桑黄菌丝液体培养及多糖提取工艺优化研究报告

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1、技术研究报告第一篇桑黄菌丝培养及多糖提取工艺优化第1章绪论1.1前言桑黄是目前国际公认的抗肿瘤效果最好的大型真菌之一，巴西蘑菇即姬松茸与其疗效相近。由于用于一般化学疗法的抗癌剂的毒性强，对癌症患者正常体细胞也具有杀伤作用，而桑黄多糖则几乎没有毒性，其通过提高机体免疫能力，杀伤癌细胞，这是真菌多糖抗癌的一大优点。桑黄多糖能明显提高患者的免疫能力，当与一般的抗癌化学疗法并行使用时，可以进一步提高治疗效果。因此桑黄的研究以及开发利用越来越热[1]。桑黄最早在日本及韩国得到开发利用，现已开始小批量人工栽培。由于

2、天然的桑黄数量非常稀少，难以成为稳定的工业产品来源，韩国一制药公司已率先开发出桑黄菌丝体培养法新技术，人工生产桑黄活性物质，并将其提取物用冻干法加工成粉末。由于抗癌效果显著，桑黄提取物干粉在韩国市场的售价高达每克2000多美元。日本一家专门从事生药加工的医药企业“津村株式会社”将人工培植的桑黄子实体加工成“破壁细胞超微粉末”，生产的“桑黄”(超微)粉末胶囊每瓶(288粒)售价高达3万日元。据统计，仅日、韩两国市场2002年各种桑黄剂的销售额合计已逾100亿日元。美国在本世纪初开始从日本进口桑黄制剂作为膳

3、食补充剂在本土销售。我国吉林省延吉市凭借独有的地域优势，现已开发出复合桑黄口服液，主要销往日本及韩国，在当地也有一定的消费市场。根据目前所掌握的资料，由于外商需求量大，价格高，致使国内各产地进行掠夺性开采，子实体孢子无法大量形成。结果造成该资源在东北地区已经难觅踪影，西北也即将枯竭。再加上我国天然的桑黄数量本来就非常稀少，子实体的人工栽培尚处于起步阶段，所以要想形成稳定的医药工业产品来源，就必须充分挖掘桑黄的自然资源，深入开展桑黄的人工栽培；另外还要进行菌种的分离培养，利用现代生物技术进行深层发酵。LX

4、VIII技术研究报告同时，应进一步测定桑黄提取物中的有效成分，探索其与菌种、菌龄以及培养条件的关系，确定桑黄有效成分在提高人体免疫机能、疾病的预防和治疗等方面的作用机制，使桑黄能够早日应用于人类的医疗保健事业[2]。1.2简介桑黄1.2.1桑黄的名称及分类桑黄（Phellinusigniarius、Phellinuslinteus和Phellinusbaumi）别名：火木层孔菌、针裂蹄（裂蹄）和鲍氏层孔菌。桑黄菌是一种多年生珍稀药用真菌，属担子菌纲(Basidiomycetes)、多孔菌目(Polypo

5、rales)、多孔菌科(Polyporaceae)，木层孔菌属(Phellinus)[3]。桑黄子实体中等至较大，无柄。菌盖半球形，剖面扁平至马蹄形，深烟色至黑色，有同心纹和环棱，初期有微细绒毛，后变光滑、稍龟裂，硬而木质化，2~12cm×3~21cm，厚1.5~10cm，边缘锐或钝，其下侧无子实层。菌肉深咖啡色、锈褐色或浅咖啡色，厚2~7mm。桑黄生于杨、柳、桦、桃等阔叶树的枯立木及立木上及树干上[4]。固因其着生树种不同，分为桑树桑黄、杨树桑黄和桦树桑黄等品种。其中，桑树桑黄子实体入药最佳。1.2.

6、2桑黄的分布桑黄主要分布于中国、日本、菲律宾、澳大利亚、北美、中南美等地。在国内，桑黄分布于河北、山西、内蒙古、黑龙江、吉林、台湾、河南、广东、陕西、宁夏、甘肃、青海、新疆、四川、云南等地，即集中分布区在黑龙江省东部乌苏里江与兴凯湖之间，西北地区陕西与甘肃交界的“子午岭”自然保护区，国外主要在日本、韩国、俄罗斯等国家分布。1.3桑黄的研究进展1.3.1桑黄药用功能的研究进展（1）抗肿瘤作用LXVIII技术研究报告桑黄的抗癌功能最早被日本学者等发现，研究表明桑黄野生子实体的提取物对小鼠肉瘤180的抑制率为

7、96.7%。研究还表明具有抗癌作用的物质是桑黄子实体中的多糖。（2）提高免疫力Hwan-MookKIM等用P.linteus的菌丝体胞外多糖（EPS）进行免疫学实验，发现EPS不仅能够使T细胞增殖，而且对不同同类抗原的T细胞也有增殖作用，并且毒性T淋巴细胞的毒性在加桑黄胞外多糖（EPS）后大大增强。Yun-HeeShon等发现桑黄提取物可以诱导相解毒酶包括苯醌氧化还原酶（QR）和谷胱甘肽-S转移酶（GST）的活性，并且提高了谷胱甘肽的水平。张万国[5]等对桑黄子实体提取物对人外周血单个核细胞（PMNCs

8、）产生C-干扰素（IFN-C）的研究表明桑黄具有诱生IFN-C的能力，能显著增高小鼠的血清IFN-C水平，有利于其发挥调节机体免疫力，抑制肿瘤细胞增殖的作用。（3）抗突变作用Shon[6]等用桑黄提取物的抗突变实验中发现，提取物可有效的抑制诱变剂对沙门氏菌的诱变作用。（4）抗血管生成试验Yun-SeonSong等在小鸡胚胎绒膜尿囊膜（CAM）试验中，发现随桑黄提取物加量的增加抑制效果增加，说明提取物有较好的抗血管生成活性。（5）清除自由基的