灵芝菌丝体对提高河鲀免疫力的影响论文

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时间:2018-07-06

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1、灵芝菌丝体对提高河鲀免疫力的影响论文.freel)健康活泼的河鲀鱼10000尾,试验前先用基础饲料驯养7d,待供试鱼适应环境,并确认无疾病症状后,随机分成4组入池(每池2500尾)。试验以投喂基础饲料(正常河鲀饲料)为对照组(池),以投喂在基础饲料中分别添加不同含量(0.5%、1%、2%)的饲料添加剂的试验饲料为试验组(池),饲养河鲀60天。每天按正常投饲量投喂河鲀饲料,使之饱食,并根据水温适当调节,水温保持在21.6~27.8℃。饲养管理按正常生产进行,每天记录投饲量,计算出摄食量,河鲀疾病的防治对照中洋集团的养殖厂常规进行。并于投喂饲料添加剂后的

2、第15、30、45、60天,从各组中用随机捞取的方法捞取8尾供试鱼取脾脏组织在-20℃冰箱中保存,备用。2结果与分析2.1试验结果(1)取样策略:试验开始后的第15、30、45、60天,从试验池中随机捞取8尾受试鱼进行采血,血清收集在-20℃冰箱中保存,备用。取样时停饲1次,测试各组受试鱼50尾,并测量体重、体长、体全长(本文主要探讨药性菌质对河鲀免疫力影响,关于生长方面指标将另文探讨)。(2)受测指标:A酶活性的测定。用脾脏组织测定溶菌酶、SOD活性,测定按所购试剂盒(南京建成生物工程研究所)的方法在南京晓庄学院进行。B回感试验。各组分别留存供试鱼

3、10尾,饲养在南京晓庄学院养殖室内,观其行为正常并能正常摄食混合饲料时,进行回感试验。用一定浓度的嗜水单细胞菌用注射方法进行肌注感染,观察注射后各组行为变化、症状和死亡率。一周后按组对每尾河豚鱼进行解剖,肉眼观察其表皮、粘液、肌肉丰度、肝脏体积、含血量等和手指接触等指标予以比对后进行记录。2.2实验结果试验数据用ANOVA软件进行方差分析,Duncan's进行多重比较。(1)投喂药性菌质添加剂对河豚鱼相关酶活性的影响在投喂药性菌质后,实验3、4组的溶菌酶活力有所升高并在45d时达到最大值,且以2%试验组溶菌酶活力最高,1%次之,与对照组相比差异显著。

4、(2)回感实验结果。在回感实验中,1%试验组死亡率最低,体表颜色鲜艳,表皮光滑,肌肉丰厚,但头颈部表皮粘液呈片脱落,肝脏体积最大,血量较多,肝脏外表充血程度最小;对照组表皮较光滑,肌肉肥满程度一般,肝体积中等,血含量较大仅次子1%试验组;0.5试验组,表皮欠光滑,肌肉不丰满,肝脏外表呈条状充血(约3cm),肝叶血管较厚;2%试验组表皮稍显光滑,肝小,含血量少,肝脏整体充血,靠腹部有长条血痕(约4cm)。从中可以看出,药性菌质能有效促进生长和提高鱼体免疫力,其用作饲料添加剂的添加量应为2.0%组效果最佳,1.0%组效果佳。2.2分析与讨论药用真菌具有提

5、高免疫、抗肿瘤、延缓衰老、降血脂等多种生物功效,在医药、食品领域受到广泛关注。溶菌酶是鱼体内具有杀灭外来细菌的活性酶,这种酶在鱼体免疫和抗病过程中发挥着很重要的作用。鱼体中溶菌酶的产生与哺乳类动物相似,主要由嗜中性粒细胞和单核细胞产生,少量由巨噬细胞生成。溶菌酶是鱼类防御微生物入侵的最有效因子之一,对于革兰氏阳性菌溶菌酶主要是通过破坏细胞壁的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰葡糖胺之间的聚糖链,使细胞壁失去韧性,细菌发生低渗性裂解,从而杀伤细菌。而对于革兰氏阴性菌,溶茵酶是在补体和其他酶已经破坏细菌外层胞壁,露出细胞内层肽聚糖之后起作用。作者通过试验知添加药性

6、菌质后,随着饲喂时间增加,各组鱼溶菌酶活力均有一定程度提高,并在45天左右达到最高,而后有所降低,且以添加2%效果明显(P<0.05),说明药性菌质组均能提高河鲀的溶菌酶活力,提高免疫水平,推测可能是药性菌质中成分激活了单核细胞的分泌功能,从而使溶菌酶大量释放。在回感实验中2%组活动力强,运输过程中碰撞严重,其应激反应亦强,对肝脏损伤大,解剖该组鱼发现个体的肝萎缩,肝脏血量少,表明其急性死亡率高,因此,整个实验显示菌质添加量在0.0%到2.0%范围内,随着添加量增加,免疫细胞增殖能力逐渐增强。试验证明在饲喂含有药性菌质45d后效果达到最好,因此使用本

7、药性菌质作为饲料添加剂应在河鲀易发病前45d效果最好。

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