二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响论文

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1、二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响论文党建章,.freelGroalucidumAbstract:ObjectiveToexploretheapplicationofchlorinedioxideasantisepticincultivationandsubmergedculturalofGanodermalucidum.MethodsThemyceliumgroaluciduminedbyplateculturemethodandbiomassbysubmergedculturemethod.ResultsMyceliumofGanodermalucidumgreeclosetot

2、hecontrastediumperature.ConclusionThisprovidesafirmfoundationforthecultivationandsubmergedcultureofGanodermalucidum.Keyalucidum;Myceliumgroalucidum作为药用真菌其功效已家喻户晓。近年来灵芝作为保健食品和美容化妆品的添加剂,其应用日益广泛。传统方法栽培灵芝,培养料均要高温灭菌。笔者在筛选灵芝培养的消毒剂时,发现二氧化氯对各类微生物都有较强的杀灭和抑制作用,而且对人畜无害[1].freela.lucidum)AS.565,由本系提供。美国

3、灵芝、日本灵芝、惠州灵芝、信州灵芝、紫芝、黑芝均购自山东金乡真菌研究所。杨树菇、云芝、茯苓、茶新菇、金针菇均购自华中农业大学。霉菌(黑曲霉、根霉、青霉),细菌(大肠杆菌、枯草杆菌)由本系提供。1.2斜面培养基(%)马铃薯(去皮)20;葡萄糖2;KH2PO40.3;MgSO47H2O0.15;琼脂2;pH6.5。1.3摇瓶种子和发酵培养基(%)葡萄糖20g;蛋白胨10g;酵母膏2g;水1000ml;pH自然。1.4药品二氧化氯(ClO2)为深圳市科瑞德消毒用品科技开发有限公司产品,商品制剂ClO2含量为2%(YSS-325TOMYKOGYOCO.LTD.日本,MFS-11多功能三

4、维旋混仪(摇瓶机)深圳潘西诺生物科技有限公司。2方法2.1ClO2对霉菌和细菌的抑制作用每个培养皿中加入20ml斜面培养基,趁热加入ClO2,摇匀,使ClO2制剂最终浓度为0.1%~1.0%(每100ml培养基中加ClO2制剂0.1~1.0ml),以未加ClO2并经高压灭菌过的培养基作为对照。涂布法接种霉菌和细菌,每个浓度每种菌各接3个培养皿,霉菌置于28℃、细菌置于37℃恒温培养,隔天观察生长情况,培养5d。2.2ClO2对赤芝的抑制作用方法同上述,ClO2浓度为0.1%~5.0%,每个浓度设3个重复。接入赤芝菌丝,置于28℃恒温培养,隔天观察菌丝生长情况,培养10d。2.3

5、ClO2对其他种灵芝及食用菌的影响根据上述实验结果,确定培养赤芝时ClO2的最适浓度为0.7%。在斜面培养基中,加入ClO2,使其最终浓度为0.7%。接入其他灵芝菌和食用菌,每种菌种设3个重复,培养8~12d。2.4ClO2对灵芝摇瓶培养的影响将葡萄糖、蛋白胨培养基1000ml装入3000ml三角瓶中,加入0.7%ClO2,立即用保鲜膜密封,摇匀,放置1h,然后用灭过菌的棉塞替换保鲜膜,另设对照组,接入赤芝液体菌种,接种量10%。放入多功能三维旋混仪中培养,摇瓶温度30℃、转速为150r/min。摇瓶3~4d,发酵液有浓厚的灵芝特有的气味,并伴有大量的菌丝球时,可终止发酵。将发

6、酵液在100目筛网中过滤,用自来水反复冲洗,然后将菌丝体置于80℃烘干至恒重,称重。以每升培养基中含菌丝干重表示(gL-1)。3结果3.1ClO2对霉菌、细菌的抑制作用由表1可知,对照管5d之内都长满,而0.1%~1.0%的ClO2对上述微生物有明显的抑制作用。其中真菌比原核微生物耐受ClO2的能力强。表1ClO2对霉菌、细菌的抑制作用(略)+++表示菌丝或菌落长满平板;-表示无菌丝或菌落生长3.2不同浓度ClO2对赤芝的抑制作用由表2得知,ClO2浓度在0.6%~0.7%时对赤芝有一定的抑制作用,使得赤芝萌发比对照晚2d,但菌丝长满平板的时间均为10d。ClO2浓度在0.8%

7、~1.0%时,对灵芝的生长有明显的抑制作用,浓度2.0%时完全抑制赤芝菌丝的生长。根据上述的结果,培养赤芝时,选用ClO2的浓度为0.7%,此浓度对霉菌和细菌抑制作用强,但对赤芝的生长影响不大。3.30.7%ClO2对其他灵芝菌及食用菌的抑制作用表3中每种菌都设有对照组,其8~10d菌丝都能长满。表3中0.7%ClO2能完全抑制紫芝的生长,原因还有待进一步研究。另外实验所选用的几种食用菌都有明显的抑制作用。表2不同浓度ClO2对赤芝的抑制作用(略)+++表示菌丝或菌落长满平板;-表示无菌丝或

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