机械通气对急性肺损伤大鼠炎症反应的影响

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1、机械通气对急性肺损伤大鼠炎症反应的影响：叶正龙徐巧莲李士荣邹辉邱海波【摘要】目的：评估不同潮气量对急性肺损伤（ＡＬＩ）大鼠炎症反应的影响。方法：雄性SD大鼠30只，随机分为对照组、ALI组、小潮气量（LV）组、传统潮气量（NV）组及高潮气量（HV）组5组。机械通气4h后，进行肺组织病理切片Smith评分、肺水含量（ith评分、matoryresponseinratsaleSDratslydividedintofivegroups:normalgroup,ALIgroup,loe(LV)group,traditionaltidalv

2、olume(NV)group,hightidalvolume(HV)group.After4hoursofmechanicalventilation,lunginjuryithlunginjuryscore,lungeabilityindex(LPI),tumornecrosisfactorα(TNFα)andinterleukin10(IL10)levelsinbronchoalveolarlavagefluid(BALF)easuredbyELISA.ResultsSmithlunginjuryscoreandator

3、yresponseandalleviatelunginjuryinratmatoryresponse；rats　　患者机械通气是治疗急性肺损伤（ALI）的重要手段，由于患者ＡＬＩ病变的不均一性和具有正常通气功能的肺泡明显减少，使得在机械通气不当时，可以加重原有的肺损伤，引起呼吸机相关性肺损伤(VILI)，引发或加重全身炎症反应［1］。肺保护性通气策略即采用小潮气量（ＬＶ）加最佳呼气末正压对ALI者进行机械通气以避免肺泡的过度膨胀和肺泡的反复塌陷复张，防止VILI的发生。研究表明，肺保护性通气可降低ALI的病死率［2］。本实验通过研

4、究不同潮气量机械通气对ALI大鼠肺部炎症反应的影响，从肺生物伤的角度评价肺保护性通气策略，为肺保护性通气策略的合理应用提供实验依据。　1材料与方法　1.1主要材料　雄性SD大鼠由东南大学医学院实验动物中心提供，脂多糖（ＬＰＳ）购于Sigma公司，125I白蛋白购于北京生物技术公司，肺通透性（LPI）检测在东南大学放射免疫中心进行，小动物呼吸机（ASV0961001型）为美国Havard产品。　1.2动物分组及模型制备　雄性SD大鼠30只，体重200～250g，随机分为对照组、ALI组、LV组、传统潮气量（NV）组及大潮气量（H

5、V）组5组。对照组大鼠尾静脉注射生理盐水。LV、NV及HV组潮气量分别设为6、10及15ml·kg-1。动物称重后，腹腔注射戊巴比妥钠，仰卧位固定，鼠尾静脉注射LPS6mg·kg-1，制备ALI模型［3］，另一侧鼠尾静脉注射125I白蛋白0.2ml。机械通气模式及参数：气管切开置入气管插管，连接小动物呼吸机，容量控制模式，呼吸频率40次·min-1，吸入氧浓度100%。实验开始时肌肉注射泮库溴胺2mg·kg-1，使动物保持肌肉松弛状态。　1.3标本采集　实验开始4h后心内采血法处死动物，血液离心后留取血浆。分离气管，开胸取出肺脏

6、，寻找气管分叉，结扎右侧主支气管，用冰生理盐水对左肺进行肺泡灌洗，2ml×3次，回收率大于90%，将肺泡灌洗液(BALF)离心（1000r·mim-1，5min，4℃），分别留取上清液及细胞沉淀。　1.4肺损伤检测指标　　1.4.1组织病理学　　气管结扎后立即从右肺后叶取一块肺组织，迅速放入10%中性福尔马林中固定24h，然后进行石蜡包埋、HE染色，用于观察肺损伤程度。采用Smith评分方法［4］对肺水肿、肺泡及间质炎症、肺泡及间质出血、肺不张和透明膜形成分别进行0～4分的半定量分析：无损伤0分，病变范围＜25%为1分，病变范围占

7、25%～50%为2分，５０％＜病变范围＜75%为3分，病变满视野为4分，总肺损伤评分为上述各项之和。每只动物观察10个高倍视野，取其平均值。由两位病理科医师分别评分后取平均分。　　1.4.2肺水含量测定　　气管结扎后取右肺中叶，吸水纸吸干表面水分及血液，称重。置于80℃烤箱72h后称量肺干重，计算湿干重比（ith评分　　与对照组相比，ALI、LV、NV及HV组均可见肺泡腔及间质内白细胞渗出、浸润，肺泡腔内见渗出液，肺泡隔增厚，肺泡及间质充血，部分肺泡塌陷、不张、透明膜形成，肺泡结构破坏。其中ＨＶ组损伤最重。Smith评分（表１）显

8、示：与对照组相比，各组评分均显著增加（P＜0.05）；与ALI组相比，LV组评分显著降低（P＜0.05），NV组无明显差异（P＞0.05），HV组评分显著增加（P＜0.05）；与LV组相比，NV、HV组显著增加（P＜0.05）。2.1.2肺水含量测