J海件口571101摘要在SDS法的基础上，以富含多糖、多酚等次生代谢物质的香蕉叶片为材料，通过选择性添加适量5mol／LKAe(oH4．8)或不同体积无水乙醇分别提取香蕉叶片总核酸、总RNA(

2、不含DNA)和总DNA(不含RNA)。结果表明：不添加KAc的可提取到总核酸：添加1／3体积和2／3体积的KAc得到总RNA．添加1／3体积无水乙醇处理得到总DNA。该结果获得一种简单、快速，能在1次实验中添加不同试剂提取香蕉叶片总核酸、总RNA和总DNA的新方法关键词香蕉叶片；总核酸；总RNA；总DNA；快速提取中图分类号$668．1文献标识码AANewMethodofTotalNucleicAcid．TotalRNAandTotalDNAIsolationfromBananaLeavesCHAIJuan，-，FENG

3、Renjun，SHIHourui，RENMengyun0WANGJingyi”．ZHANGYindong’21CollegeofAgronomy,HainanUniversity,Haikou,Hainan570228,China2KeyLaboratoryofBiologyandGeneticResourcesofTropicdCrops，MinistryofAgriculture／InstituteofTropicalBioseieneeandBiotechnology,ChineseAcademyofTropica

4、lAgriculturalSciences(CATAS)Haikou，Hainan571101，ChinaAbstractTotalnucleicacid，totalRNA(noDNA)andtotalDNA(noRNA)wereisolatedfrombananaleaves，withhighpo1ysaccharides，polyphenolsandothersecondarymetabolites，usingthemethodbasedonSDSbyselectivelyaddingsuitable5mol／LKA

5、c(pH4．8)anddifferentvolumeofabsolutealcoho1．TheresultsindicatedthattotalnucleiccouldbeisolatedwithoutKAc，andtotalRNAcouldbeobtainedwith1／3or2／3volumeofKAc，andtotalDNAcouldbegottenwith1／3volumeofabsolutealcoho1．Variousnucleicacidsextractedinoneexperimentcouldmeett

6、hedemandsofmolecularbiologyexperimentwithaddingthetypeofreagent．Itisafastandsimplemethod．KeywordsBananaleaves；Totalnucleicacid；TotalRNA；TotalDNA；Rapidextractiondoi10．39690．issn．1000—2561．2014．O1．017从植物组织中提取RNA和DNA是进行植物分壁，而且富含大量脂质、蛋白质、多糖和酚类等物子生物学方面研究的必要前提高质量的RNA是质

7、[2-5]裂解细胞时．香蕉叶片中的酚类在多酚氧化基因克隆表达、RT—PCR、cDNA文库构建等实验酶作用下被氧化成醌类物质．多糖会形成难容的胶的原材料，高质量的基因组DNA是进行如SSR、状物与RNA共沉淀下来．这些均会造成一定量AFLP等分子标记技术的基础l1l从文献报道来看．RNA的降解和丢失．从而影响到核酸的提取因有许多植物就是由于未能有效地分离纯化其组织中此．能否有效地去除这些干扰是提取高质量香蕉核的RNA和DNA．阻碍其分子生物学方面研究的进酸成败的关键目前．提取植物总核酸的方法主展香蕉(Mus0paracli

8、siaca)为大型多年生草本果要有异硫氰酸胍法、CTAB法、SDS法、Trizol法树，属芭蕉科芭蕉属植物，是热带、亚热带地区最等18王尉等㈣在SDS法的基础上改用LiC1沉淀重要的水果之一香蕉组织不仅具有坚硬的细胞RNA，成功提取了香蕉叶片较高质量的RNA．但收稿日期2013—09—20修回日期2013—12—10