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1、安徽农学通报,AnhuiAgri1Sci1Bull12007,13(10):3333液体培养的灰树花菌丝体多糖提取方法研究1233叶国平梁锦锋于红卫(1临海市林特局河头镇林特站,浙江临海317034;2浙江林学院林业与生物技术学院,浙江杭州311300;3浙江林学院林业工程学院,浙江杭州311300)摘要:灰树花又名莲花菌、贝页多孔菌等,分类上属于担子菌亚门、层菌纲、非褶菌目、多孔菌科、多孔菌属。本文以液体发酵所得的灰树花菌丝体为实验材料,采取热水浸提、酸浸提、碱浸提法探讨了灰树花多糖的提取工艺。结果表明:碱浸提法提取率为9.370%,酸浸提法提取率为6.340%,热水浸提法提取率为7.
2、423%,碱法提取要优于热水、酸浸提法。关键词:灰树花;多糖;菌丝体;提取中图分类号Q539文献标识码B文章编号1007-7731(2007)10-33-01灰树花(Griofolafrondosa)又叫贝叶多孔菌,我国河北100ml。称栗蘑,四川称佛菌,福建称重菇,日本称舞蘑,美国称林1.7稀酸浸提将烘干的菌丝样品用滤纸包好与0.5鸡,其外观灰白色,如卷心菜大,肉质脆嫩,味如鸡丝,芳香mol/lHCI溶液按质量比为1:40混合置于50ml蒸馏瓶,[6]诱人,风味独特,是近年来开发的珍奇食药两用菌之一。80℃水浴中恒温浸提2h,后续处理同热水浸提法。浙江、河北、四川、云南、福建、上海等地
3、一些科研单位对其1.8碱法提取将烘干的菌丝样品用滤纸包好与0.5进行了引种驯化和实验栽培。浙江省庆元、河北省迁西等mol/lNaOH溶液按质量比为1:40混和,置80℃水浴中恒[7]地区开始了规模化生产,北京市昌平黑山寨也曾种植。温浸提2h,后续处理同热水浸提法。灰树花营养丰富,富含人体所必须的9种氨基酸及维生素1.9多糖含量测定蒽酮比色法测定各样品中多糖含[8]和微量元素钙、铁、锌、硒等。灰树花多糖因具有抗肿瘤、量。多糖提取率计算公式:多糖提取率=多糖重量/菌抗HIV病毒、调节免疫、调节内分泌与营养代谢等多种生丝体干重×100%[2～5,9,10]物活性而受备受菌物学家的关注。本文以液
4、体培1.10统计分析每个样品设3个重复,用excel程序进养所得的灰树花菌丝体为材料,探讨了酸法,碱法和热水行统计分析作图。浸提法对其多糖提取的效果,旨在为灰树花多糖的工厂化2结果与分析生产提供一定的借鉴。图1表明,热水浸提法菌丝体多糖得率7.423%,酸法1材料与方法浸提多糖得率为6.340%,而碱法浸提其多糖得率达到1.1菌种灰树花在浙江庆元食用菌研究所购得。9.370%。在3种提取方法中,碱法浸提多糖得率要显著1.2仪器720型分光光度计、具塞比色管、HG303电热高于热水浸提和酸法浸提。结合考虑用酸碱溶液提取时恒温培养箱、PHS3C-酸度计、HY-8调速振荡器、LRH-所用时间较
5、短,因此,相比较而言,碱液浸提法更适用于灰250-A生化培养箱、HY31电热恒温水浴锅、YXQ.SG树花多糖的提取。41.28电热手提蒸气消毒器、分析天平。1.3培养基(质量分数)葡萄糖3%,土豆20%,蛋白胨0.6%,豆油0.1%,硫酸镁0.05%,磷酸二氢钾0.05%,pH6.0。1.4摇瓶试验条件100ml/250ml三角瓶,25℃,摇床转速120r/min,培养4d。1.5菌丝体干重测定将培养液中的培养物过滤,蒸馏水清洗3次,收集菌丝,连同滤纸在50℃烘箱中烘12h,至恒重后减去滤纸重量,即得菌丝干重。1.6热水提取法将烘干的菌丝样品用滤纸包好置于50ml蒸馏瓶与蒸馏水按质量比为
6、1:40混和,置于80℃水图1不同提取方法的多糖提取率浴中恒温浸提6h。冷却至室温,4000r/min离心,取上清3讨论[1]液,浓缩5倍。Sevag法去蛋白质3次,将滤液定容至张士国等利用灰树花子实体进行(下转177页)作者简介:叶国平(1959-),男,浙江临海人,助理工程师,主要从事农林新技术推广。收稿日期:2007-04-25177发生快醒棵早,缓苗期变短,所有长势长相说明天达2116生长,植株矮化、畸形,叶色浓绿、叶形皱缩等,侧枝丛生、壮苗型能够促进棉花营养生长,壮苗早发。(见表1)叶部药斑、叶缘焦枯加重甚至于脱落。由上看出天达2.3天达2116对棉花产量效应的影响观测天达21
7、162116对缓解棉花药害有很大的影响,能解除农药对棉花对棉花花铃期这一阶段对棉花成铃的影响,如表2所示,毒性,维持棉株正常生长。使用天达2116棉株不发生疯长现象,果枝旺盛,强势果节2.6天达2116对棉花抗病性的影响定期观测天达多,结铃性强,成铃率高,铃重增加,由此说明天达2116能2116在枯黄萎病易发田块使用后棉花的生物学性状,结够有效控制徒长,促进干物质运输积累,使有效干物质积果显示:使用过天达2116的棉株无枯黄萎病的发
